精细化理论在医学细胞生物学及遗传学教学中的应用

目的:建立基于精细化管理理论的医学教学模式。方法:在医学细胞生物学和遗传学课程教学运行过程的课前准备、课堂教学、课外拓展学习、考核等环节运用精细化理论进行细化管理,组织教学。结果:通过改革,形成教学"密切结合科研,密切结合实践,密切结合新进展"的特色教育模式。结论:精细化培养是高等人才培养的有效途径之一。运用精细化的管理思想构建人才培养体系,是现阶段高等教育发展的需要。

医学遗传学应用多媒体教学的思考

从教学实践出发,分析在医学遗传学课程中应用多媒体教学的优势和存在的主要问题,并对存在的问题进行分析,提出相应的改进措施,以便充分发挥多媒体教学的优势和作用,提高教学质量。

医学遗传学教学反馈信息的初步分析

在我国，“医学遗传学”是近年发展起来的新兴学科，大部分医学院校开设该门课程仅１０年左右时间，课程设置、教学内容、教学方式等方面目前仍在不断探索过程中，从教学对象－学生处收集反馈信息，并加以认真分析总结，无疑对于促进课程的改革、完善、提高，加快课程建设...

医学细胞生物学实验教学改革探索

实验教学在我国医学教育中占有极其重要的地位,对于培养合格的医学人才起着决定性的作用。为提高实验教学质量和学生的综合素质,医学细胞生物学与遗传学教研室进行了医学细胞生物学实验教学改革。通过改革,调动了学生学习积极性,更好地培养了学生的创新精神和实践能力,取得了明显的实验教学成效。

加强高等医学院校实验教学质量监控的思考

实验教学是高等教育的重要组成部分,对高等医学教育尤为重要。加强实验教学质量监控体系的构建是高等医学院校实验教学管理的重要环节之一,能够推进实验教学管理的规范化、信息化和科学化,对提高实验教学质量将起到非常重要的作用。本文结合高等医学院校实际,对实验教学质量监控体系的构建进行了分析,并围绕如何加强高等医学院校实验教学质量监控体系提出了相应的措施。

医学遗传学实验教学中对医学生综合实践能力的培养初探

＂以实验为中心安排教学＂是近年来美国高校正在开展的一项极有影响力的实验教学改革计划（enhanced biology education programe,EBE）,其教学重点为能力的培养[1-2]。医学遗传学是应用遗传学的理论和方法研究人类遗传性疾病和人类疾病发生的遗传学问题的一门综合性学科[3],是横跨基础医学与临床医学的桥梁课程。

85例Turner综合征的细胞遗传学分析

目的:分析Turner综合征患者的临床表现、染色体核型及其关系。方法:采用外周血淋巴细胞培养G显带染色体核型分析技术对85例Turner综合征患者进行染色体核型分析,并对比其临床表现与不同染色体核型之间的关系进行分析。结果:Turner综合征患者临床表型复杂,核型多样。其核型主要有X单体型、嵌合型、X染色体结构异常等。结论:X染色体缺失或部分片段缺失是导致Turner综合征的主要原因。闭经、副性征发育不良、身材矮小等是其典型表现。不同核型个体的临床表型可有差异。及早确诊对该病的防治具有积极意义。

218例智力低下儿童细胞遗传学分析

对218例智力低下、发育异常的儿童进行外周血细胞培养,G显带染色体核型分析。结果在218例中,发现染色体异常核型95例,检出率为43.58%。21-三体综合征核型90例,占总检出率的94.74%;非21-三体核型5例,占总检出率的5.26%。先天性智力低下与染色体异常密切相关,异常核型以21-三体型为主;染色体检查可对患儿明确病因、及早诊治、遗传咨询提供依据。

四川叙永县苗族和汉族人头面部人类遗传学特征调查研究

目的了解四川叙永县苗族、汉族人头面部人类遗传学特征。方法遵循整群随机抽样原则,调查叙永县苗族257人、汉族279人人头面部14项人类遗传学特征。结果 (1)长睫毛、双眼睑、有蒙古褶、有耳垂、有达尔文结节、湿性耵聍、凸鼻梁、勾鼻尖、阔鼻孔、卷舌、直舌、前额V型发际、卷发、右发旋在苗族中的出现率分别为:36.58%、80.16%、53.31%、49.81%、63.81%、28.02%、39.69%、8.95%、65.37%、56.81%、89.11%、33.07%、28.02%、57.98%;在汉族中的出现率分别为:68.46%、67.03%、67.38%、59.86%、63.08%、32.97%、30.82%、11.11%、55.56%、68.10%、88.53%、39.07%、14.34%、66.31%。(2)苗族男性和女性耳垂、鼻梁、鼻孔、卷舌4对性状出现率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);汉族男性和女性仅耳垂出现率上,差异有统计学意义(P<0.01)。苗族人和汉族人比较,共有9对性状出现率差异有统计学意义(P<0.05或0.01),包括睫毛、眼睑、蒙古褶、发形、卷舌、耳垂、鼻梁、鼻孔、发旋。结论四川叙永县苗族、汉族人多项头面部人类遗传学特征具有自身民族特点。

不良妊娠夫妇的细胞遗传学分析

目的:探讨不良妊娠夫妇与染色体异常的关系。方法:对570例(285对)有习惯性流产、不孕不育、死产、死胎及曾生育畸形儿或智力低下儿史的遗传咨询者进行外周血淋巴细胞培养,G显带染色体核型分析。结果:570例遗传咨询者中染色体核型异常38例,异常率达6.67%,显著高于普通人群。结论:染色体异常是导致不良孕产的重要影响因素,对不良妊娠夫妇进行细胞遗传学检查,不仅有助于病因的分析与诊断,而且对提高出生人口素质,降低出生缺陷有十分重要的指导意义。

Y染色体异常的临床表现与细胞遗传学分析

人类Y染色体是一个小的近端着丝粒染色体,长约50Mb。Y染色体上有与男性性别决定密切相关的基因存在。故若Y染色体发生数目异常或结构改变则会引起男性性发育异常或生殖异常等遗传效应。同时,在人群中Y染色体的长度具有变异性,这种长度变异性是否具有临床效应仍然是一个存在争议的问题,值得进一步的研究。

不良妊娠者的细胞遗传学分析

目的讨论染色体平衡易位与不良妊娠者(流产、死胎、畸胎、生育异常儿等)的关系。方法常规取外周血培养,制备染色体G显带标本,镜下核型分析。结果 732例遗传咨询者中,有不良孕产史者407例,检出染色体平衡易位携带者11例,女性9例,男性2例。结论染色体平衡易位是引起流产、死胎、畸胎、生育异常儿的重要遗传因素。

590例遗传咨询者细胞遗传学分析

目的:探讨来自西南地区遗传咨询者的染色体异常与临床异常的关系。方法:培养外周血淋巴细胞,采用染色体G显带技术,对590例遗传咨询者作染色体核型分析。结果:检出染色体异常核型84例,检出率为14.24﹪。结论:染色体异常是导致智力低下、不良孕产、不孕不育、原发及继发闭经、生殖系统发育异常、两性畸形等的重要病因,对遗传咨询者进行细胞遗传学分析在临床诊断和优生优育等方面具有重要意义。

泸州髙坝地区480例遗传咨询者细胞遗传学分析

目的对遗传咨询者进行细胞遗传学分析,探讨细胞遗传学分析在遗传咨询与优生优育工作中的重要作用。方法常规取外周血淋巴细胞培养,制备染色体G显带标本,镜下核型分析。结果检出染色体异常核型63例,异常率13.13%。结论染色体异常是影响智力和正常生育的重要因素之一。开展染色体检查有利于优生优育,在遗传咨询工作中具有重要意义。

PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导

目的:研究内质网应激条件下PI3K/Akt信号通路对HEK293细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的调控作用。方法:采用PI3K抑制剂LY294002、Akt1失活型突变载体Akt1(K179M)及Akt siRNAs阻断内质网应激介导的Akt活化,采用Akt激活型突变载体Myr-Akt过度激活内质网应激介导的Akt活化,并利用RT-PCR和Western blotting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt信号途径对HEK293细胞中GRP78表达水平的调控作用。结果:LY294002、Akt1(K179M)及Akt1 siRNA均明显抑制了内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt1明显促进内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt2/3及Akt2/3 siRNA对GRP78的诱导均无影响。PI3K/Akt信号通路阻断或过度激活对GRP78 mRNA水平的诱导无影响,但是对GRP78的降解有显著影响。结论:HEK293细胞中,PI3K/Akt通过蛋白稳定性调节促进内质网应激对GRP78的诱导。

研究型教学与合作学习模式的创建与实践

如何培养学生解决实际问题的能力和创新能力是当前高等教育改革的重要课题之一。创新能力是在创造性解决问题的过程中培养出来的综合能力[1]。启发学生主动实践,是创新能力培养的关键所在。医学是一门不断创新与发展的学科。高等医学院校在培养学生的过程中,不仅要培养学生的专业知识水平,而且要培养学生的自学能力及敏捷的科学思维[2]。

乳腺癌组织中端粒酶活性的定量检测及其与临床病理的关系

背景与目的:端粒酶是一种在细胞永生化及癌症发生过程中起重要作用的核蛋白酶。最近关于乳腺癌中端粒酶活性与预后因素间的关系,因研究方法的差异而呈现出不一致的报道。本研究旨在建立一种可行的银染端粒酶定量检测法,以探讨乳腺癌中端粒酶活性与临床病理学预后因素间的关系。方法:运用银染端粒重复序列扩增法(SS-TRAP)检测了52例新鲜乳腺癌及其癌旁组织,32例乳腺良性病变和14例正常乳腺组织中端粒酶的活性表达,对结果予以定量并结合临床资料进行分析。结果:乳腺癌、癌旁组织、良性病变及正常乳腺组织中端粒酶阳性率分别为90.38%(47/52)、28.85%(15/52)、31.25%(10/32)、0(0/14)。端粒酶分别为36.91±15.35、8.27±4.37、14.10±5.28、0(TPG单位),单因素方差分析结果显示,乳腺癌组端粒酶活性水平明显高于其他3组(P值均<0.01)。Logistic回归分析结果表明,乳腺癌中端粒酶的表达与病理类型、分化程度明显相关(P=0.003及0.004),即随着肿瘤的进展,端粒酶活性亦增加。其中,浸润性非特殊癌端粒酶活性水平明显高于浸润性特殊癌(P<0.05);中、低分化癌端粒酶活性均高于高分化癌(P<0.05),中、低分化癌间无显著性差异(P>0.05)。端粒酶活性表达在患者病程、年龄、绝经状况间均无显著性差异(P>0.05)。

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesil-HK。两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制;pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P<0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%。结论hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗。

特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应

为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达。与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48h抑制率最高,72h后下降,其中位于hTERT mRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性。

c-myc反义核酸对乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响

目的探讨脂质体介导c-myc基因反义寡核苷酸(Antisense phosphorothioate oligodeoxynucle-otide,ASODN)对MCF-7细胞生长及其人体端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达的影响。方法将c-myc正、反义寡核苷酸(ODN)分别导入各组MCF-7细胞中,MTT法、逆转录-聚合酶链法及流式细胞术分别检测各组细胞生长情况、hTERTmRNA的表达水平以及细胞凋亡率。结果c-mycASODN转染MCF-7细胞24h后,细胞生长受到抑制(P<0.05),并且hTERTmRNA表达明显降低;随着反义核酸作用时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多,细胞生长及hTERT表达的下降随时间延长逐渐明显。对照组、LR-SODN组、LR-ASODN24h组与LR-ASODN48h、72h组相比有明显统计学差异(P<0.05)。结论c-myc反义寡核苷酸能显著下调细胞中hTERT基因的表达活性,诱导MCF-7细胞凋亡,并抑制MCF-7细胞生长;在一定程度上,其效果与时间呈正相关。