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CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究
1
作者
薛正楷
叶彬
魏泓
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2013年第12期124-128,共5页
为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探...
为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探针药物,在体外进行孵育,高效液相色谱仪测定睾酮羟基化产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的产量。结果显示,成功克隆了CYP3A39基因,建立了稳定表达CYP3A39基因的HepG2细胞株,且其具有睾酮代谢活性。
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关键词
细胞色素氧化酶
CYP3A39
基因克隆
重组细胞
代谢活性
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职称材料
重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究
2
作者
薛正楷
魏弘
《亚太传统医药》
2014年第5期9-13,共5页
目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制...
目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将其与重组P4503A4、P4503A39细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,获得药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果:P4503A39和P4503A4体外微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:P4503A39的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均显著低于P4503A4(P<0.05)。结论:重组P4503A39细胞微粒体活性显著低于重组P4503A4细胞微粒体活性。
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关键词
重组细胞
微粒体
细胞色素P4503A4
细胞色素P4503A39
药物代谢
下载PDF
职称材料
细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析
被引量:
1
3
作者
薛正楷
魏弘
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2015年第1期381-385,共5页
为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳...
为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳定表达重组细胞株Hep G2-P4503A46,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)探针药物,将探针药物与重组细胞在优化的细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将对照组进行比较分析。结果表明,本研究成功从人Bama小型猪肝组织克隆了P4503A46基因,并通过G418筛选,成功建立了细胞稳定表达株,其硝苯地平代谢活性显著高于阴性对照组(P<0.01);因此,成功克隆、并建立了小型猪P4503A46的稳定表达细胞株(Hep G2-P4503A46),该细胞株具有显著的硝苯地平代谢活性。
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关键词
基因
克隆
重组细胞株
细胞色素P4503A46
代谢活性
下载PDF
职称材料
重组CYP3A46细胞微粒体体外药物代谢动力学分析
4
作者
薛正楷
魏弘
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期124-129,共6页
通过对巴马小型猪CYP3A46重组细胞微粒体体外药物代谢动力学特征比较分析,为巴马小型猪应用于临床前药理试验提供科学依据。分析重组CYP3A4、CYP3A46细胞微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:CYP3A46的硝苯地平...
通过对巴马小型猪CYP3A46重组细胞微粒体体外药物代谢动力学特征比较分析,为巴马小型猪应用于临床前药理试验提供科学依据。分析重组CYP3A4、CYP3A46细胞微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:CYP3A46的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均比较接近CYP3A4(P>0.05),CYP3A46是否是CYP3A4的同源酶需要进一步研究确定。
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关键词
重组细胞
微粒体
人CYP3A4
小型猪CYP3A46
药物代谢
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职称材料
题名
CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究
1
作者
薛正楷
叶彬
魏泓
机构
泸州职业技术学院生物医学工程研究所
重庆医科大学分子
医学
与肿瘤中心
第三军医大学实验动物中心
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2013年第12期124-128,共5页
基金
国家"十五"科技攻关计划重点项目资助课题(2004BA717B23)
文摘
为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探针药物,在体外进行孵育,高效液相色谱仪测定睾酮羟基化产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的产量。结果显示,成功克隆了CYP3A39基因,建立了稳定表达CYP3A39基因的HepG2细胞株,且其具有睾酮代谢活性。
关键词
细胞色素氧化酶
CYP3A39
基因克隆
重组细胞
代谢活性
Keywords
cytochrome CYP3A39
gene cloning recombinant cell lines metabolic activity
分类号
S859.7 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究
2
作者
薛正楷
魏弘
机构
泸州职业技术学院生物医学工程研究所
第三军医大学实验动物中心
出处
《亚太传统医药》
2014年第5期9-13,共5页
基金
国家"十五"科技攻关计划重点项目(2004BA717B23)
文摘
目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将其与重组P4503A4、P4503A39细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,获得药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果:P4503A39和P4503A4体外微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:P4503A39的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均显著低于P4503A4(P<0.05)。结论:重组P4503A39细胞微粒体活性显著低于重组P4503A4细胞微粒体活性。
关键词
重组细胞
微粒体
细胞色素P4503A4
细胞色素P4503A39
药物代谢
Keywords
Recombinant Cell Lines Microsomes CytochromeP4503A4 CytochromeP4503A39 Drug Metabolism
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析
被引量:
1
3
作者
薛正楷
魏弘
机构
泸州职业技术学院生物医学工程研究所
第三军医大学实验动物中心
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2015年第1期381-385,共5页
基金
国家"十五"科技攻关计划重点项目资助课题(2004BA717B23)
文摘
为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳定表达重组细胞株Hep G2-P4503A46,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)探针药物,将探针药物与重组细胞在优化的细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将对照组进行比较分析。结果表明,本研究成功从人Bama小型猪肝组织克隆了P4503A46基因,并通过G418筛选,成功建立了细胞稳定表达株,其硝苯地平代谢活性显著高于阴性对照组(P<0.01);因此,成功克隆、并建立了小型猪P4503A46的稳定表达细胞株(Hep G2-P4503A46),该细胞株具有显著的硝苯地平代谢活性。
关键词
基因
克隆
重组细胞株
细胞色素P4503A46
代谢活性
Keywords
Gene
Clone
Cytochrome P4503A46
Metabolic activity
分类号
R349 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
重组CYP3A46细胞微粒体体外药物代谢动力学分析
4
作者
薛正楷
魏弘
机构
泸州职业技术学院生物医学工程研究所
第三军医大学基础医
学院
实验动物中心
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期124-129,共6页
基金
国家"十五"科技攻关计划重点项目(2004BA717B 23)
文摘
通过对巴马小型猪CYP3A46重组细胞微粒体体外药物代谢动力学特征比较分析,为巴马小型猪应用于临床前药理试验提供科学依据。分析重组CYP3A4、CYP3A46细胞微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:CYP3A46的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均比较接近CYP3A4(P>0.05),CYP3A46是否是CYP3A4的同源酶需要进一步研究确定。
关键词
重组细胞
微粒体
人CYP3A4
小型猪CYP3A46
药物代谢
Keywords
recombinant cell line
microsomes
human CYP3A4
Sus scrofa CYP3A46
drug metabolism
分类号
S571.1 [农业科学—茶叶生产加工]
Q946-33 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究
薛正楷
叶彬
魏泓
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2013
0
下载PDF
职称材料
2
重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究
薛正楷
魏弘
《亚太传统医药》
2014
0
下载PDF
职称材料
3
细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析
薛正楷
魏弘
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2015
1
下载PDF
职称材料
4
重组CYP3A46细胞微粒体体外药物代谢动力学分析
薛正楷
魏弘
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
下载PDF
职称材料
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