高血压大鼠动脉平滑肌细胞钙超载与腺苷三磷酸酶

目的探讨自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞钙超载与腺苷三磷酸酶(AT-Pase)的关系。方法组织块种植法培养SHR和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠胸主动脉平滑肌细胞,应用流式细胞术、生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术等检测SHR和WKY大鼠动脉平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)、细胞膜Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase活性及其mRNA表达水平。结果SHR动脉平滑肌细胞[Ca2+]i浓度高于WKY大鼠[(307.7±32.1vs118.9±21.4)nmol/L,P<0.01)],Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase活性低于WKY大鼠(1.3±0.2vs2.6±0.3;3.1±0.5vs4.9±0.5,P均<0.01),细胞质膜Ca2+-ATPase(plasmamembraneCa2+-ATPase,PMCA)亚型1和Na+-K+-ATPaseα1亚单位mRNA表达低于WKY大鼠(0.231±0.007vs0.403±0.021;0.253±0.028vs0.634±0.033,P均<0.01)。结论SHR动脉平滑肌细胞出现钙超载,其机制可能部分与细胞膜PMCA和Na+-K+-ATPase活性降低有关,两种ATPase功能降低可能是其基因转录水平下调的结果。

去甲肾上腺素和哌唑嗪对自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞膜Ca^(2+)-ATPase活性和PMCA1 mRNA表达的影响

目的观察去甲肾上腺素及其α1肾上腺素能受体拮抗剂哌唑嗪对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca2+-ATPasee活性及mRNA表达的影响。方法采用生化酶学法和逆转录聚合酶链反应技术观察不同浓度去甲肾上腺素和哌唑嗪对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca2+-ATPase活性和mRNA表达的影响。结果与自发性高血压大鼠组比较,10-7mol/L去甲肾上腺素能减弱Ca2+-ATPase活性(P<0.01)及mRNA的表达(P<0.01),10-5mol/L和10-6mol/L哌唑嗪能减弱10-7mol/L去甲肾上腺素对Ca2+-ATPase活性的抑制作用(P<0.05)。10-6mol/L哌唑嗪可抑制10-7mol/L去甲肾上腺素对PMCA1mRNA表达的影响(P<0.05)。单用哌唑嗪对Ca2+-ATPase活性及mRNA表达水平无明显改变(P>0.05)。结论去甲肾上腺素抑制自发性高血压大鼠Ca2+-ATPase活性和下调PMCA1mRNA表达,可能是通过α1肾上腺素能受体途径介导基因转录的下调。哌唑嗪可通过阻断α1肾上腺素能受体途径抑制去甲肾上腺素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca2+-ATPase活性和PMCA1mRNA表达的影响。

去甲肾上腺素与哌唑嗪对高血压大鼠动脉平滑肌细胞Na^+-K^+-ATPase活性及mRNA表达的影响

目的观察去甲肾上腺素(NE)及其α1肾上腺素能受体(α1-AR)拮抗剂哌唑嗪(Prazosin)对自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞Na+-K+-ATPase活性及mRNA表达的影响。方法采用生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应技术,观察不同浓度的NE和哌唑嗪对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na+-K+-ATPase活性和mRNA表达的影响。结果与SHR组比较,NE(10-7mol/L)能减弱Na+-K+-ATPase活性(3·98±0·14vs7·92±0·19,P<0·01)及Na+-K+-ATPaseα1-亚单位mRNA的表达(0·863±0·057vs1·307±0·051,P<0·01),单用哌唑嗪对Na+-K+-ATPase活性及mRNA的表达均无影响(P>0·05)。哌唑嗪(10-7,10-6,10-5mol/L)呈剂量依赖性减弱和阻断NE(10-7mol/L)对Na+-K+-ATPase活性(4·31±0·24,6·15±0·30,7·52±0·31)及Na+-K+-ATPaseα1-亚单位mRNA表达(0·857±0·041,1·096±0·055,1·183±0·059)的影响(P<0·01,P<0·05)。结论NE抑制SHRNa+-K+-ATPase活性和下调Na+-K+-ATPaseα1-亚单位mRNA表达,可能是通过α1-AR途径介导基因转录的下调。肾上腺素能1型受体拮抗剂哌唑嗪可通过阻断α1-AR途径抑制NE对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na+-K+-ATPase活性和Na+-K+-ATPaseα1-亚单位mRNA表达的影响。