E2F2在类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞中的表达研究

目的研究E2F2在类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞(RA FLs)中的表达,分析其表达与类风湿关节炎病理特征的关系,以及调控E2F2表达的机制。方法采用瞬时转染的方法将E2F2 siRNA转染入RA FLs后,应用RT-PCR法筛选干扰效率最高的siRNA,并应用MTS法检测干扰E2F2表达后对RA FLs增殖的影响,采用ELISA法检测E2F2下游基因表达的变化。采用RT-PCR法检测分别使用TNF-α和PDTC刺激RA FLs以及共同使用TNF-α和PDTC刺激RA FLs后E2F2的表达。通过染色质免疫沉淀法(Ch IP)检测调控E2F2表达的方式。结果在si E2F2后,与对照组相比E2F2在mRNA水平表达显著降低(P<0.01),细胞增殖能力减弱(P<0.05)。在RA FLs中TNF-α通过NF-κB信号通路调控E2F2表达。结论在RA FLs中E2F2存在高表达现象,并且E2F2的高表达参与RA的病变过程,TNF-α通过NF-κB信号通路调控E2F2表达,可做为治疗类风湿关节炎的新靶点。