bFGF及相关细胞因子转染对人骨关节炎软骨细胞的作用

目的：探讨腺病毒介导的人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）单独及与白细胞介素-1受体拮抗蛋白（IL-1Ra）和／或胰岛素样生长因子-1（IGF-1）共同转染人骨关节炎（OA）软骨细胞后对软骨细胞的影响。

碱性成纤维细胞生长因子及相关细胞因子转染对兔骨关节炎的作用

目的 观察重组人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）单独及联合白细胞介素-1受体拮抗蛋白（IL-1Ra）和胰岛素样生长因子（IGF）-1基因转染对兔膝骨关节炎（OA）模型的治疗效果.方法 前交叉韧带切断法将新西兰兔膝关节制成OA模型.分别向膝关节内注射单独bFGF或多重组合的重组腺病毒载体各1×108 PFU.3周后关节液分析目的 基因表达和糖胺聚糖（GAG）浓度.关节标本行Mankin评分及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.结果 基因转染后,在关节液中可检测到相应目的基因的表达.OA组软骨损伤较大,Mankin评分为（8.60±1.14）,关节液中GAG为（69.96±8.32）mg/L.与OA组相比,单独bFGF转染后软骨Mankin评分降低（P＜0.05）,为（6.00±0.71） bFGF与IL-1Ra和IGF-1联合转染后,Mankin评分进一步降低（P＜0.05）,为（3.80±0.84）.单独bFGF转染后对GAG释放无明显抑制作用,联合基因转染可显著抑制基质降解,减少GAG的释放.结论 bFGF单独转染可对OA发挥一定的治疗作用.bFGF、IL-1Ra和IGF-1联合转染可有效改善OA病程,其疗效优于bFGF单独转染,提示多基因联合转染治疗OA更为有效.

碱性成纤维细胞生长因子及相关细胞因子转染对人骨关节炎软骨细胞的作用

目的探讨腺病毒介导的人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）单独及与白细胞介素-1受体拮抗蛋白（IL-1Ra）和（或）胰岛素样生长因子（IGF）-1同转染人骨关节炎（OA）软骨细胞后对软骨细胞的影响。方法采用单独编码人bFGF的重组腺病毒载体或多重组合的重组腺病毒载体转染单层培养的人OA软骨细胞。6d后分别检测培养上清液中目的基因表达和糖胺聚糖（GAG）含量。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法及流式细胞术分析软骨细胞的增殖及凋亡。甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察软骨细胞基质的合成。免疫印迹法检测Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶（MMP）-3及其抑制剂-1（TIMP-1）的表达。采用单因素方差分析，并进行组间两两比较。结果各基因转染后，细胞上清液目的基因表达与OA对照组相比明显增高（P〈0．05）。bFGF单独转染可促进软骨细胞增殖，增加Ⅱ型胶原和蛋白多糖的合成（P〈0．05）。与bFGF单独转染相比，联合IL-1Ra和（或）IGF-1共同转染后，可降低软骨细胞的凋亡率[分别为：（26．1±1．6）％、（19．4±1．0）％、（18．4±1．1）％、（13．9±1．8）％，P〈0．05]，进一步增加了软骨基质的生物合成（P〈0．05）。同时，抑制了MMP-3的表达，增加了TIMP-1的表达。结论腺病毒介导的bFGF转染人OA软骨细胞可促进细胞增殖，增加基质的合成。与IL—IRa和IGF-1共转染后可发挥协同作用，进一步增加基质合成；同时，抑制了基质的降解。