肺癌A549细胞摄取^(99)Tc^m-DTPA-DG的实验研究

将3.7 kBq99Tcm-DTPA-DG加入培养肺癌A549细胞中后,观察不同时间细胞的摄取率;另观察DT-PA-DG对大鼠血糖的影响。结果显示,肺癌A549细胞2 h摄取99Tcm-DTPA-DG达高峰,30 min到2 h间肺癌A549细胞摄取99Tcm-DTPA-DG明显高于99Tcm-DTPA(P<0.01);静脉注射DTPA-DG后,大鼠血糖升高,同时注射胰岛素的大鼠,其血糖含量下降时间提前。因此99Tcm-DTPA-DG有望成为一种新型的肿瘤葡萄糖代谢显像剂。

乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达与紫杉醇耐药的实验研究

目的探讨转移能力不同的两种人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达差异,及其与紫杉醇药物敏感性差异的相关性。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测两种细胞中Twist基因的表达情况,MTT法检测两种细胞对紫杉醇的敏感性。结果 (1)RT-PCR结果显示:两种细胞中均有Twist基因表达,在MDA-MB-435S细胞中的表达高于MCF-7(P<0.05);(2)紫杉醇对MDA-MB-435S细胞的抑制作用弱于对MCF-7细胞的抑制作用(P<0.05)。结论 Twist基因在转移能力强的MDA-MB-435S细胞中表达高于转移能力中等的MCF-7细胞,同时高转移的MDA-MB-435S细胞对紫杉醇的敏感性弱于中等转移性的MCF-7细胞,且更易出现耐药。

更昔洛韦抗人巨细胞病毒感染所致粒-单祖细胞增殖抑制的实验研究

目的 :探讨更昔洛韦对人巨细胞病毒 (HCMV)感染的粒 -单祖细胞 (CFU -GM)体外增殖的影响。方法 :采用造血祖细胞体外培养技术 ,用更昔洛韦干预HCMV感染的CFU -GM ,观察计数CFU -GM的产率 ,大小 ,峰期及维持时间。结果 :①更昔洛韦组集落产率明显高于病毒组 (P <0 .0 1)。②更昔洛韦组大集落所占比例明显高于病毒组 (P <0 .0 1)。③更昔洛韦组集落维持时间较病毒组延长。结论 :在体外更昔洛韦有抗HCMV作用 ,能促进受HCMV感染的CFU

人参二醇组皂甙促进受损的培养肾小管细胞增殖的作用及机制研究

目的 :观察人参二醇组皂甙 (PDS)对正常培养和经急性缺血再灌注肾损伤家兔血清处理后的小管细胞增殖的影响 ,并探讨其机制。方法 :用夹闭法致家兔肾缺血 ,并提取缺血血清和对照血清 ,分别与人肾小管细胞共培养 ;四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定细胞株吸光度 (A)值以判定其增殖活性 ;苔盼蓝染色计算活细胞率。结果 :1 0 mg/ L的 PDS组 A值 (0 .6 2 76± 0 .0 392 )明显高于对照组 (0 .5 0 75± 0 .0 5 97) ,P<0 .0 5 ;缺血血清组 A值 (0 .1 989± 0 .0 31 3)与活细胞率 (4 6 .0 % )均明显低于其他组 (0 .6 5 94～ 0 .785 0 ,91 .5 %～ 98.9% ) ;PDS加缺血血清组的 A值 (0 .6 5 94± 0 .1 6 78)与对照组 (0 .735 0± 0 .0 81 2 )比较差异无统计学意义。结论 :适量的

NF-κB介导促红细胞生成素神经细胞保护作用的研究

目的:观察促红细胞生成素(EPO)对谷氨酸(Glu)诱导的大脑皮质神经元损伤的保护作用和核因子-κB(NF-κB)介导的细胞内信号转导机制。方法:采用1日龄Wistar大鼠皮层神经细胞体外原代培养技术,建立Glu兴奋性毒性神经细胞损伤模型。实验分为正常对照组、Glu组、EPO组和吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC,NF-κB活化阻断剂)组。倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;MTT法测定细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡率评价细胞损伤程度。结果:Glu处理后神经细胞形态明显受损,EPO组神经细胞形态趋于正常,PDTC组细胞形态与Glu组相似;与正常对照组相比,Glu组神经细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);而与Glu组相比,EPO组神经细胞存活率明显增高下降、凋亡率明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。与EPO组相比,PDTC组细胞存活率明显下降、凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01),这些变化与Glu组相似。结论:EPO对Glu诱导的大脑皮质神经元损伤的具有保护作用,其胞内信号转导机制涉及到NF-κB的活化。

丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响

目的观察丙泊酚联合地塞米松对早期脓毒症大鼠炎症因子的影响。方法采用大鼠尾静脉注射脂多糖复制脓毒症模型。按完全随机化原则分为5组:正常对照组(N)、脂多糖组(L)、脂多糖+地塞米松组(LD)、LPS+异丙酚组(LP组)、LPS+异丙酚+地塞米松组(LPD组)。各组大鼠于造模后麻醉处死,取腹主动脉血,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)。结果 L组TNF-α、IL-1β和IL-6较对照组明显升高,IL-10则明显降低(P均<0.05);LD组、LP组、LDP组同L组比较,其结果显示TNF-α、IL-1β和IL-6均明显降低,IL-10明显升高(P<0.05;P<0.05;P<0.05);LDP组同LP组、LD组比较,LDP组TNF-α、IL-1β和IL-6表达量明显下降,IL-10明显升高(P<0.05)。结论 LPS可迅速引起TNF-α、IL-1β和IL-6的释放,抑制IL-10的表达;地塞米松、丙泊酚干预后,TNF-α、IL-1β和IL-6的量明显减少,IL-10明显升高,且两药联用干预效果更明显,对早期脓毒症大鼠有明显保护作用。

人参二醇组皂甙对肾缺血再灌流性血清致伤的肾小管细胞膜稳定性的影响及机制研究

目的:用培养的人肾小管细胞,观察人参二醇组皂甙(PDS)对肾缺血再灌流性血清致伤的小管细胞膜稳定性的影响,并探讨其机制。方法:提取兔肾缺血再灌流后血清(SIR)及对照血清(SC),用不同的培养基(普通培养基、对照血清、缺血血清以及缺血血清加PDS)分别与肾小管细胞共培养96小时,生化法测定培养液或细胞中MDA含量以及SOD、LDH、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力。结果:SIR可使培养液中提示细胞膜脂质过氧化程度的MDA含量和表示膜完整性的细胞外LDH活力均显著升高,同时胞内的SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力明显降低,而PDS则可抑制SIR的这些效应的发挥。结论:PDS具有增强急性肾缺血再灌流性兔血清致伤的培养人肾小管细胞膜稳定性的作用。其机制可能为增强SOD活力、减轻氧自由基对细胞膜的攻击,增强细胞膜上ATP酶的活性以维持细胞内外水、电解质平衡等作用有关。

小鼠肝细胞胰岛素信号转导的动力学研究

目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素(100 nmol/L)持续刺激不同时间得到的胰岛素信号蛋白磷酸化水平发生的动力学变化。结果小鼠肝细胞胰岛素信号转导相关磷蛋白有数十种,其中磷蛋白Shc、MKP3等的时间动力学曲线均呈峰型。结论在细胞整体水平,胰岛素多条信号转导途径之间存在相互交流,这种相互交流对信号转导的最终效应产生了复杂的整合和调控,使细胞对持续高浓度的胰岛素刺激产生了自适应控制。

2型糖尿病地鼠肝组织蛋白质组学研究

目的探讨2型糖尿病发生、发展相关的蛋白质,及其胰岛素信号传递系统组成的差异。方法将糖尿病地鼠作为实验组,昆明种封闭群正常小白鼠作为对照组,在注射胰岛素0、5、30、60及120 m in五个不同时间点分别测定每只小鼠的对应时间的血糖值。采用蛋白质组学技术筛选差异蛋白。结果不同时点血糖值实验组显著高于对照组(P<0.01),且实验组血糖下降速度缓慢;胰岛素作用后,糖尿病小鼠肝组织蛋白质发生明显改变,主要表现为2-DE图谱中蛋白质斑点的增减以及颜色的深浅上,初步筛选出6个与胰岛素细胞信号转导相关的蛋白质,包括RAF1、BTF3、SEC1、PAR2、MK10及TRAF2。结论2型糖尿病地鼠存在胰岛素抵抗,与胰岛素细胞信号转导相关的差异蛋白可能是糖尿病病理生理机制的分子基础。

火焰原子吸收光谱法测荔枝果实中的微量元素

目的 :研究火焰原子吸收光谱测定荔枝果实中的多种微量元素的方法。方法 :测定泸州“大红袍”荔枝的Ca、Fe、Zn、Ni、Mn、Cu、Pb在果皮、果核、果肉中的分布。结果 :该方法的相对偏差介于 1.4 %～ 3.0 % ,平均回收率 89%～ 117% ,分析结果较为满意。结论

CCK8对高脂血症大鼠胰岛细胞生长及胰岛素分泌的影响

目的：观察八肽胆囊收缩素（octa—peptide cholecystokinin，CCK8）对高脂血症模型大鼠体外培养的胰岛细胞的生长及胰岛素分泌的影响。方法：SD大鼠饲以高甘油三脂、高胆固醇膳食，建造成实验性高脂血症模型，采用酶消化、密度离心等方法分离、培养胰岛细胞，并随机分为对照组和实验组，实验组分别加入终浓度为10^-7～10^-9mmol／L的CCK8处理细胞24、48h，对照组加入等量培养基。MTT法检测胰岛细胞增殖情况；放射免疫测定法检测不同条件下胰岛细胞的胰岛素分泌量。结果：与对照组比较，经不同浓度CCK8处理24、48h后，胰岛细胞的增殖及胰岛素分泌量均显著提高（差异具有显著性），且具有剂量及时间依赖性。结论：CCK-8能显著增强高脂血症模型大鼠胰岛细胞增殖及胰岛素的分泌，提示CCK8对于脂毒性影响下的胰岛细胞具有保护作用。

地塞米松对早期脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的观察地塞米松对早期脓毒症大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法将雄性大鼠随机分为3组:生理盐水组(N组)、脂多糖组(L组)、脂多糖+地塞米松组(LD组)。各组大鼠于造模后4 h麻醉处死,行动脉血气分析,测定肺组织湿/干质量比值(W/D),用RT-PCR法检测肺组织水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)mR-NA表达水平。结果与L组比较,LD组大鼠肺组织湿/干质量比明显降低,AQP1 mRNA表达水平升高,动脉血气改善。结论地塞米松对早期脓毒症大鼠ALI有保护作用,该作用与上调肺AQP1 mRNA表达水平有关。

培养神经元及肝细胞蛋白质样品制备方法的比较研究

目的 :优化神经元和肝细胞蛋白样品的制备方法 ,以提高双向电泳分析结果的正确性和可靠性。方法 :采用不同的细胞裂解液在不同的裂解条件下提取培养神经元或肝细胞的全细胞蛋白质 ,考马斯亮蓝G - 2 5 0测定蛋白质含量 ,SDS -PAGE、双向电泳对蛋白质进行电泳分离。结果 :蛋白质含量测定及电泳图谱的对比分析可见 ,用酶消化法和机械收集法所得蛋白质样品含量均较直接裂解法低 ;蛋白质抽提液中还原剂及去污剂的不同选择对结果的影响较大。结论 :采用培养瓶中细胞直接裂解法较酶消化或机械收集法收集细胞再提取蛋白质更为有效 ,还原剂TBP有利于提高蛋白质双向电泳结果的质量 ,在去污剂的使用方面神经元裂解宜采用 4 %CHAPS ,而肝细胞裂解则宜采用 2 %TritonX - 10 0。

大肠杆菌O-157产生的VT2对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用

目的研究毒源性大肠杆菌VETCO-157产生的外毒素-VT2对中性粒细胞自发性凋亡的影响,探索VETC感染后并发的溶血性尿毒症HUS及相关疾病的发病机理。方法运用形态学观察、流式细胞仪FACS技术和DNA分离技术进行研究。结果在无VT2存在的情况下,经过24h体外培养,65%左右的中性粒细胞发生了凋亡,而浓度为10-6M的VT2使其凋亡发生率降至20%左右。结论VT2延长了中性粒细胞的功能性生命期限,使其胞浆内细胞毒性物质有更多的机会损伤肾小球血管内皮细胞,促进微血栓的形成,因而中性粒细胞可能参与了HUS的形成过程。

Bm-12促C6胶质瘤细胞生长及凋亡作用的研究

目的探讨Bm-12促C6胶质瘤细胞生长及凋亡的作用。方法显微镜观察不同浓度Bm-12对C6胶质瘤细胞生长的影响,用PBS溶液作为对照组。并用流式细胞仪检测不同浓度Bm-12对C6胶质瘤细胞凋亡的影响。结果不同浓度Bm-12加入C6胶质瘤细胞培养液后,C6胶质瘤细胞生长明显受抑制,细胞形态及数量明显发生变化,且凋亡率均较对照组显著增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论 Bm-12可以抑制C6胶质瘤细胞生长,并诱导其凋亡。

几种寡糖结构在大肠癌及腺瘤中表达的比较

目的 :为了探讨大肠癌发生过程中寡糖表达模式的变化 ,从而为进一步研究有关糖蛋白分子表达改变找出线索。方法 :采用多种组织学类型的大肠癌 84例 ,大肠腺瘤 5 2例 ,分别进行连续石蜡切片SLex 免疫组化染色和T、ST、Tn以及STn的凝集素组化染色。观察和比较它们在癌与腺瘤细胞浆和细胞膜 (或腺腔缘 )阳性率的差别。结果 :①除了T和Tn胞膜染色在癌组织的阳性率 (分别为 2 6 84[30 1%]和 5 3 84[6 3 1%])比腺瘤者 (分别为 8 5 2 [15 4 %]和 18 5 2 [30 8%]高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,各指标在两者的胞膜和胞浆染色阳性率都没有显著差异。②STn染色 ,腺瘤中胞浆 (+)胞膜 (- )模式占 10 5 2 (19 2 %) ,明显比癌组织中 4 84(4 8%)高 (P <0 0 1)。结论 :随着腺瘤细胞向癌细胞的转化 ,尽管胞浆的表达率无差别 ,但胞膜上可能出现更多的T、Tn和STn表达。

对5868例女性常见生殖系统肿瘤类型的分析

目的 :探讨女性常见生殖系统肿瘤的类型。方法 :对我院病理科 2 0 0 3年全年病例中 5 86 8例女性病例进行统计分析。结果 :5 86 8例女性病例中恶性肿瘤以乳腺癌最多 ,宫颈癌其次。结论 :①乳腺癌的发病高于宫颈癌的发病 ,其高发年龄在 4 0～ 6 0岁 ;②癌前病变的防治对防止癌的发生有重要意义。