头蛋白基因及其研究意义

作为胚胎发育时期的重要蛋白,头蛋白(noggin)对爪蟾(xenopus)和哺乳动物的中枢神经系统有诱导分化的作用。Noggin对神经组织的诱导作用与其拮抗物——骨形成蛋白有关。Noggin基因对生后及成年哺乳动物的中枢神经系统可能亦有重要作用。科学家们通过noggin基因的神经诱导作用已经成功分化出了神经元,特定种系定向分化以及功能问题尚待研究。Noggin基因为研究神经系统疾病的基因治疗开辟了新思路。

蛋白激酶C抑制剂灯盏花素对低氧预适应小鼠皮层NO/cGMP信号转导系统的影响

目的探讨NO/cGMP信号转导系统在低氧预适应中的作用及其与蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)的关系。方法将Blb/c近交系小鼠随机分为空白对照组(H0组)、低氧对照组(H1组)、低氧预适应组(H4组)、灯盏花素组(EB)和药物对照组(C)。观察:①H1,H4,EB和C组小鼠低氧耐受时间;②用分光光度计法测定各组小鼠皮层NOS活性、NO产量,放射免疫法测定cGMP含量。结果①H4,EB和C组小鼠低氧耐受时间显著多于H1组,且EB组明显多于H4组,(P<0.01);H4和C组没有显著差异。②H1,H4,EB和C组NOS活性、NO、cGMP含量均高于H0组,H4,EB和C组明显低于H1组,且EB组显著低于H4组,(P<0.01);H4和C组差异无显著性。结论NO/cGMP信号转导系统在低氧预适应中起重要作用,并且PKC能促进NO/cGMP信号转导系统的激活,PKC抑制剂灯盏花素可能通过抑制NO/cGMP信号转导系统参与低氧预适应的产生。

低氧预适应大鼠脑脊液减轻氧糖剥夺对培养新生鼠海马神经元的损伤及可能的机制

本文旨在观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)Wistar大鼠脑脊液对新生鼠海马神经元氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)损伤的影响及机制。原代培养大鼠新生鼠(出生12h)海马神经元,随机分为正常对照组、OGD组(OGD培养1.5h)、正常脑脊液组(正常大鼠脑脊液培养1d+OGD培养1.5h)和HPC脑脊液组(HPC大鼠脑脊液培养1d+OGD培养1.5h),各组n=6。用含1mmol/L Na2S2O4的无糖Earle's液培养大鼠新生鼠海马神经元1.5h建立OGD模型。应用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测各组神经元凋亡情况,用免疫荧光染色法检测各组神经元Bcl-2/Bax表达水平。结果显示,正常对照组偶见凋亡早期细胞,OGD组见大量中晚期凋亡细胞;与OGD组和正常脑脊液组相比,HPC脑脊液组细胞凋亡显著减少(P<0.01),细胞生存率提高(P<0.01)。OGD组和正常脑脊液组细胞Bcl-2蛋白荧光强度分别为0.040±0.003,0.457±0.044,而HPC脑脊液组细胞Bcl-2表达荧光强度增至1.923±0.078(P<0.01),且阳性细胞数量亦明显增加(P<0.01);Bax表达则呈相反趋势,相对OGD组(1.548±0.068)和正常脑脊液组(1.072±0.219),HPC脑脊液组荧光强度(0.411±0.039)明显降低(P<0.01),且阳性细胞数量亦明显减少(P<0.01)。以上结果提示,HPC脑脊液能减轻OGD损伤诱导的神经元凋亡,该神经保护效应与上调Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax有关。

白花丹参带药血浆预处理对氧糖剥夺损伤的神经元的保护效应:抑制细胞凋亡

本文旨在观察白花丹参带药血浆预处理对乳鼠海马神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deficiency,OGD)损伤的影响及机制。培养乳鼠(出生12h)海马神经元,分为正常血浆组、低、中、高浓度白花丹参血浆组及空白对照组,前4组细胞经生理盐水或白花丹参灌胃的大鼠血浆(2.5%,5%and10%)预处理后,用含1mmol/L Na2S2O4的无糖Earle's液培养大鼠新生鼠海马神经元1.5h建立OGD模型,空白对照组正常血浆培养,不复制OGD模型。应用免疫荧光、激光共聚焦显微镜等检测神经元生存率、凋亡、Bcl-2/Bax表达水平。MTT及Annexin V/PI检测显示:空白对照组细胞凋亡少见,与正常血浆组、低浓度白花丹参血浆组相比,中、高浓度白花丹参血浆组细胞生存率提高(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),其中高浓度白花丹参血浆组细胞生存率提高、凋亡减少更明显。中、高浓度白花丹参血浆组Bcl-2表达显著高于正常血浆组、低浓度白花丹参血浆组和空白对照组,而Bax表达则相反,且中、高浓度白花丹参血浆两组间Bcl-2、Bax表达无显著差别;各组Bcl-2、Bax阳性细胞数量呈一致性变化趋势;高浓度白花丹参血浆组Bcl-2/Bax阳性细胞数比值高于其余各组(P<0.05或0.01)。以上结果提示,白花丹参带药血浆预处理能提高OGD损伤后神经元生存率,该效应与上调Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值,抑制细胞凋亡有关。