2型固有淋巴细胞的极化效应在乳腺癌中的研究

目的:探讨2型固有淋巴细胞(group 2 innate lymphoid cells,ILC2)及其转录调控因子和产物在乳腺癌中的作用。方法:收集正常人和乳腺癌患者(早期和晚期)的外周血。分离所有受试者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),流式细胞术检测PBMC中ILC2的比例。从PBMC中提取总RNA,检测调控ILC2发育的特异性转录因子(GATA3和RORα)和ILC2产物(IL-13和IL-4)的基因表达水平,并检测血浆中Th2型细胞因子(IL-13、IL-4、IL-33和IL-10)的蛋白表达水平。用外源性IL-13和IL-4刺激MCF-7和MDA-MB 231癌细胞,以模拟乳腺癌患者体内ILC2的极化后效应:检测癌细胞的增殖活力;检测增殖及自噬信号分子蛋白表达的改变;流式细胞术和荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果:乳腺癌患者外周循环中的ILC2水平增高(正常组与早期组:0.0196%vs.0.0289%,P=0.008;正常组与晚期组:0.0196%vs.0.0273%,P=0.032);雌/孕激素表达状态是影响ILC2水平的重要因素(HR=0.436,P=0.038)。GATA3、RORα、IL-13、IL-4、IL-33和IL-10的表达随着肿瘤负荷的加重而增加(P<0.05)。外源性IL-13和IL-4联合刺激可通过上调ERK 1/2和pERK 1/2来增强乳腺癌细胞的增殖活力(P=0.000);联合刺激可诱导MCF-7和MDA-MB 231癌细胞的自噬信号分子表达(P=0.000),还可诱导MDA-MB 231癌细胞的凋亡(P=0.000),但对MCF-7细胞凋亡无明显诱导作用(P>0.05)。结论:ILC2在外周循环中比例增高和ILC2上下游因子表达增高与乳腺癌的发生发展有关。