急性脑梗死患者血清循环miR-424表达变化及其与炎症反应、脂代谢的关系

目的观察急性脑梗死(ACI)患者血清循环微小RNA-424(mi R-424)的表达变化,并分析其与炎症反应、脂代谢的关系。方法 100例ACI患者根据NIHSS评分分为重度ACI 61例、轻度ACI 39例,60例健康体检者为对照。采集纳入者空腹静脉血,采用实时定量PCR法检测血清循环mi R-424,采用ELISA法检测血清炎症反应因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、C反应蛋白(CRP),采用全自动生化仪检测血清脂代谢指标总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白(HDL-C)。随访1年,采用格拉斯哥预后评分(GOS)评价ACI患者的预后。分析ACI患者血清循环mi R-424水平与炎症反应因子、脂代谢指标、GOS评分的关系。结果与健康者比较,轻、重度ACI患者血清循环mi R-424相对表达量、血清HDL-C水平均降低,血清IL-6、IL-8、CRP、TC、TG和LDL-C水平均升高(P均<0. 05);与轻度ACI患者比较,重度ACI患者血清循环mi R-424相对表达量、血清HDL-C水平均降低,血清IL-6、IL-8、CRP、TC、TG和LDL-C水平均升高(P均<0. 05)。轻、重度ACI患者GOS评分分别为(3. 15±0. 65)、(2. 14±0. 59)分,二者比较,P <0. 05。ACI患者血清循环mi R-424水平与HDL-C、GOS评分呈正相关(r=0. 49、0. 61; P均<0. 05),与血清IL-6、IL-8、CRP、TC、TG、LDL-C水平均呈负相关(r=-0. 36、-0. 42、-0. 39、-0. 47、-0. 56、-0. 57; P均<0. 05)。结论 ACI患者血清循环mi R-424表达下降,血清循环mi R-424水平与ACI患者炎症反应因子水平、脂代谢水平有关。mi R-424可能成为ACI患者预后评估的一种潜在的生物指标。

miR-205对胃癌细胞侵袭迁移的调控作用及其潜在机制

目的探讨miR-205对胃癌HGC27细胞侵袭、迁移的作用及其机制。方法实时荧光定量PCR法测定4种不同胃癌细胞(AGS、MKN74、HGC27、SGC7901)中miR-205的表达情况。体外培养的HGC27细胞通过转染miR-205 mimic上调细胞中miR-205的表达,划痕实验和Transwell实验观察其侵袭和迁移能力;Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及相关信号通路的活性。结果 miR-205在4种胃癌细胞中均呈低表达(均P<0.05)。过表达miR-205后,HGC27细胞的迁移率由(54.7±4.1)%降低至(34.1±4.5)%(P=0.005);细胞的侵袭率由(52.8±6.3)%降低至(32.2±4.9)%(P=0.001)。此外,过表达miR-205之后,胃癌细胞中上皮细胞标志物E-cadherin、β-catenin蛋白表达显著上升(P=0.002,P=0.003),而间质细胞标志物N-cadherin、vimentin的蛋白表达显著下降(P=0.005,P=0.004),Notch和snail的蛋白表达水平也显著降低(P=0.002,P=0.003)。结论 miR-205在胃癌细胞中低表达,且与胃癌细胞的侵袭和迁移密切相关;其分子机制可能与抑制EMT及Notch/snail信号通路有关。

大孔树脂分离纯化罗勒叶总黄酮及抗氧化活性研究

以黄酮的吸附率、解吸率和回收率作为主要评价指标,对罗勒叶总黄酮纯化工艺进行研究。结果表明,在8种大孔树脂中选取X-5型用于纯化,最佳纯化工艺参数为:黄酮浓度为2.56 mg/mL时,56 mL pH值为4的上样液以2 BV/h的流速进行上样。待吸附饱和后,64 mL pH值为6的70%的乙醇溶液以2 BV/h的流速洗脱。工艺纯化后的纯度提高至69.36%,且对1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH)和2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid,ABTS)自由基半数清除率IC50值分别为0.215 mg/m L和0.544 mg/mL,明显高于粗黄酮的1.06 mg/mL和1.717 mg/mL。

甲状腺激素对大鼠脊髓损伤神经元的保护作用

目的探讨甲状腺激素对脊髓损伤神经元的保护作用及其分子机制。方法用含体积分数10％胎牛血清的杜尔伯科改良伊格尔（DMEM）培养基培养RN-dsc大鼠背脊神经元细胞，经胰蛋白酶消化转代后接种在培养板中并用不同条件进行处理：（1）对照组：用不含药物和血清的DMEM处理；（2）H202组：用含有100ixmol／LH202的无血清DMEM处理；（3）H202＋10^-6mol／L三碘甲状腺原氨酸（T3）组：用含有100μmol／LH20：和10μmol／LT3的无血清DMEM处理；（4）H202＋10^-5mo／／LT3组：用含有100μmol／LH202和10^-5mol／LT3的无血清DMEM处理；（5）阴性对照组：用Lipofectamine 2000试剂转染阴性对照模拟物；（6）miR-210组：用Lipofectamine 2000试剂转染miR～210模拟物。检测增殖细胞各组活力、凋亡数目、核因子E2相关因子2（Nrf-2）抗氧化通路分子等的表达量、miR-210的表达量；转染miR-210模拟物及阴性对照模拟物后检测Nrf-2抗氧化通路分子的表达量。结果H：0：组细胞的增殖活力及NIf-2、抗氧化反应元件（ARE）、超氧化物歧化酶2（SOD2）、血红素氧合酶（HO-1）的蛋白表达量（0．39±0．06，0．52±0．08，0．31±0．08，0．25±0．05）显著低于对照组（1．00±0．15，1．00±0．17，1．00±0．13，1．00±0．11）（P〈0．05），凋亡数目及miR-210的表达量多于对照组（P〈0．05）。H20：＋10^-6mol／LT3组、H20：＋10。mol／LT3组细胞的增殖活力及Nrf-2、ARE、SOD2、HO-1的蛋白表达量显著高于H202组（P〈0．05），凋亡数目及miR-210的表达量低于H：02组（P〈0．05）。H202＋10。mol／LT3组细胞的增殖活力及Nrf-2、ARE、SOD2、HO-1的蛋白表达量（0．88±0．14，0．84±0．12，0．72±0．09，0．69±0．09）显著高于H202＋10^-6mol／LT3组（0．73±0．09，0．714-0．08，0．58±0．09，0．52±0．08）（P〈0．05），凋亡数目及miR-210的表达量低于H：0：＋10^-6mol／LT3组（P〈0．05）。miR-210组细胞中Nrf-2、ARE、SOD2、HO-l的蛋白表达量（0．37±0．06，0．24±0．05，0．45±0．08，0．49±0．07）显著低于阴性对照组（1．00±0．13，1．00±0．19，1．00±0．15，1．00±0．14）（P〈0．05）。结论甲状腺激素能够通过抑制miR-210的表达来增强神经元氧化应激损伤过程中Nrf-2抗氧化通路的功能，进而减轻脊髓神经元的氧化应激损伤。

1型血小板反应蛋白7A域检测在特发性膜性肾病中的应用研究进展

特发性膜性肾病是临床上常见的导致成人肾病综合征的临床病理类型,目前已经发现抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体是导致特发性膜性肾病的主要抗体,但近年发现的1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A)抗体是导致特发性膜性肾病的另一个主要抗体,而且目前研究发现与PLA2R抗体相关的特发性膜性肾病患者相比,THSD7A抗体相关的特发性膜性肾病有其自身的临床和病理特点。本文主要从THSD7A的结构特点、检测方法,以及在特发性膜性肾病患者的临床应用进行主要综述。