从炎症机制探讨Notch通路抑制剂对小鼠脑缺血模型的神经保护作用

目的探讨Notch通路抑制剂对小鼠脑缺血模型的神经保护作用。方法78只成年BALB/c小鼠按简单随机抽样方法分为Sham组、二甲基亚砜(DMSO)组、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组,每组26只;线栓法制作小鼠脑缺血模型,其中Sham组小鼠接受相同手术,但未插入缝线;DAPT组小鼠在大脑中动脉闭塞前3h腹腔注射DAPT溶液(5 mL·kg^(-1)),Sham组、二甲基亚砜(DMSO)组小鼠注射等剂量DMSO溶液,将Longa评分1~3分的小鼠作为实验小鼠;应用尼氏染色及TUNEL/NeuN免疫荧光双标染色鉴定右额叶皮质神经元,免疫荧光检测缺血半脑右半脑皮质Notch1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞,Westermblot检测缺血半脑右半脑皮质Hes1蛋白、Hes5蛋白表达,透射电镜观察各组右额叶皮质神经元超微结构变化,ELISA检测右前额叶皮质白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平。结果与Sham组比较,DMSO组、DAPT组皮质神经元存活数显著下降,皮质神经元凋亡数显著上升(P<0.05);与DMSO组比较,DAPT组皮质神经元存活数显著上升,皮质神经元凋亡数显著下降(P<0.05);与Sham组比较,DMSO组缺血半脑右半脑皮质Notch1、GFAP阳性细胞数显著上升(P<0.05),DAPT组缺血半脑右半脑皮质Notch1、GFAP阳性细胞数显著下降(P<0.05),DAPT组缺血半脑右半脑皮质Notch1、GFAP阳性细胞数显著低于DMSO组(P<0.05);与Sham组比较,DMSO组、DAPT组右半脑皮质Hes1蛋白、Hes5蛋白表达显著高于Sham组(P<0.05),DAPT组右半脑皮质Hes1蛋白、Hes5蛋白表达显著低于DMSO组(P<0.05);Sham组小鼠梗死周围皮质神经元超微结构正常,线粒体内外嵴结构正常;DMSO组小鼠神经元细胞核形状欠规则,核膜欠清晰,核周间隙扩大,染色质欠均匀呈聚集状,胞质内可见空泡,线粒体肿胀,线粒体内外嵴被破坏;DAPT组神经元超微及线粒体内外嵴结构接近正常;与Sham组比较,DMSO组、DAPT组右前额叶皮质IL-6、TNF-α因子水平显著上升(P<0.05),但DAPT组右前额叶皮质IL-6、TNF-α因子水平显著低于DMSO组(P<0.05)。结论Notch通路抑制剂的应用可阻断脑缺血后Notch信号通路传导,通过抑制Notch1及其下游Hes1蛋白、Hes5蛋白表达,下调IL-6、TNF-α水平来发挥神经元保护作用,值得临床重视。

PCI术后肺部感染miR-5787、miR-146a及miR-133表达及其与炎症、凝血纤溶因子的关系

目的探究微小核糖核酸(miR)-5787、miR-146a及miR-133在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后肺部感染患者中表达水平及其与机体炎症、凝血纤溶因子水平的关系.方法将济南市第四人民医院2021年7月—2023年7月收治的131例冠心病PCI患者术后发生肺部感染和未发生肺部感染的患者分别纳入感染组(26例)和非感染组(105例);比较两组miR-5787、miR-146a、miR-133及机体炎症、凝血纤溶因子水平;采用Pearson分析miR-5787、miR-146a、miR-133与机体炎症、凝血纤溶因子的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-5787、miR-146a、miR-133对冠心病PCI患者术后肺部感染的诊断价值.结果感染组血清miR-5787、miR-146a、miR-133、E选择素、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、C-反应蛋白(CRP)及血浆纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、组织纤溶酶原抑制物(PAI)、血管性血友病因子(vWF)水平高于非感染组(P<0.05),抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)水平低于非感染组(P<0.05);miR-5787、miR-146a、miR-133与E选择素、TNF-α、IL-6、CRP、FIB、D-D、PAI、vWF水平呈正相关(P<0.05),与AT-Ⅲ水平呈负相关(P<0.05);miR-5787、miR-146a、miR-133联合检测诊断冠心病PCI患者术后肺部感染曲线下面积(AUC)值高于各项单一检测(P<0.05),且联合检测敏感度为96.15%,特异度为80.00%.结论冠心病PCI术后肺部感染患者miR-5787、miR-146a、miR-133、机体炎症、凝血纤溶系统表达异常;miR-5787、miR-146a、miR-133与机体炎症、凝血纤溶因子有相关性,且三者联合检测可提高冠心病PCI患者术后肺部感染的诊断价值.

多发性创伤骨折术后切口感染泛耐药铜绿假单胞菌T3SS相关毒力基因表达

目的探讨多发性创伤骨折术后切口感染泛耐药铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)毒力相关基因表达。方法选取2016年1月-2021年1月济南市第四人民医院203例多发性创伤骨折术后切口感染患者,通过常规微生物检验分离培养病原菌,采用聚合酶链式反应(PCR)技术对铜绿假单胞菌进行鉴定与分型,纸片扩散法测定抗菌药物敏感性。结果203例多发性创伤骨折术后切口感染患者共培养分离病原菌242株,其中革兰阴性菌181株占74.79%,革兰阳性菌61株占25.21%;共培养分离铜绿假单胞菌82株,检出T3SS阳性铜绿假单胞菌69株(84.15%);T3SS阴性菌株对头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、亚胺培南、环丙沙星的耐药率均高于T3SS阳性菌株(P<0.05);69株T3SS阳性菌株4种T3SS毒力基因中以exoT和exoY检出率最高,分别为84.06%(58/69)、81.16%(56/69),exoU-/exoS+基因型组合检出率最高,占63.77%(44/69),其次为exoU+/exoS-的26.09%(18/69),exoU-/exoS+基因型组合检出率高于exoU+/exoS-(P<0.05);exoU+/exoS-基因型对环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星的耐药率高于exoU-/exoS+基因型(P<0.05)。结论T3SS阳性菌株中以exoU-/exoS+检出率最高,其次为exoU+/exoS-,exoU+/exoS-基因型对环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星的耐药率高于exoU-/exoS+基因型。