神经外科气管切开患者的营养支持

目的探讨神经外科气管切开患者营养支持与护理的方法。方法30例神经外科气管切开患者早期(发病后48～72h)即开始实施肠内营养,并逐渐加量,不足部分由肠外营养补充;同时加强患者基础护理。结果本组治愈26例,死亡4例,无严重腹泻、腹胀、皮肤完整性损伤及呼吸道感染等并发症。结论神经外科气管切开患者注重营养支持治疗和基础护理,可提高患者救治成功率,降低并发症和病死率。

自身免疫病患者增殖诱导配体基因mRNA表达水平的研究

目的建立检测增殖诱导配体（a proliferation—inducing ligand，APRIL）mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法，了解系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）等自身免疫病患者外周血单个核细胞（PBMC）中APRIL的表达水平及其与自身免疫性疾病发病机制、预后之间的关系。方法构建克隆载体pGEM—TEasy—APRIL作为定量模板，定量检测58例自身免疫病（SLE、RA）确诊病人和20例健康献血者的外周血APRIL mRNA表达量，以APRIL mRNA和内参GAPDH mRNA表达量的比值作为APRIL表达水平的指标。结果自身免疫病患者的APRIL mRNA表达范围3．95～192．0，均值为29．68±4．5。20例正常对照者APRIL mRNA的表达范围3．1-18．7，均值为10．56±2．0。自身免疫病患者APRIL mRNA的表达水平高于正常对照组；久治不愈或疗效差者APRIL mRNA表达水平显著高于初发患者及治疗后缓解患者，但后两组差异无显著性意义。结论自身免疫性疾病（SLE、RA）患者的APRIL mRNA表达水平升高，疗效差、久治不愈患者表达水平更高。

增殖诱导配体在自身免疫病患者外周血中的表达

为检测增殖诱导配体(APRIL)在自身免疫病(SLE和RA)患者中的表达情况以及它与B细胞刺激因子(BAFF)表达、疾病预后、抗-dsDNA抗体之间的相关性。收集58名自身免疫病患者以及20名健康对照的外周血,用实时定量RT-PCR方法检测PBMC中APRIL和BAFF mRNA的表达,用ELISA方法检测血浆中APRIL和BAFF蛋白水平。同时,检测血浆中IgG、IgA、IgM、BF和抗-dsDNA抗体水平。结果同对照组相比,APRIL mRNA水平在自身免疫病患者中显著升高,与BAFF mRNA表达水平有相关性。与疾病初发组和治疗后缓解组相比,治疗后来缓解组患者APRIL mRNA表达显著升高。疾病组外周循环中BAFF蛋白显著升高,APRIL蛋白未见升高,APRIL和BAFF之间未见显著意义相关性,A-PRIL蛋白与抗-dsDNA和疾病活动度之间未见显著相关。检测APRIL mRNA含量是判断自身免疫病患者治疗情况和疾病预后的有用指标。循环中APRIL和BAFF蛋白的产生可能受到不同机制调节,在自身免疫病的发生、发展以及转归中所起的作用也不同,为研究APRIL的产生机制、表达水平和自身免疫病程度、早期诊断、预后等的关系打下基础。

人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白制备和纯化

目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆菌落,通过制备一级及二级种液,按比例加入5L发酵罐中进行发酵,发酵过程中在菌体起始密度、诱导剂加入时机、诱导时间以及诱导温度等条件探索成熟的基础上,采用50L大型发酵罐进行批量发酵。所获菌体蛋白通过饱和硫酸铵粗提和Ni-NTA金属螯和层析获得较纯的表达产物,比较表达量,鉴定纯化后蛋白的抗原活性及生物学活性。结果:用5L及50L发酵罐能获得较高蛋白产量的大肠杆菌,经饱和硫酸铵粗提及Ni-NTA金属螯和层析纯化后可获得抗原性及生物学活性较好的抗体片段。结论:发酵罐发酵大肠杆菌,产量高,所获蛋白含量活性较稳定,为批量生产作了准备。