hTERT表达水平对乳腺癌干细胞体外生物学行为的影响

目的观察人端粒酶反转录酶反义寡核苷酸(h TERT ASODN)对乳腺癌干细胞生物学行为的影响。方法合成针对人端粒酶反转录酶(h TERT)的反义寡核苷酸,以脂质体转染的方法将其转染入乳腺癌干细胞,设为ASODN组,以正义序列转染作为阴性对照组,并设未处理对照组。RT-PCR和Western blot分别检测各组h TERT基因和蛋白表达。应用CCK8法检测转染对乳腺癌干细胞增殖的影响,Transwell小室法检测干细胞侵袭、迁移能力。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示,ASODN组h TERT基因相对表达量为0.40±0.03,低于阴性对照组(0.81±0.05)和未处理对照组(0.79±0.04),F=137.33,P<0.001;h TERT基因蛋白相对表达量为0.39±0.06,低于阴性对照组(0.87±0.04)和未处理对照组(0.90±0.02),F=59.29,P<0.001。CCK8结果显示,乳腺癌干细胞培养12、24、36、48和60 h,ASODN组细胞增殖能力明显低于阴性对照组和未处理对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验,ASODN组穿越Transwell小室的细胞数为8.40±0.36,低于阴性对照组(15.64±0.13)和未处理对照组(14.31±1.12),F=94.56,P<0.001。Transwell迁移实验,ASODN组穿越Transwell小室的细胞数为30.6±8.03,低于阴性对照组(51.40±5.66)和未处理对照组(53.11±6.34),F=20.11,P=0.002。结论 h TERT ASODN可显著抑制乳腺癌干细胞体外增殖、侵袭和迁移能力。