大鼠尾核内一氧化氮在痛觉调制中作用机制的研究

目的:研究尾核中一氧化氮(NO)在痛觉调制中的作用及其作用机制。方法:以钾离子透入引起大鼠甩尾的电流强度(mA)作为痛反应指标,尾核内微量注射L精氨酸(L Arg)、NG硝基L精氨酸甲酯(L NAME)、亚甲基蓝(MB)等,观察0～30min内大鼠痛阈的变化。放射免疫方法测定血液和脑组织中cGMP含量的变化,以免疫组织化学结合计算机图像分析的方法观察给药后6～72h内nNOS表达的变化。结果:大鼠尾核内微量注射NO前体L Arg引起明显的痛敏效应,血和脑中cGMP的含量明显升高,nNOS阳性神经元L Arg组较正常表达增强;微量注射L NAME和MB后大鼠痛阈显著升高,MB组大鼠血和脑中cGMP含量显著降低,L NAME,MB组nNOS阳性神经元表达较正常减弱。结论:尾核内NO参与痛觉信息的传递,其作用机制可能是通过NO cGMP途径实现的。

电针对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

目的：探讨针刺对脑缺血再灌注大鼠神经元保护作用的机制。方法：雄性SD大鼠36只，随机分为假手术组（Sham）、脑缺血再灌注组（CI／R）及脑缺血再灌注＋电针组（CI／R＋EA），每组12只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血（MCAO）再灌注模型。于再灌流开始后，CI／R＋EA组电针“水沟”“百会”穴，电针参数：频率2～15Hz，间断疏密波，电流强度1mA，以局部肌肉轻微震颤为度，时间30min。以罗丹明123和AnnexinV—FITC进行荧光染色，通过流式细胞仪检测细胞内荧光强度，分析脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡发生率的变化。结果：CI／R组大鼠大脑皮层细胞线粒体膜电位明显低于假手术组（P〈0．01），细胞凋亡率显著升高（P〈0．01）；电针治疗后，线粒体膜电位升高，细胞凋亡率受到抑制，与CI／R组比较差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：针刺治疗可明显减轻大鼠脑缺血再灌注损伤，上调神经细胞线粒体膜电位水平可能是针刺抑制大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一。

中缝大核内催产素在电针镇痛中的作用

目的 :探讨中缝大核 (NRM )内催产素 (OT)在电针镇痛中的作用 ,及其和内源性 5 HT在电针镇痛中的关系。方法 :以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度为痛行为反应指标 ,测定动物痛阈 ,观察NRM内注射催产素和噻庚啶对电针镇痛的影响。结果 :向大鼠NRM内微量注入催产素后 ,能明显增加电针镇痛的效应 ;而向NRM内注入噻庚啶后 ,可阻断催产素增加电针镇痛的效应。结论 :NRM内的催产素在电针镇痛的复杂过程中发挥着一定作用 ,且其效应可能是通过内源性 5 HT系统中介的。

中缝大核内微量注射抗催产素血清对电针镇痛的影响

目的 观察中缝大核 (NRM )内催产素 (OT)对电针镇痛的影响。方法 以钾离子透入法引起大鼠甩尾反应的电流强度 (mA)为痛行为反应指标 ,测定动物痛阈 ,观察NRM内催产素对电针镇痛的影响。结果 NRM内微量注入抗催产素血清后 ,大鼠电针镇痛的效应明显减弱 ;与注射正常兔血清相比 ,有显著性差异。结论 NRM内的催产素在电针镇痛的复杂过程中发挥着一定作用。

大鼠尾核内微量注射L-精氨酸对一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨大鼠尾核内L-精氨酸(L-Arg)、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、亚甲基蓝(MB)等对一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法动物随机分为L-Arg组、L-NAME组、MB组和生理盐水(NS)组,用免疫组织化学结合计算机图像分析的方法观察给药后6、12、24、48和72 h尾核内nNOS表达的变化。结果尾核内nNOS神经元散在表达,阳性部位主要在胞浆,神经纤维也有表达。L-Arg组nNOS神经元较正常表达增强(P<0.05),且随着时间的延长而增强,48 h达最高点。MB和L-NAME组nNOS神经元表达较正常减弱(P<0.05),随时间延长继续减弱,48 h达最低点。结论尾核内L-Arg通过NOS生成NO而发挥痛敏作用,L-NAME和MB通过抑制NOS的功能而减少NO的生成产生镇痛作用,NOS是体内合成NO的关键酶。

L-精氨酸对大鼠尾核一氧化氮合酶基因表达的影响

目的研究尾核中一氧化氮在痛觉调制中的作用机制。方法大鼠尾核内微量注射L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、生理盐水,应用逆转录-聚合酶链反应测定4,8,12,24和48 h大鼠尾核nNOS mRNA表达的变化;新生Wistar大鼠尾核神经元原代培养液中加入L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、生理盐水,观察给药12 h尾核nNOS mRNA表达的变化。结果大鼠尾核给药24 h内L-精氨酸组nNOS mRNA表达较正常增强(P<0.05),而Nω-硝基-L-精氨酸甲酯组nNOS mRNA表达较正常减弱(P<0.05),48 h恢复正常。体外尾核原代神经元培养,nNOS mRNA表达的变化趋势和在体实验相一致。结论中枢神经系统尤其是尾核中NOS活性是一氧化氮作为神经递质或调质参与中枢痛觉调制的关键因素之一。

尾核内一氧化氮对大鼠痛行为的影响

目的观察大鼠尾核内一氧化氮、一氧化氮合酶抑制剂和鸟苷酸环化酶抑制剂对动物痛阈(痛行为)的影响。方法以钾离子透入引起大鼠甩尾的电流强度(mA)作为痛反应指标,尾核内微量注射L-精氨酸、Nω-硝基-L-精氨酸甲酯、亚甲基蓝等,观察0～30min内大鼠痛阈的变化。结果大鼠尾核内微量注射一氧化氮的前体Nω-硝基-L-精氨酸甲酯引起明显的痛敏效应,20min内与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。微量注射Nω-硝基-L-精氨酸甲酯和亚甲基蓝后大鼠痛阈显著升高,25min内与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论提示中枢神经系统内一氧化氮具有明显的痛敏效应,而降低中枢神经系统一氧化氮水平表现显著的镇痛作用。其作用机理可能和NO-cGMP代谢途径有关。

尾核内注射L-精氨酸对大鼠血浆和脑组织中cGMP含量的影响

目的观察一氧化氮(NO)对大鼠血浆和脑组织中cGMP的含量的影响。方法尾核内微量注射一氧化氮(NO)的前体L-精氨酸(L-Arg)和鸟苷酸环化酶(GC)抑制剂亚甲基蓝(MB),以放射免疫方法测定注药后5、10、15、20、30min血浆和脑组织中cGMP含量的变化。结果大鼠尾核内微量注射L-Arg,血浆和脑组织中cGMP的含量明显升高,微量注射MB后大鼠血浆和脑组织中cGMP含量显著降低,20min内与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论提示中枢神经系统内NO可提高血浆和脑组织中cGMP的含量。