二甲基肼诱导昆明小鼠大肠癌的研究

随着大肠肿瘤发病率的逐年升高,大肠癌的化学预防已成为目前肿瘤学领域的研究热点.在防治研究中,常常应用动物模型进行具体防治措施的效果验证.本研究应用二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)诱发昆明小鼠大肠癌实验,旨在探索一种比较经济实用的用于大肠癌研究的动物模型.

丁酸钠抑制二甲基肼诱发小鼠大肠癌的实验研究

背景与目的:体外研究证实丁酸钠能促进多种肿瘤细胞分化,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。本研究给予小鼠直肠内灌注丁酸钠,旨在观察丁酸钠对二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)诱发的昆明种小鼠大肠癌的预防作用。方法:选择昆明种小鼠为实验对象,模型组以DMH30mg/kg,皮下注射,每周一次,连续给药11周。实验组分别以1.25×10-3mol/kg、2.5×10-3mol/kg丁酸钠溶液,直肠灌注,每天一次,连续24周。分别于给药后第12周、18周和24周分3个阶段处死小鼠。观察肿瘤的发生率,以及2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组小鼠的一般状态、体重增长、肝肾功能、以及肝、肾、肺、胰腺等病理变化。结果:实验12周各组小鼠未见肿瘤发生;18周时,模型组小鼠肿瘤发生率为58.3%(7/12),1.25×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为25.0%(3/12),2.5×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为0(0/12),各组相比差异有显著性(P<0.01);实验24周结果,模型组小鼠肿瘤发生率为95.0%(19/20),1.25×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率45.0%(9/20),2.5×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为15.0%(3/20),各组间有显著性差异(P<0.01)。单纯2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组和生理盐水对照组均未发现肿瘤。单纯2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组小鼠一般状态良好,体重增长及肝、肾功能均与生理盐水灌肠组无显著性差异(P>0.05),肝脏、肾脏、胰腺等重要脏器未见病理性改变。结论:丁酸钠能够抑制DMH诱发的实验性小鼠大肠癌的发生和发展,并且无明显毒副作用发生。

胎儿体格及脏器发育状况的研究

作者对128例不同胎龄胎儿的身高、体重和132例不同胎龄胎儿的肝、脾、胸腺、胰重量和体积共十项指标进行了测量.结果表明,孕14～36周胎儿十项指标均随胎龄的增长而增加.身高、体重及肝、脾、胸腺、胰重量与胎龄呈正相关,以身高、体重与胎龄的相关尤为显著.胎儿的生长发育有明显的阶段性,胎儿身高、体重于妊娠24及34周各有一次生长高峰,四个脏器均于妊娠26周出现一次生长高峰.本文结果为衡量不同胎龄胎儿在宫内的生长发育提供了参考标准.

二甲基肼诱发小鼠结直肠癌形成过程中增殖与凋亡的研究

目的研究增殖-凋亡失衡在结直肠癌发生过程中的作用,并探讨其动态变化的分子机制。方法以二甲基肼诱发昆明小鼠结直肠癌。分别于给药后第1 2,1 8,2 4周处死动物,观察各时点模型组及对照组小鼠结直肠黏膜的病理变化。多阶段动态观察增殖细胞和凋亡细胞的分布和程度;并分别应用RT-PCR,免疫组化和W estern blot检测小鼠结直肠黏膜组织中p 2 1waf1,GADD 4 5和Bax的表达。结果诱癌过程中,模型组小鼠结直肠黏膜上皮依次出现轻、中、重度不典型增生、腺瘤和腺癌。模型组结直肠非癌黏膜各时点的PCNA表达明显高于对照组(P<0.0 1);从正常黏膜→不典型增生→腺瘤→癌,PCNA表达逐渐增高,至癌阶段PCNA表达明显增强,各组间比较差异均有显著性(P<0.0 1)。模型组结直肠在从正常黏膜至癌的演变过程中,增殖与凋亡的比值逐渐增高,差异有显著性(P<0.0 1);模型组结直肠黏膜在从正常黏膜至腺瘤的过程中,p 2 1waf1,GADD 4 5和BaxmRNA表达和蛋白表达均逐渐增强;而癌组织中,3种基因的表达水平明显减弱。结论在二甲基肼诱发的昆明小鼠结直肠癌的发生过程中,结直肠黏膜存在着增殖与凋亡的失衡;p 2 1waf1,GADD 4 5和Bax 3种抑癌基因与结直肠癌的发生有关。

慢性化脓性中耳炎的综合治疗研究

目的 :分析碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactors ,bFGF)在修复慢性化脓性中耳炎鼓膜穿孔中的作用。方法 :回顾分析经乳突X线片或CT、MRI及纯音测听等临床检测诊断为慢性化脓性中耳炎 6 5例、82耳的临床资料 ,4 0耳用bFGF配合治疗与 4 2耳未用bFGF治疗作为对照。结果 :bFGF治疗组4 0耳中鼓膜完全愈合 31耳 ,治愈率 77.5 0 % ,对照组 4 2耳中鼓膜完全愈合 2 4耳 ,治愈率 5 7.14 %。两组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。治疗组 31耳完全愈合平均所需时间为 31.9d ,对照组 2 4耳完全愈合平均所需时间为4 5 .5d(P <0 .0 5 )。结论 :bFGF有助于修复炎症性鼓膜穿孔 ,能提高治愈率 ,并可加速愈合 ,缩短修复时间。

烧伤创面活组织细菌计数的研究

本实验通过检查创面上活组织的细菌含量的方法,验证湿润暴露疗法的局部实际抗感染能力,实验结果表明,该疗法在全疗程中,均有效地控制创面活组织的细菌量在10~3个/每克,具有较强的预防感染和抗感染能力。

胎肝细胞悬液和上清液对急性肝衰竭疗效比较的实验研究

我们通过动物实验比较了胎肝细胞悬液和上清液对急性肝损伤的作用,现将结果报告如下。1.材料和方法:取16～24周水囊引产胎儿的肝脏。

白细胞流变性的动态图像研究及半定量分析

目的 探讨一种判断人体白细胞流变性的新方法。方法 采取指尖微量血,应用布氏镜(多功能可变投射显微镜)和动态数字成像技术,对活体白细胞进行动态图像扫描,设定粒细胞形态结构、变形运动、胞浆及颗粒运动三项指标,以三项指标积分及三项指标积分总值作为判断人体白细胞流变性的客观指标;对12 0例正常人按不同年龄及不同性别分组进行检测,并进行统计学处理,确定正常参考值。结果 用多功能显微镜直观、动态地观察到显示白细胞流变学的特征:形态结构、伪足形成、颗粒运动、胞质环流及变形运动;白细胞流变性三项指标积分及总积分别为2 .917±0 .30 6、2 .4 33±0 .4 98、3.0 4 2±0 4 18和8.392±0 .792 ;不同年龄组、不同性别无显著差异;总积分正常参考值为8.2 4 9～8.6 35。结论 建立了一种快速判断白细胞流变性的动态细胞学检测手段,提出观察指标、判断标准和半定量计分方法;方法简便,直观,易被病人接受。

某软膏微量元素含量与其药理作用的实验研究

[目的 ]探讨某软膏中微量元素的含量与其药理作用。 [方法 ]取某软膏提取液 ,用WFX ID型分光光度计检测9种微量元素含量 ;采用小鼠扭体法、二甲苯致炎法进行该软膏的止痛和消炎作用的实验观察 ;用平板打洞法进行该软膏的体外抑菌试验 ;复制豚鼠的烫伤模型进行该软膏的创面愈合试验。 [结果 ]某软膏中锌、铜、铁、镁、锰、硒等人体必须微量元素含量丰富 ;该软膏可明显降低小鼠的扭体次数 ,减轻小鼠耳的炎性肿胀 ;对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌的抑菌环分别为 1 3 50 ,1 5 62 ,1 0 60mm ;可促进创面愈合。 [结论 ]该软膏具有良好的止痛、消炎、抑菌和促进创面愈合的作用 。

肿瘤免疫治疗的实验研究

肿瘤抗原是多年来的研究热点，近年随着基因转移技术逐渐成熟，已可将多种外源基因转入肿瘤细胞，利用这种经外源性基因修饰的肿瘤细胞作为疫苗，以期能有效地激活或增强机体的抗肿瘤免疫应答。但目前该项技术还不完善，有许多困难有待解决。

胎儿垂体组织体外培养后激素分泌水平的研究

将水囊引产胎儿的垂体组织进行体外培养，用放射免疫分析方法测得培养２～２１天的培养液中均含有生长激素（ＧＨ）、催产激素（ＰＲＬ）、黄体生成素（ＬＨ）、卵泡刺激素（ＦＳＨ）、促甲状腺激素（ＴＳＨ）５种垂体激素，说明垂体组织体外培养可以存活，并具有分泌功能。由于培养后的组织抗原表达减弱。

利咽喷剂抗流感及腺病毒实验研究

目的探讨利咽喷剂对甲、乙型流感病毒及腺病毒4型的抗病毒作用。方法采用固定药液稀释病毒进行鸡胚尿囊腔注射法及单层细胞病变抑制法对其进行抗病毒实验。结果①甲、乙两型流感病毒对照组半数感染量(EID50)的差数均大于5,反对数大于50;②对甲、乙型流感病毒及腺病毒4型的抑制指数(TI)分别为2、2、1.9。结论利咽喷剂对甲型流感病毒,乙型流感病毒,腺病毒4型均有不同程度的抑制作用。

支气管哮喘细胞免疫及免疫治疗的研究

哮喘是一种常见的呼吸道变态反应性疾病,为观察该病细胞免疫及病因分型免疫治疗的疗效,我们于1987～1990年对我院门诊及住院43例病儿进行了研究,现总结如下。临床资料一、研究方法(1)哮喘病儿组检测外周血T淋巴细胞亚群(采用AP AAP桥联酶标法)24例,男女各12例。健康儿童组52例,男27例,女25例。

丁酸钠对大肠癌HT-29细胞形态及其生长曲线的影响

目的观察体外培养的HT-29细胞在丁酸钠作用后形态学及生长曲线的变化。初步探讨丁酸钠对结肠癌细胞的凋亡诱导作用。方法利用相差显微镜、可变投射显微镜、电镜观察细胞形态学变化,MTT法检测HT-29细胞生长情况。结果丁酸钠作用后的HT-29细胞形态发生改变,表现为细胞体积变小、形状变圆,细胞核固缩,脱壁细胞逐渐增多,细胞膜突起减少,核内染色质呈团块状积聚于核膜下,并可见凋亡小体。丁酸钠2.5、5和10mM对HT-29细胞生长均有抑制作用,并呈浓度、时间依赖性。结论细胞形态学的变化初步显示了丁酸钠对结肠癌细胞具有凋亡诱导作用。

血清PⅢP、PCⅢ、HA、LN和PE测定在实验性肝纤维化诊断与疗效考核中的意义

用四氯化碳造成大鼠实验性肝纤维化模型,动态观察了其血清PⅢP,PCⅢ、HA、LN和PE的变化,在此基础上,又用汉防已甲素对大鼠进行治疗,并观察上述指标的变化,结果发现,随着肝纤维化程度的加深,上述五种指标也随之升高,且与肝纤维化积分成显著正相关,相关系数分别为0.75、0.89、0.91、0.67与0.96,P<0.05～0.01。经抗肝纤维化治疗后,上述指标也随之下降。研究提示,血清PⅢP、PCⅢ、HA、LN和PE测定可作为肝纤维化诊断与疗效考核的指标。

丁酸钠诱导HT-29结肠癌细胞凋亡及其对p53靶基因的调控

目的:分析丁酸钠对HT-29结肠癌细胞p53三个主要靶基因(p21waf1,bax和gadd45)的调控,并探讨其作用机制。方法:HT-29细胞常规培养在含有和不含有丁酸钠的培养液中。分别用MTT和流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞增殖和细胞周期分布,通过形态学观察、亚G1峰的检测和AnnexinV-FITC双标记观察细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot分别检测丁酸钠对p21waf1,bax和gadd45三种基因mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:丁酸钠以剂量和时间依赖的方式抑制HT-29细胞增殖和诱导凋亡,并阻滞细胞于G1期。RT-PCR和Western blot结果显示丁酸钠可以促进p21waf1和bax基因mRNA和蛋白的表达,而对gadd45基因的表达无明显影响。结论:2.5mmol/L以上浓度的丁酸钠可以抑制HT-29细胞增殖并诱导凋亡,该作用可能通过上调p21waf1和bax基因表达而实现。