HSV-2gD、gBCTL表位及Hsp70融合DNA疫苗的免疫效果观察

目的研究多表位重组DNA疫苗pc(pcDNA3.1-)-P6-gBCTL-Hsp70的免疫原性。方法将构建的真核表达质粒pcP6-gBCTL-Hsp70转染CHO细胞表达,采用间接免疫荧光和Western blotting检测P6抗原的表达情况。将重组质粒肌肉注射免疫接种Balb/c小鼠3次,每次间隔2周。末次免疫后1周采集眼眶静脉血,末次免疫后1月无菌分离小鼠脾脏。采用ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量,MTT法测定脾淋巴细胞增殖率,LDH法检测CTL活性。结果重组质粒pc-P6-gBCTL-Hsp70具有一定的免疫原性,可刺激机体产生特异性抗体,诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18,促进小鼠脾淋巴细胞的增殖,CTL杀伤病毒感染细胞活性增强。结论重组核酸疫苗pc-P6-gBCTL-Hsp70能诱导较强的细胞免疫和体液免疫。

悬浮培养与贴壁培养对乳腺癌MCF-7细胞形态及CD44、CD24表达的影响

目的采用悬浮培养和贴壁培养两种方法分别孵育人乳腺癌MCF-7细胞株,观察细胞形态及干细胞标志物CD44、CD24的变化。方法将乳腺癌MCF-7细胞株同时进行第一代悬浮培养和贴壁培养,用倒置显微镜观察悬浮细胞及贴壁细胞形态及生长方式,收集贴壁细胞及第二代悬浮细胞,对其表面分子CD24及CD44进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察细胞表面标志物的表达,同时采用流式细胞术检测不同亚群的细胞数量。结果悬浮细胞以大小不等的微球方式进行生长,并在第二代悬浮培养中维持此生物学特性;贴壁细胞呈单层贴壁簇状生长。与贴壁细胞相比,CD44分子在悬浮细胞中表达含量增高,CD24分子表达含量减少。CD44+/CD24-/low表型细胞在悬浮细胞和贴壁细胞中所占比例分别为(87.0±0.43)%和(40.1±1.05)%(P<0.05);CD44+/CD24+表型所占比例分别为(11.7±0.39)%和(57.2±0.75)%(P<0.05)。结论悬浮培养法可使乳腺癌MCF-7细胞株贴壁细胞去分化,可富集CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞。

以大肠杆菌β—葡萄糖醛酸酶培育牛黄实验研究

牛黄,即牛的胆结石。根据胆结石的成因,我们利用大肠杆菌产生的β-葡萄糖醛酸酶,在牛体外培育牛黄获得成功。

人附睾组织形态定量测定

目的 为研究正常青年男性附睾的组织形态特征。方法 对１５ 名有生育能力意外死亡的青年男性捐献者的１５ 枚新鲜右侧附睾做石腊切片、ＨＥ 染色，利用体视学原理，通过显微镜测量的方法，在附睾５ 个不同区段进行了组织形态定量测定。结果 得出了附睾管道系统的管腔直径、上皮高度、纤毛长度，以及上皮、管腔和管间的间质组织的体密度（ＶＤ） 等参数。结论 人附睾组织形态定量测定结果。

血栓闭塞性脉管炎患者T细胞亚群的改变

应用间接SPA花环法检测了57例血栓闭塞性脉管炎患者的外周血T细胞亚群,并以50例正常人作为对照。结果表明:血栓闭塞性脉管炎患者在活动期和稳定期CD_3、CD_4和CD_8细胞的百分率均明显低于正常对照组,其中以活动期CD_8百分率下降最明显,CD_4/CD_8比值明显升高,稳定期CD_4/CD_8比值与正常组无统计学意义。

灵菌素激发小鼠免疫功能研究

作者报告以灵菌素免疫小鼠观察其对小鼠免疫功能的影响,其主要结果:①对小鼠T淋巴细胞有直接激活作用;②对小鼠B淋巴细胞产生分泌IgG能力有增强作用;③对小鼠巨噬细胞吞噬功能有明显抑制作用;④对小鼠外周血白细胞数量无明显影响。

血栓闭塞性脉管炎患者中性粒细胞的化学发光测定

应用化学发光法检测了70例血栓闭塞性脉管炎患者中性粒细胞的吞噬功能,并与正常对照组比较。结果表明:活动期患者中性粒细胞的化学发光明显升高,与正常人比较有显著性差异(P<0.01),提示患者体内的白细胞被高度的预激活,白细胞的吞噬能力或氧化代谢活性显著增强。

虫草酒的致突变性研究

本试验对虫草酒的致突变性进行了研究。试验结果表明:虫草酒的剂量在3.75ml/kg、1.88ml/kg时,微核试验阴性,精子畸变试验阴性。浓度为10μl/皿、100μl/皿、500μl/皿时,Ames试验阴性。

TAO患者红细胞免疫功能的研究

报道76例血栓闭塞性脉管炎患者红细胞免疫功能的研究结果,并以55例健康献血员作为正常对照。结果显示,76例活动期患者的RBC—C_3bRR明显低于正常对照(P<0.01),RBC—ICRR明显高于正常值(P<0.01)。稳定期患者的RBC—C_3bRR和RBC—ICRR与正常对照相比无明显差别(P>0.05)。揭示RBC免疫功能可作为判断TAO病情活动和缓解以及药物疗效参考指标之一。

慢性宫颈炎活检组织中人巨细胞病毒(HCMV)DNA和C—MYC癌基因的检测及相关性研究

宫颈癌是妇科常见的恶性肿癌之一,而慢性宫颈炎是宫颈癌的高危因素。研究表明,人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)感染与宫颈癌的发生有关。并已从宫颈癌组织中鉴定出了C-myc癌基因。为了探讨HCMV感染与C-myc癌基因表达的关系,本文应用核酸杂交技术对87例慢性宫颈炎患者的宫颈活检组织进行了HCMVDNA序列和C-myc癌基因序列的检测。结果87例慢性宫颈炎患者宫颈活检组织中HCMV检出率为11％(10/87),C-myc癌基因的检出率为12％(11/87)。HCMV DNA序列阳性标本中同时C-myc癌基因阳性者有5例(5/10),77例HCMV DNA序列阳性患者中,有6例(6/77),C-myc癌基因阳性。结果提示,HCMV感染对C-myc癌基因表达可能起活化作用。

微核试验检测灭滴灵致突变性

灭滴灵(flaggl)为咪唑衍生物,其化学结构式是该药原为灭滴虫药,后发现对阿米巴有病良好疗效。近年来,人们应用灭滴灵治疗厌氧菌感染取得较好效果。但灭滴灵是否有致突变作用,尚未见报道,为此,我们以微核试验进行了对该药致突变性的研究。一材料和方法:1.检测样品:灭滴灵(由本院保健科提供)2.阳性对照:环磷酰胺(60mg/kg)

循环免疫复合物的检测

采用聚乙二醇(PEG)沉淀法测定了50例正常人,40例肾小球肾炎患者,30例风湿病患者的循环免疫复合物(CIC),结果表明:患者的PEG沉淀指数高于正常人,二者之间有显著性差异(P<0.01)。

原噬菌体诱导法检测灵菌素潜在致癌毒性

本文报道用原噬菌体诱导法检测灵菌素的潜在遗传毒性结果,表明:在不加S_0的情况下,灵菌素为阴性反应。

食用色素的潜在遗传毒性

本文报道了用原噬菌体诱导试验检测食用色素的遗传毒性,结果表明,在不加S_8的情况下,桔红为阳性反应,桔黄为弱阳性反应。

盐霉素通过TGFβ1/Smad信号通路抑制MMP-2、9降低CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力

目的分析盐霉素对CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其影响机制。方法通过有血清和无血清培养技术培养人乳腺癌MCF-7细胞株,收集两种细胞,对其CD24、CD44标志物进行荧光染色,采用流式细胞仪检测CD44^+ /CD24^(-/low)亚群细胞的比例;盐霉素培养MCF-7细胞株和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,MTT法筛选出引起CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞细胞凋亡低于IC50的浓度;Transwell技术检测MCF-7和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞的迁移和侵袭能力,以筛选出的浓度诱导CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,以排除盐霉素对该细胞增殖抑制作用的影响,Transwell技术检测该细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、pSmad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平的变化。结果 CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞在无血清培养和有血清培养中的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.01),CD44^+ /CD24^+ 表型细胞的比例分别是(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)%(P<0.01);MTT法筛选出低于IC50的浓度是1、3、5、7μmol/L;Transwell技术检测CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力明显高于MCF-7细胞株,并随盐霉素浓度的上升呈下降趋势(P<0.05)。Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平下调(P<0.01)。结论盐霉素可能通过TGFβ1/Smad信号通路下调MMP-2、MMP-9蛋白水平,从而降低CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力。

红细胞免疫粘附在传染病发病机理中的作用

1981年siegel首先提出“红细胞免疫系统”的新概念,认为红细胞具有和巨噬细胞相似的免疫功能,为免疫学开拓了新的视野和领域,引起了学术界的极大关往。近年来,国内外大量的研究证实,红细胞不仅司主呼吸功能,而且具有免疫粘附及免疫调节功能。同时观察到许多传染病病人的红细胞免疫功能出现异常,这对于阐明某些疾病的发病机理提供了重要依据。一。

胰岛移植研究进展

当前器官与组织移植在医学上已占有不可取代的特殊地位,使许多过去被认为是不治之症的康复成为可能。长期依赖胰岛素治疗的糖尿病患者,常因代谢紊乱而导致小血管病变造成眼、肾、脑及心血管并发症。因此许多学者寄希望于胰腺或胰岛细胞的移植。早在发现胰岛素之前就曾有人设想移植胰岛素分泌组织来治疗糖尿病。但直到60年代胰岛移植才成为现实。近年来胰岛移植进展较快。本文将就胰岛移植研究中的某些问题作一概要综述。

病毒性心肌炎发病机理研究进展

病毒性心肌炎是由病毒感染引起的心肌炎细胞浸润及心肌细胞坏死。其发病机理至今不甚明了。

胃癌蛋白质组学的研究进展

近年来，随着蛋白质组学技术和理论的进一步成熟和完善，其在生命科学和医学研究的应用越来越广泛。从血液、胃液、组织、细胞乃至细胞器等水平上研究胃癌差异蛋白的表达能更加全面的解释生命活动的规律并为进一步的研究提供依据。对胃癌发生、发展、转移的相关蛋白质进行检测有利于深入了解胃癌的发病机制，寻找新的肿瘤特异性标记物，并对胃癌的早期诊断及靶向治疗起着非常重要的意义。

无血清培养有效富集乳腺癌干细胞

目的探讨无血清培养技术从人乳腺癌MCF-7细胞株中有效富集乳腺癌干细胞的影响。方法采用无血清和有血清两种培养技术分别培养人乳腺癌MCF-7细胞株,观察并收集两种细胞,对CD24、CD44标志物进行免疫荧光染色;使用倒置荧光显微镜检测该标志物的表达差异;应用流式细胞仪检测不同亚群细胞的比例,并检测两种细胞周期的差异。结果无血清培养的细胞以大小不等的微球体形式在培养液中悬浮生长,有血清培养的细胞以类似多边形的形式在培养液中单层贴壁生长。CD44在悬浮微球体细胞和贴壁细胞中的表达无明显差异,CD24在悬浮微球体细胞中的表达明显减少;悬浮微球体细胞和贴壁细胞中CD44^+/ CD24^(-/low)表型细胞的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.05),CD44^+/CD24^+表型细胞的比例分别为(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)%(P<0.05)。分裂期(S)细胞在悬浮微球体细胞和贴壁细胞中的比例分别为(18.85±2.26)%和(43.91±1.81)%(P<0.05);静止期(G1)细胞的比例分别为(64.92±2.07)%和(39.82±1.77)%(P<0.05)。结论无血清培养技术可以有效富集CD44^+/ CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞。