激光辅助制作小鼠嵌合体胚胎的研究

目的:探索激光辅助体外制作小鼠嵌合体胚胎的方法。方法:激光辅助去除不同发育阶段体外受精胚胎的透明带,随机组合卵裂球体外培养,观察胚胎融合情况。结果:没有透明带的卵裂球体外能够"自发"融合,并且融合胚胎在体外培养环境中,能够发育至囊胚期,显微镜观察其形态基本与二倍体胚胎无差别。结论:激光辅助方法获得裸露的卵裂球能够在体外培养环境制作嵌合体胚胎。

川南地区5405例男性不育患者年龄与精液常规参数的相关性分析

目的：分析川南地区不育症男性精液质量情况,探讨男性年龄对精液质量的影响,为男性不育症的临床诊断提供科学依据。方法对川南地区5405例男性不育症患者精液进行回顾性分析和统计,分析指标包括精液量、精子浓度、精子活率、活力、pH值等,并根据年龄分为〈30岁、30-40岁、〉40岁3组,分析比较各组精液参数。结果精液常规分析结果中,各项指标均正常占23．0%（1244/5405）；精液质量异常占77．0%（4161/5405）,无精子症占6．4%（345/5405）。异常精液参数主要以精子活力异常（85．4%,3257/3816）为主,精子活率异常（65．4%,2497/3816）次之。各年龄组间精子活力和活率有统计学差异（P〈0．01）,且随年龄的增加有下降趋势。小于30岁组的精液量高于〉40岁组,差异有统计学意义（P〈0．05）,提示随年龄增加精液量减少。结论川南地区男性不育患者的精液随年龄增长对精子活力、活率及精液量有一定影响,精子活力及活率异常是导致生育力低下的主要原因,及早就诊对不孕不育夫妇非常关键。

地区不孕不育妇女TORCH检测情况及分析

目的:通过对川南地区不孕不育妇女TORCH检查结果统计分析,探讨TORCH检测项目的开展在辅助生殖技术领域的必要性。方法:采用胶体金法对2008年1月～2011年12月间不孕不育妇女血清进行TORCH-IgM定性检测。结果:TOX-IgM,RV-IgM,CMV-IgM,HSVⅡ-IgM阳性率分别为0.72%、1.38%、1.86%、2.58%,TOX病毒感染阳性率与其他三种病毒阳性率存在统计学差异(P<0.05);TORCH病毒检测群体感染统计,25～29岁感染率较高。结论:TORCH检查结果对不孕不育诊疗有积极的指导性意义。

小鼠体外受精胚胎发育的研究

目的:通过对不同培养方式下促排小鼠体外受精卵发育能力的比较研究和分析,为新建生殖医学实验室培养环境质量控制提供依据。方法:在相同的培养条件和培养时间下,将获得的小鼠卵母细胞随机分为两组,体外受精后,分别以四孔培养法(群体培养)和微滴培养法(单独培养)进行培养,观察记录并计算双原核卵率、24h≥4细胞率、48h融合胚胎率以及96h囊胚率。结果:四孔培养法体外培养后24h≥4细胞数胚胎率明显高于微滴培养法,有统计学意义(P<0.01);48h融合胚发育率有统计学意义(P<0.05);囊胚形成率上差异无统计学意义。结论:结果显示,四孔培养法(群体培养)更利于体外受精小鼠胚胎的发育。

地区不孕不育病例回顾性分析

目的:探讨地区不孕不育症的发展趋势,以及不孕抗体在临床不孕不育检测中的重要性及意义。方法:采用胶体金法检测不孕不育患者血清抗体。结果:2008～2011年间接受不孕抗体检查人群年龄整体偏轻化,且有逐年增长的趋势;女性患者抗精子抗体阳性率检出率与男性患者存在极显著差异(P<0.01);女性不孕抗体检测中,抗精子抗体阳性率与抗卵巢抗体、抗子宫内膜抗体、抗HCG抗体存在极显著性差异(P<0.01)。结论:不孕抗体检测及分析,对不孕不育症临床检测及治疗有指导性的意义。

不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。

精子DNA损伤与宫腔内人工授精妊娠率关系

目的探讨精子DNA损伤与宫腔内人工授精妊娠率的关系。方法收集36对夫妇共46个宫腔内人工授精（IUI）周期的男性精液进行分析，每份精液经优化处理后用于IUI，根据妊娠结局将患者分为妊娠组和非妊娠组，比较两组精子浓度、精子活动率、精子正常形态率及精子碎片化指数（DFI），分析精子DFI与IUI妊娠结局的关系。结果IUI妊娠组精子DFI为10．0％，比非妊娠组的20．2％低；妊娠组的精子浓度、精子活动率、精子正常形态率比非妊娠组高；精子DFI与精子浓度之间呈负相关，与精子活动率及精子正常形态率呈负相关。结论精子DFI可能从精子浓度、活动力及形态等方面影响精子质量，是影响IUI妊娠结局的重要因素之一。

男性不育患者Y染色体无精子因子基因微缺失的研究

目的探讨川南地区无精子症及严重少精子症患者Y染色体无精子因子（azoospermiafactor，AZF）区微缺失的位点及其特点。方法采用多重PCR技术对134例无精症患者、90例严重少精症患者和70名正常男性进行Y染色体AZF区18个序列标签位点（sequencetaggedsite，STS）的检测。结果在224例患者中，AZF缺失率为12．1％（27／224），其中无精症患者缺失率为13．4％（18／134），严重少精症患者缺失率为lO．o％（9／90）。AZFc区缺失为最常见的缺失类型，占51．9％。选用18个STS位点的检出率比欧洲男科学会和欧洲分子遗传实验质控网推荐的6个STS位点提高约22．7％（5／22）。正常对照组未发现Y染色体微缺失。结论Y染色体微缺失检测对诊断男性不育具有重要价值，AZFe区是川南地区男性不育患者Y染色体微缺失的缺失热区。增加STS位点检测数在一定程度上提高缺失检测的可靠性及检出率。

川南地区2938例不育男性精液质量分析

目的分析川南地区不育症男性精液质量情况,为男性不育症临床提供科学依据。方法采用计算机辅助精子分析(CASA)技术,按照第五版《WHO人类精液检查与处理实验室手册》,对2938例不育男性精液进行常规分析和统计。结果在2938例精液标本中,各项指标均正常者659例(22.4%);精液质量异常者2279(77.6%),精子活力异常1997(68%),活率异常1593(54.2%),pH值异常834(28.4%),精液量异常612(20.8%),密度异常509(17.3%),无精子症175(6%)。结论川南地区不育男性精液质量与同期育龄男性精液质量相比,精液质量明显下降,约77.6%的不育男性精液质量异常,精子活力和活率异常所占比例较高,提示精液质量下降是导致男性不育的主要因素。多种精子质量检测技术的应用将使男性不育特异性病因诊断变为可能。

年龄对小鼠IVF早期胚胎发育的影响

目的比较不同年龄小鼠体外受精胚胎发育的结局,探讨以年龄因素为背景的IVF胚胎发育的影响。方法采用相同超数排卵方案,在相同的培养条件和培养时间下,对4-8周龄和44-48周龄小鼠进行体外受精和胚胎培养,观察并记录双原核卵率、≥4细胞率、囊胚率以及孵化囊胚率。结果老龄组在受精率、卵裂率以及孵化囊胚率上与年轻组比较存在极显著性差异(P<0.01),但在囊胚形成率上的差异无统计学意义;老龄鼠超数排卵后获卵数明显少于年轻小鼠。结论年龄对卵子数量以及IVF胚胎早期发育有较大影响。