lncRNA MIR205HG通过调控miR-122-5p促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法:RT-PCR检测食管鳞状细胞癌组织以及癌旁组织中MIR205HG的表达量;CCK-8实验检测MIR205HG对食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10增殖的影响;Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-1和MMP-9以及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平。结果:结果显示,MIR205HG在食管鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁组织的表达量(P<0.05);与转染对照si-RNA相比,当细胞转染si-MIR205HG时,MIR205HG的表达量显著被抑制(P<0.05);干扰MIR205HG显著抑制食管鳞状细胞癌细胞Eca-109和TE-10的增殖和侵袭(P<0.05);此外,si-MIR205HG促进miR-122-5p的表达,且MIR205HG与miR-122-5p表达量呈负相关(P<0.05);进一步的研究结果表明,抑制miR-122-5p逆转si-MIR205HG对TE-10细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论:MIR205HG能够促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制是通过调控miR-122-5p来实现的,这一结果能够为食管鳞状细胞癌的临床治疗和诊断提供分子基础。

白头翁皂苷B4调控去乙酰化酶6对胃癌细胞转移和放疗敏感性的影响

目的 探讨白头翁皂苷B4(AB4)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及放疗敏感性的影响及其分子机制。方法 该研究起止时间为2018年4月至2019年10月。体外培养人正常胃黏膜上皮细胞GES-1与胃癌细胞HGC-27,采用不同浓度(25、50、100μmol/L)的AB4处理24 h,通过MTT法检测细胞存活率并筛选AB4适宜浓度用于后续研究。Transwell实验检测HGC-27细胞迁移及侵袭能力。细胞克隆形成实验检测AB4对HGC-27细胞放射敏感性的影响;蛋白质印迹法检测AB4对HGC-27细胞中去乙酰化酶6(SIRT6)蛋白表达的影响;干扰SIRT6表达联合AB4处理后,采用上述检测方法检测HGC-27细胞增殖、迁移、侵袭及放射敏感性;蛋白质印迹法检测DNA激活蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)、DNA双链修复蛋白Rad51、DNA修复酶Ku80、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平。结果 与NC组相比,AB4处理后HGC-27细胞存活率[(100.01±9.57)%比(86.57±6.58)%、(65.45±8.45)%、(49.58±7.96)%]显著降低(P<0.05),迁移细胞数[(98.47±8.79)个比(43.57±6.53)个]与侵袭细胞数[(88.42±9.32)个比(45.56±5.13)个]显著减少(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SIRT6蛋白表达水平(0.42±0.03比1.03±0.15)显著升高(P<0.05);细胞克隆形成实验显示AB4可降低HGC-27细胞存活分数(P<0.05),增加增敏比,降低Rad51、DNA-PKcs、Ku80的表达水平(P<0.05);干扰SIRT6表达联合AB4处理后,迁移细胞数[(44.25±5.52)个比(86.47±11.16)个]与侵袭细胞数[(48.56±6.29)个比(90.17±12.13)个]显著增多(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),细胞存活分数显著升高(P<0.05),Rad51、DNA-PKcs、Ku80蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 白头翁皂苷B4能够通过促进SIRT6的表达进而发挥抑制胃癌细胞HGC-27增殖、迁移及侵袭的作用,并增加胃癌细胞的放射敏感性。

五苓散加味治疗水湿困脾鼓胀验案一则

撷取1则临床验案,动态分析水湿困脾型鼓胀的治疗过程。治疗中围绕水湿困脾的病机,采用益气健脾、利水渗湿为基本治法,方用五苓散加味。结合患者症状、体征、辅助检查的变化,尤其是当出现上消化道出血采取切脾手术后,以五苓散加味辨证施治,灵活遣药。应对患者病情进展变化,分析临床思维变化的过程,益气健脾、利水渗湿贯穿治疗始终;当患者出现吐血,适当给予收敛止血、制酸止痛的药物;脾切除术后,患者气血亏虚,更加注重在健脾益气补血的基础上进行利水渗湿。《素问·至真要大论篇》言:“诸湿肿满,皆属于脾。”临床诊治应重视培土制水理论,以健脾利湿为核心治法,疏调脾胃升降气机,恢复脾运化水湿的生理功能,如此则水湿易去,病情有向愈之机。

血管生成素1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨血管生成素1(ANGPT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法收集40例NSCLC患者肿瘤组织及癌旁组织、NSCLC细胞系(A549、HCC827、H460和H1299)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)行研究检测。转染ANGPT1真核表达质粒至A549细胞(pc-ANGPT1组),设定空载表达质粒转染空载组(pcDNA组)和空白对照组(Control组)。反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测ANGPT1基因信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。细胞计数(CCK-8)检测细胞吸光度,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移及侵袭。两组间比较行t检验,多组间比较采用单因素方差分析(组间比较采用SNK检验)。结果NSCLC患者肿瘤组织ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织(mRNA表达为0.17±0.04比1.03±0.05,蛋白表达为0.27±0.06比0.83±0.07),差异有统计学意义(t=24.145、19.381,P<0.05)。A549、HCC827、H460和H1299细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于BEAS-2B细胞(mRNA表达为0.11±0.03、0.32±0.06、0.28±0.03、0.37±0.06比1.05±0.08,蛋白表达为0.23±0.02、0.29±0.05、0.27±0.04、0.35±0.05比0.79±0.06),差异有统计学意义(F=15.447、13.516,P<0.05)。pc-ANGPT1组A549细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达、细胞凋亡率显著高于pcDNA和Control组[ANGPT1基因mRNA为4.24±0.13比1.01±0.05、1.02±0.04,ANGPT1基因蛋白为1.14±0.08比0.25±0.04、0.24±0.04,细胞凋亡率为(19.27±3.65)%比(3.89±0.78)%、(3.82±0.81)%],48、72、96 h细胞吸光度、细胞迁移数及侵袭数显著低于pcDNA和Control组[48 h吸光度值为0.36±0.05比0.49±0.07、0.52±0.06,72 h吸光度值为0.47±0.07比0.73±0.08、0.79±0.07,96 h吸光度值为0.61±0.08比0.97±0.11、1.03±0.09,细胞迁移数为(60.34±9.42)个比(122.73±12.59)、(121.25±14.16)个,细胞侵袭数为(29.84±5.37)个比(75.31±8.65)、(78.29±8.90)个],差异有统计学意义(F=34.166、21.542、29.942、8.929、11.375、13.983、31.135、24.567,P<0.05)。结论ANGPT1基因在NSCLC中呈低表达,可促进NSCLC细胞凋亡并抑制增殖、迁移及侵袭。

做碳13呼气试验应注意什么?

我患有慢性胃炎多年,最近总感到胃胀、胃痛,去医院检查时医生建议做碳13呼气试验。请问,这是什么试验?需要注意些什么呢?江苏张家港安小敏研究证实,幽门螺杆菌是引起消化性溃疡、胃癌、慢性胃炎、消化不良等疾病的常见原因之一,而碳13呼气试验是临床上评价幽门螺杆菌感染情况最方便和有效的检查手段,其准确性仅次于细菌培养。