基因检测确诊肯尼迪病一例并文献复习

肯尼迪病(Kennedy’s disease, KD)是一种罕见的X连锁隐性遗传性下运动神经元疾病,以进行性双下肢无力为主要特征,可伴有雄激素不敏感症状和内分泌受累症状。本文报道1例KD病例,该患者进行性双下肢无力,肌肉萎缩、跳动,伴舌肌萎缩,肌酶增高,肌电图显示感觉、运动神经均受累。经基因检测检出患者雄激素受体基因(androgen receptor, AR)中CAG重复数为47,为致病型。现将该患者的诊疗经过、家属基因分析进行总结。

Tyrobp基因参与抽动障碍模型小鼠神经炎性反应及相关机制

目的探讨Tyrobp基因参与抽动障碍模型小鼠神经炎性反应及相关作用机制。方法6周龄C57BL/6J和Tyrobp^(-/-)雄性小鼠各20只,按照随机数字表法分为4组:野生型对照组(WT+NS组)、Tyrobp基因敲除对照组(Tyrobp^(-/-)+NS组)、野生型模型组(WT+IDPN组)和Tyrobp基因敲除模型组(Tyrobp^(-/-)+IDPN组)。WT+IDPN组和Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠连续7 d按150 mg/(kg·d)的剂量腹腔注射亚氨基二丙腈(3,3-iminodipropionitrile,IDPN)以建立抽动障碍小鼠模型,WT+NS组和Tyrobp^(-/-)+NS组小鼠腹腔注射等量生理盐水。造模结束后,对小鼠的刻板行为进行评估。采用Western blot检测大脑纹状体组织的酪氨酸激酶结合蛋白(tyrosine kinase binding protein,Tyrobp)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、磷酸化的核转录因子-κB(phospho-nuclear factor kappa B,p-NF-κB)p65、磷酸化的核因子-κB抑制蛋白α(phospho-inhibitor of NF-κB alpha,p-IκBα)的蛋白表达情况。采用免疫荧光染色观察脑组织小胶质细胞激活情况。采用GraphPad Prism 8.0软件对所得数据进行统计分析,两组数据比较采用t检验;多个样本均数比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验。结果刻板行为评估显示,四组小鼠的运动刻板行为和分类刻板行为评分均差异有统计学意义(F=270.9,379.7,均P<0.01)。WT+IDPN组小鼠的运动刻板行为和分类刻板行为评分均高于Tyrobp^(-/-)+IDPN组[运动刻板行为:(3.23±0.26)分,(2.13±0.21)分,t=9.02,P<0.05;分类刻板行为:(45.80±4.29)分,(26.60±3.48)分,t=12.00,P<0.05]。Western blot结果显示,各组小鼠纹状体TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、Myd88、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达水平差异有统计学意义(F=29.07,23.09,39.36,57.6,52.55,15.50,40.48,均P<0.05)。WT+IDPN组蛋白水平高于WT+NS组(t=8.31,7.37,8.13,11.43,10.47,6.05,9.96,均P<0.05),Tyrobp^(-/-)+IDPN组蛋白水平高于Tyrobp^(-/-)+NS组(t=3.60,3.00,5.84,4.81,3.59,2.26,4.68,均P<0.05),WT+IDPN组蛋白水平高于Tyrobp^(-/-)+IDPN组(t=3.97,3.93,4.14,6.40,7.63,3.45,3.03,均P<0.05)。免疫荧光显示,WT+IDPN组和Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠纹状体区小胶质细胞胞体增大,小胶质细胞呈激活状态,WT+IDPN组较Tyrobp^(-/-)+IDPN组小鼠小胶质细胞激活形态更明显。结论Tyrobp可能通过TLR4/Myd88/NF-κB信号通路参与神经炎性反应介导的抽动秽语综合征的发病机制。

酪氨酸激酶结合蛋白调节磷酯酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶信号通路参与神经炎性反应和自噬的影响

目的探究酪氨酸激酶结合蛋白(TYROBP)通过磷酯酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路神经炎症及自噬过程的影响。方法 15月龄的C57BL/6J、TYROBP-/-、淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)转基因雄性小鼠各10只, 分为3组。八臂迷宫实验和新物体识别实验检测动物的学习记忆能力;免疫荧光检测小胶质细胞、NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3、裂解的半胱氨酸蛋白酶1(cleaved Caspase-1)、选择性自噬接头蛋白1(SQSTM1)、微管相关蛋白轻链3B Ⅱ(LC3B Ⅱ)、TYROBP、p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT蛋白的表达水平。结果与同月龄C57BL/6J小鼠相比, APP/PS1小鼠学习记忆能力显著降低(均P<0.05);脑组织NLRP3炎症小体活化增加(P<0.05), 小胶质细胞呈激活状态, 炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均增加(均P<0.05);自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、SQSTM1表达增加(均P<0.05);TYROBP、p-PI3K、p-AKT表达增加(均P<0.05)。与同月龄C57BL/6J小鼠相比, TYROBP-/-小鼠炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白表达下降(均P<0.05), LC3B Ⅱ、SQSTM1、p-PI3K、p-AKT表达减少(均P<0.05)。结论 TYROBP可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进炎症反应、抑制自噬过程, 参与AD的发生发展。