DEHP及其代谢产物MEHP对MLTC-1细胞凋亡和类固醇激素合成基因表达的影响

目的实验测评DEHP及其主要代谢产物MEHP暴露对MLTC-1细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响。方法将MLTC-1分别暴露于DEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)和MEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)24 h,采用Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中涉及关键酶的基因表达水平。结果凋亡实验结果显示DEHP(100和1 000μmol/L)和MEHP(10和1 000μmol/L)显著诱导MLTC-1细胞晚期凋亡的发生,1 000μmol/L DEHP和MEHP显著降低了MLTC-1活力。所以本研究采用了较低的染毒浓度(1,10和100μmol/L)对MLTC-1染毒24 h来评估DEHP和MEHP对MLTC-1类固醇合成通路的影响。荧光定量结果显示1μmol/L DEHP显著增加MLTC-1 CYP17A1基因表达水平,而100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1 CYP17A1、CYP11A1和SF-1基因表达水平。10μmol/L DEHP显著增加MLTC-1外CYP1A1基因表达水平。100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1黄体激素受体LHR基因表达水平。1μmol/L MEHP显著增加MLTC-1 3β-HSD基因表达水平。然而MEHP对类固醇激素合成过程中一些酶如STAR、CYP17A1、CYP11A1、重要调节因子胰岛素样激素3 INSL-3、SF-1、关键受体AR和LHR基因表达水平均无显著影响。结论 DEHP和MEHP诱导MLTC-1凋亡,DEHP和MEHP都可影响MLTC-1细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达,从而引起内分泌干扰。