人巨细胞病毒重组抗原在酶联免疫吸附试验中的应用研究

目的：探讨人巨细胞病毒重组抗原在ＥＬＩＳＡ中的应用。方法：采用基因工程方法组建含有巨细胞病毒ＰＰＵＬ３２及ＰＰＵＬ４４蛋白共三个强抗原决定簇基因的重组抗原克隆，以此重组抗原建立ＥＬＩＳＡ方法，用于１１７份待测血清巨细胞病毒ＩｇＭ抗体的检测，并将ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印方法进行了比较。结果：经统计学分析，建立的ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印检测方法的检测结果具有非常显著的一致性（χ２＝５４．０８，Ｐ＜０．０１）。与免疫转印方法比较，其敏感性和特异性分别为１００％和８１．３％；阳性预测率和阴性预测率分别为６０．５％和１００％，此ＥＬＩＳＡ方法具有良好的重复性。结论：此重组抗原具有良好的应用价值，可望替代ＨＣＭＶ感染ＥＬＩＳＡ诊断中的全病毒抗原。

食品非酶褐变评价方法的研究

本文研究了不同温度与水的活度下杏泥非酶褐变的动力学,用HS－GLC色谱仪测试连续贮藏下的密封试样上部空间CO_2含量的变化,作为非酶褐变评价的指标及计算产品货架寿命的依据．试验表明,反应速率动力学常数(K_b)随温度的上升而增大的数值大于随水的活度上升而增大的数值试样在充N_2条件下的速率常数低于含O_2条件下数值,货架寿命也较长,但未表明对活化能有降低的任何影响．

基因重组人巨细胞病毒PPUL32蛋白在诊断中的应用

为组建可在诊断中应用的高纯度、高效价基因工程抗原,我们在同一克隆中同时表达了人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus HCMV)PPUL32蛋白的两个抗原决定簇基因,在诊断中取得满意的结果。 材料和方法 1.克隆 A:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第1783～1842核苷酸的抗原决定簇基因。 2.克隆 B:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第3070～3144核苷酸的抗原决定族基因;克隆C和D分别表达此基因的二个和三个拷贝。

人巨细胞病毒PPUL44蛋白核定位信号结合多肽氨基酸序列分析

目的 寻找与人巨细胞病毒 (HCMV)PPUL44蛋白核定位信号 (NLS)具有较强结合能力的多肽 ,研究这些多肽的氨基酸序列特点。方法 采用合成的HCMVPPUL44NLSA和NLSB分别在一个随机多肽文库中筛选出与NLS具有结合能力的克隆 ,用四色荧光自动测序的方法测定上述克隆的DNA序列 ,对这些克隆的多肽氨基酸序列进行同源性比较 ,并与蛋白质文库中已知蛋白的氨基酸序列进行比较。结果 与HCMVPPUL44NLSA具有结合能力的多肽 (bNLSApep)的氨基酸序列与细胞输入蛋白Importinα亚单位的氨基酸具有较高的同源序列 ,其中bNLSApep48氨基酸序列AVVTPVLTEILK与lmportinα亚单位的Arm7区的第 18至 2 9氨基酸序列ANIFPVLTEILQ具有极高的相似性 ;bNLSBpep39氨基酸序列则与lmportinα亚单位的全部 8个Arm区的第 10至 2 1氨基酸的同源序列相似。结论 HCMVPPUL44NLSA可能是lmportinα亚单位针对HCMVPPUL44蛋白的特异性识别位点 ,与lmportinα亚单位Arm 7区结合 ;而HCMVPPUL44NLSB则为lmportinα亚单位的非特异性识别位点。