成人幕上中枢神经系统原始神经外胚层肿瘤9例

目的：探讨成人幕上中枢神经系统原始神经外胚层肿瘤（SCNS—PNET）的临床特点、诊断标准、治疗方法及预后。方法：回顾性分析本院自1998年5月至2010年7月期间9例经手术和病理证实的成人SCNS—PNET患者的临床资料，并进行了随访，对成人SCNS—PNET的诊断和治疗进行分析总结，并用Kaplan．Meier法计算生存率。结果：所有患者均获得6～30个月随访。术后未放化疗（1例）、单独放疗（3例）、放疗加化疗（5例）患者平均生存时间分别为5．0、13．3和17．2个月，后者2年生存率为20％。辅助化疗不能更有效延长患者生存率（X。=0．89，P：0．35）。结论：成人SCNS—PNET为罕见肿瘤，影像学表现具有一定诊断意义，明确诊断需依赖特征性的细胞遗传学改变及免疫组织化学检测。治疗应以手术切除为主．辅以放疗。

替莫唑胺耐药人脑胶质瘤细胞系U251/TR建立及耐药机制

目的建立替莫唑胺耐药人脑胶质瘤细胞系,探讨其耐药机制,以期为临床优化药物化疗方案提供参考。方法通过体外分步诱导方法使人U251胶质瘤细胞对替莫唑胺产生耐药,噻唑蓝比色法检测耐药指数及细胞存活率;采用Western-Blot、逆转录-聚合酶链免疫(RT-PCR)、免疫荧光、免疫组化法检测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达变化,分析细胞耐药机制。结果历经8个月成功建立了对替莫唑胺耐药的胶质瘤细胞U251/TR,在替莫唑胺初始浓度为0.25μg·mL-1,终浓度为16.00μg·mL-1培养液中,U251/TR细胞半数抑制浓度(IC50)为未经诱导的U251胶质瘤细胞的7倍(P=0.00),其耐药指数约为7.00;U251/TR细胞MGMT表达水平较未经诱导的U251胶质瘤细胞明显增加(P=0.00)。结论通过分步诱导方法于体外成功建立1株对替莫唑胺耐药的U251/TR细胞系。MGMT表达水平升高是导致U251/TR细胞对替莫唑胺耐药的主要机制。

后颅窝术后颅内感染多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分析及护理体会

目的介绍后颅窝手术后并发颅内感染多重耐药鲍曼不动杆菌感染特点及相关治疗及护理体会,为后期治疗、护理提供临床经验。方法回顾性分析2012-01—2014-07我院4例后颅窝术后并发的颅内感染多重耐药鲍曼不动杆菌患者临床资料、治疗及护理经验。结果后颅窝术后颅内感染多重耐药鲍曼不动杆菌4例患者经过综合治疗护理后全部痊愈,治愈率100%。结论后颅窝术后容易并发颅内感染,预防、护理是关键。一旦发生颅内感染多重耐药鲍曼不动杆菌,应早期采取腰大池持续外引流基础上,脑脊液细菌分离培养进行菌株鉴定和药敏试验,静滴、鞘内注射敏感抗生素,并给予激素、营养支持等治疗措施,同时强调医务人员手卫生、感染患者隔离、加强微生物检测、彻底环境消毒、采取相应护理措施,加强医院感染管理力度等能提高治愈率。

颅内压监测与阶梯式治疗方案治疗颅脑损伤

目的探讨无创颅内压监测与阶梯式治疗方案在颅脑损伤治疗中的价值。方法前瞻性分析2013年10月至2014年8月我院收治72例颅脑损伤患者,随机分为对照组与监测组,每组各36例。对照组应用传统的观察及治疗方法;监测组根据GCS评分分别进行有创(GCS≤8)、无创(GCS>8)颅内压监测,根据颅内压、患者生命体征、GCS变化指导采取个体化阶梯式治疗方案控制颅内压并观察各组患者甘露醇用量、开颅手术治疗例数、ICU住院天数、6月后GOS评分评价疗效。结果监测组甘露醇用量、开颅手术例数较对照组明显减少(P<0.01)。重症TBI患者平均ICU住院天数监测组较对照组明显缩短。GOS评分监测组明显优于对照组(P<0.01)。结论对颅脑外伤患者无论在有创、无创ICP监测指导下调整阶梯式个性化治疗措施,均能减少甘露醇用量,缩短ICU住院天数,提高患者预后,应该在临床大力推广。

LY294002联合Ad-PTEN对肺腺癌脑转移裸鼠移植瘤的治疗作用

目的观察PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮(LY294002)联合Ad-PTEN(含PTEN基因的重组腺病毒)对人肺腺癌脑转移裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用,初步探讨其可能的作用机制,为临床有效治疗肺癌脑转移提供实验资料。方法将实验裸鼠24只随机分为4组,即DMSO对照组、空载病毒组、LY294002治疗组及LY294002与Ad-PTEN联合治疗组。肿瘤组织块直接皮下种植法建立肺腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,定期测量动物体重及肿瘤直径;应用Western blotting法检测肿瘤细胞的PTEN、p-Akt、PI3K、CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3、MMP-2、9、p-FAK的表达水平;结果 LY294002与Ad-PTEN联合治疗组对人肺腺癌脑转移裸鼠移植瘤抑制作用较对照组及LY294002治疗组均明显增强(均P<0.01);与对照组及LY294002治疗组比较联合治疗组Caspase-3、PTEN表达显著升高(均P<0.05),PI3K、p-Akt、CyclinD1、MMP2、9、p-FAK、Bcl-2的表达均显著下降(均P<0.05)。结论 LY294002与Ad-PTEN联合治疗可以显著提高对人肺腺癌脑转移裸鼠移植瘤的抑制作用。其机制可能与下调PI3K/AKT信号通路下游蛋白有关。

siRNA干扰技术联合高压氧对大鼠脑出血后脑水肿及凋亡的影响

目的观察靶向水通道蛋白4（AQP4）的小RNA（siRNA）干扰技术联合高压氧对实验大鼠脑出血后脑水肿及凋亡的影响。方法将大鼠随机分为对照组、高压氧组、AQP-4 siRNA组及联合治疗组，每组24只；凝血酶Ⅶ注射诱发尾状核建立脑出血模型，构建沉默AQP-4 mRNA表达的siRNA质粒；提取第3天脑组织总RNA和总蛋白，用RT—PCR法检测AQP-4的mRNA表达水平；于湿比重法和Evans蓝法测定脑组织含水量及血脑屏障通透性改变；AnnexinV及TUNEL法检测脑细胞凋亡率，Western blot法检测AQP-4、基质金属蛋白2、9（MMP-2、MMP-9），B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2），半胱天冬酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平；第3天给予实验动物神经功能缺陷评分（mNSS）。结果AQP-4 siRNA减轻脑出血后脑水肿及沉默AQP-4方面优于高压氧（P〈0．05），二者联合应用在脑出血后降低脑水肿程度方面获最佳效果（P〈0．05）；与对照组比较各组均抑制神经细胞凋亡，以联合组（4．24±0．04）％最明显（F=13．76，P=0．001）；高压氧联合AQP-4 siRNA能降低AQP-4，MMP2、MMP-9，Caspase-3表达（P〈0．05），而增加Bcl-2表达（P〈0．01）。神经功能缺陷评分较对照组均有改善（P〈0．05），以联合组（4．7±1．1）分最理想（F=7．21，P=0．013）。结论靶向siRNA干扰技术联合高压氧可有效减轻脑出血后脑水肿并抑制神经细胞凋亡，促进神经功能恢复，其机制可能与减少AQP-4，MMP-2、MMP-9，caspase-3表达，增加Bcl-2表达有关。

2-（4-吗啉基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮改变替莫唑胺耐药细胞系耐药特性的体外研究

目的 观察应用2-（4-吗啉基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮（LY294002）对替莫唑胺耐药胶质瘤细胞株U251/TR细胞增殖、侵袭及耐药性影响,并探讨其机制.方法 应用LY294002作用于细胞株U251/TR细胞,通过噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率,Transwell法检测细胞侵袭,流式细胞仪检测细胞周期,膜联蛋白V（Annexin V）法及原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡.Western blot法检测磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、核因子-κB（NF-κB）、B淋巴细胞瘤/白血病-2（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）、细胞周期素D1（Cyclin D1）等磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（PI3 K/Akt）信号通路相关蛋白及O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）蛋白的表达.结果 LY294002组与空白对照组和二甲基亚砜（DMSO）组相比自培养第2天起细胞生存率明显下降（P＜0.05）.LY294002组Transwell穿过细胞数[（43.60±1.54）个]较空白对照组[（81.90±1.64）个]、DMSO组[（82.10±1.07）个]明显减少（P＜0.05）.LY294002组细胞周期被明显阻滞在G0/G1期（67.44％）,S期（30.56％）明显减少（P＜0.05）,细胞凋亡率明显增加（36.05±1.99）％ （P ＜0.05）.Western blot结果显示LY294002组能有效抑制p-Akt、MMP-2、MGMT、NF-κB、bcl-2及Cyclin D1蛋白的表达,而上调Caspase-3表达（P＜0.05）.结论 靶向PI3K/Akt信号通路的LY294002显著抑制了U251/TR细胞的增殖、侵袭,并促进细胞的凋亡,其机制可能与LY294002下调了PI3K/Akt信号通路中相关蛋白及MGMT蛋白的表达有关。

高压氧联合针灸预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护效应

目的研究高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）联合针灸预处理对急性心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的保护效应。方法将36只SD大鼠按数字表法随机分为3组：假手术组、模型组、HBO联合针灸组（联合组），每组各12只。联合组针刺大鼠双侧内关穴后维持留针状态，放入氧舱内，再于0．2MPa下暴露1h，每天2次，连续暴露5d后，建立心肌缺血再灌注模型。模型组和联合组均采用结扎大鼠冠状动脉左前降支40min，再灌注2h的方法，建立心肌缺血再灌注模型；假手术组仅行开胸手术而不造模。再灌注结束后检测3组大鼠左心室收缩压（left ventricularsy stolic pressure，LVSP）、左心室舒张压（left ventricular diastolic pressure，LVDP）、左心室内压最大上升和下降速率[±（dP／dt）max]等心功能指标；HE染色观察心肌损伤程度；TUNEL法检测心肌缺血区心肌细胞凋亡率。结果模型组大鼠心功能指标LVSP为（112．64±8．49）mmHg、LVDP为（6．75±1．34）mmHg、＋（dP／dt）max为（2970．15±137．91）mmHg／s、-（dWdt）max为（2936．86±179．50）mmHg／s，而联合组上述指标分别为（123．33±7．86）mmHg、（6．13±1．56）mmHg、（3046．56±137．91）mmHg／s、（3022．30±283．73）mmHg／s；模型组大鼠心肌细胞平均凋亡率为（94．58±34．01）％，而联合组为（42．17±27．61）％。2组上述指标比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。与模型组相比，联合组心肌缺血再灌注损伤显著减轻，心肌组织病理性损伤减轻，心功能改善，心肌细胞凋亡率减轻。结论高压氧联合针刺内关穴后静留针预处理对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠有显著的保护效应。