青蒿油诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究青蒿油是否能诱导人肝癌细胞 SMMC- 772 1凋亡。方法 用青蒿油作用于 SMMC- 772 1细胞进行研究 ,以羟基喜树碱作为阳性对照 ,生理盐水作为阴性对照 ,采用 Giemsa's染色法、透射电镜检测细胞形态的改变、流式细胞仪检测细胞凋亡率及琼脂糖电泳检测 DNA图谱。结果 10 0μg/ m l青蒿油作用于肝癌细胞 2 4h后 ,可见典型的细胞凋亡形态学改变即胞浆固缩、核染色质断裂、出现凋亡小体、DNA电泳呈梯形条带及流式细胞仪检测出现亚 G1 峰等。结论 青蒿油有诱导肝癌细胞凋亡的作用。

四川泸州山银花挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析

目的研究泸州地区产山银花挥发油的化学成分。方法用水蒸气蒸馏法提取山银花挥发油,采用GC-MS联用仪对其进行分析鉴定,并用面积归一化法测定其百分含量。结果山银花挥发油共分离出47个组分,鉴定了其中31个成分,占挥发油总量的89.67%。其中,含量超过1%的有23个,芳樟醇含量最高,达24.51%。结论该法分离效果良好,所鉴定组分较准确,对泸州地区产山银花挥发油的开发应用研究有一定的参考价值。

金银花精提取物与粗提取物注射液的主动全身过敏试验研究

目的对不同提取纯化工艺制备的金银花提取物注射液进行免疫毒性试验,以了解含金银花的注射剂致过敏反应的原因。方法按《中药、天然药物免疫毒性研究的技术指导原则》的要求,做金银花精提取物与粗提取物注射液的主动全身过敏试验。豚鼠腹腔注射致敏量以绿原酸计分别为7.5,1.5 mg.kg-1,静脉注射激发量是致敏量的2倍,激发后详细观察记录每只动物的反应情况。结果金银花精提取物注射液高、低剂量组动物均未出现过敏反应,而金银花粗提取物注射液高剂量组出现类过敏强阳性反应,低剂量组出现阳性反应。结论金银花粗提取物注射液出现类过敏反应的原因,与注射液中含有蛋白质、树脂、鞣质等杂质有关。

泸州纳溪GAP基地栀子中4种主要活性成分的含量测定

目的:建立同时测定纳溪GAP基地栀子中京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ含量的HPLC分析方法。方法:色谱柱:Dikma Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;变波长测定。结果:京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的线性范围分别为0.053～0.530μg(r=0.9997),1.5375～15.375μg(r=0.9999),0.22～2.20μg(r=0.9999),0.040～0.400μg(r=0.9998)。平均回收率分别为98.45%(RSD=0.85%),98.75%(RSD=0.59%),98.85%(RSD=0.54%),98.61%(RSD=0.73%)。结论:该方法简便、快速、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为栀子中这4种成分的含量测定方法。

济银花与川银花绿原酸含量及提取率实验研究

目的:通过实验研究,明了济银花与川银花绿原酸含量及提取率的高低,供使用参考选用。方法:以相同的提取工艺制备供试品,采用液相色谱法(HPLC)及紫外分光光度法(UV),测定金银花提取物及原药材供试品中的绿原酸,计算百分含量及提取率。结果:济银花含绿原酸为2.81%(HPLC)与4.27%(UV),提取率为0.14%(HPLC)与0.91%(UV)。川银花含绿原酸3.26%(HPLC)与6.23%(UV),提取率为0.54%(HPLC)与2.52%(UV)。结论:川银花总绿原酸含量(UV)高于济银花,绿原酸提取率是济银花提取率的3.86倍(HPLC)与2.77倍(UV)。

可变波长建立泸州纳溪GAP基地栀子药材高效液相色谱指纹图谱

目的建立泸州纳溪GAP基地栀子药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法以栀子苷为参照物,采用DikmaDiamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,变波长检测。结果建立了纳溪栀子的HPLC指纹图谱,并确定了19个共有峰,共有峰的参数符合"中药注射剂指纹图谱技术要求"的有关规定。结论方法准确,重复性好,建立的指纹图谱检测标准,可作为纳溪栀子质量评价与品种鉴别的重要依据之一。

复尔康注射液诱导肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的：研究青蒿油制剂复尔康注射液对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法：CCK8试剂盒（cell counting kit-8）检测复尔康注射液对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用；Hoechst33258荧光染色观察HepG2细胞凋亡的形态学改变；流式细胞仪AnnexinV／PI双染法检测HepG2细胞的凋亡率。结果：复尔康注射液可抑制HepG2细胞的增殖，IC50值为29．63±1．22μg／ml；复尔康注射液0．3125-10μg／ml作用48h后，Hoechst33258荧光染色均可见HepG2细胞出现核浓缩、核碎裂等细胞凋亡形态学改变，且呈现出一定的剂量依赖性；AnnexinV／PI双染法检测显示，不同浓度的复尔康注射液均可诱导HepG2细胞凋亡，凋亡率分别为4．71％±0．71％、10．05％±0．67％、15．08％±1．16％、23．59％±1．65％、32．30％±1．87％、42．09％±1．43％。结论：复尔康注射液可抑制HepG2细胞的增殖，诱导其凋亡。

杜仲叶降血糖作用的实验研究

目的:观察杜仲叶的降血糖作用。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制造小鼠的糖尿病模型,研究杜仲叶灌胃给药对正常动物和模型动物血糖的影响。结果:杜仲叶能拮抗STZ诱导的小鼠高血糖,明显降低糖尿病小鼠的空腹血糖。结论:杜仲叶对糖尿病小鼠显示出良好的治疗作用,具有较好开发前景。

连翘挥发油提取工艺及包合工艺研究

目的:考察康泌安片中连翘挥发油的提取及包合条件。方法:选择挥发油与β-环糊精比例、加水量、包合温度、搅拌时间4个因素进行正交试验,以包合物的收得率、包合率综合评分为评分指标,确定挥发油最佳包合工艺条件。结果:最佳包合工艺为取8gβ-环糊精,溶于60ml水,加入1ml挥发油,在40℃的条件下搅拌包合20分钟,滤过,40℃干燥4小时,研磨,过100目筛。结论:康泌安片的挥发油包合工艺合理可行。

辽东楤木根皮的质量标准研究

目的:建立辽东楤木根皮的质量标准。方法:采用薄层色谱法对辽东楤木根皮进行定性鉴别;高效液相色谱(HPLC)法对其所含主要有效成分楤木皂苷A进行含量测定。结果:TLC法可检出辽东楤木根皮中楤木皂苷A的特征斑点;楤木皂苷A在6.325～25.30μg范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率96.63%,RSD为1.23%。结论:该方法灵敏、准确、专属性强、重现性好,可用作辽东楤木根皮的质量控制。

青银注射液抗病毒药效学研究

目的:了解青银注射液对常见致病病毒的抑制作用,为临床用药提供理论依据。方法:体外试验,采用组织细胞培养法,观察药物对柯萨奇(CVB3)、疱疹病毒(HSV-Ⅱ)的抑制作用。体内试验,分别用CVB3、HSV-Ⅱ感染小鼠,经腹腔或静脉注射给药,观察小鼠存活天数,评价药物抗病毒作用。结果:体外试验,本品浓度105μg.ml-1以上,对CVB3、HSV-Ⅱ均有抑制作用;体内试验,本品对感染了HSV-Ⅱ的小鼠,4个给药剂量组小鼠存活天数均比阴性对照组明显延长(P<0.01),具有较好的量效关系。结论:青银注射液对疱疹病毒的抑制作用强,而对柯萨奇病毒的抑制作用稍弱。

舒肤软膏对皮肤刺激及致敏作用的实验研究

目的观察舒肤软膏对皮肤是否有刺激作用及致敏作用。方法采用豚鼠,用药物反复致敏接触皮肤,末次致敏后14天进行攻击,0小时、24小时、48小时、72小时观察皮肤有无红斑、水肿现象,并计算致敏率;采用家兔进行皮肤刺激试验,用同体完整皮肤和破损皮肤对照法观察舒肤软膏对皮肤的刺激作用。结果舒肤软膏组豚鼠皮肤致敏率为0;家兔完整皮肤组、破损皮肤组接触舒肤软膏后不同时间均未见异常反应。结论舒肤软膏无皮肤致敏反应和皮肤刺激性反应,局部应用较安全。

泸州桑叶中总黄酮的含量测定

目的:建立桑叶中总黄酮的含量测定方法。方法:采用UV法测定总黄酮。结果:总黄酮在0.02～0.08mg/ml范围内具有良好的线性关系(R=0.9998),回收率为98.52%,RSD为0.74%。结论:该方法操作简便、快速、有效、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为桑叶总黄酮的含量测定方法。

青蒿挥发油含量检测及提取工艺研究

目的 :青蒿挥发油具有明显的生物活性 ,为了解青蒿不同生长期、贮存期挥发油含量 ,筛选最佳提取工艺 ,故进行本项研究。方法 :依法测定青蒿不同生长期、贮存期发挥油含量 ,采用正交法优选青蒿油的最佳提取工艺。结果 :青蒿挥发油含量 :盛花期 >初花期 >花后期 >花前期 ;干品随贮存期延长 ,含油量逐渐降低 ,从 0 .3 %(0月 )降至 0 .0 4% (12个月 ) ;干品最佳提取工艺为共水蒸馏 ,每次加 8倍量水 ,浸泡 3小时 ,蒸馏 3小时。结论 :以青蒿盛花期鲜品或零月干品为原料 ,挥发油提取率最高 ,可达 0 .3 %左右。

医学微生物学双语教学的尝试与思考

为了探索适合于教学型本科医学院校的双语教学模式,结合医学微生物学的课程特点,借鉴近年来其他院校双语教学的实践经验,笔者在部分专业范围内进行了医学微生物学双语教学的实践与尝试,分析了限制双语教学的一些因素,为双语教学的有效实施积累了一定的教学经验。

川产灰毡毛忍冬金银花气相色谱指纹图谱研究

目的:建立川产灰毡毛忍冬金银花药材的气相色谱(GC)指纹图谱。方法:采用GC检测川产金银花药材中所含挥发性化学成分,以芳樟醇为参照物,按"中药指纹图谱研究的技术要求"计算相对保留时间及峰面积比值,标定共有指纹峰。结果:在全面方法学研究的基础上,先后对10批金银花药材供试品进行检测分析,从而建立了该药材的GC指纹图谱。结论:GC指纹图谱中共有18个共有峰,其相对保留时间及峰面积比值可作为川产灰毡毛忍冬金银花的质量控制之一。

HPLC测定泸州桑叶中芦丁的含量

目的:建立泸州桑叶中芦丁的含量测定方法。方法:采用HPLC法测定芦丁的含量,色谱柱:Dikma Kromasil C18柱(5μm,250×4.6mm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱(0→30min,乙腈15→30%);流速:1.0ml·min-1;检测波长:355nm;柱温:30℃;进样量:10μl。结果:芦丁在0.08～0.8μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.68%,RSD为1.26%(n=5)。结论:该方法简便、快速、有效、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为泸州桑叶的定量分析方法。