应用于缺血缺氧性脑病治疗的神经干细胞移植：现实与未来

背景:很多研究都揭示神经干细胞移植是治疗缺血缺氧性脑病的新方法。目的:就神经干细胞移植治疗缺血缺氧性脑病的现状、移植策略以及发挥作用的可能机制等方面做一系统的归纳分析。方法:检索2000年8月至2013年8月PubMed数据库及中国知网数据库有关神经干细胞移植及缺血缺氧性脑病等方面的文献,英文检索词为"Hypoxic-ischemic encephalopathy,neural stem cells",中文检索词为"缺血缺氧性脑病,神经干细胞"。排除与研究目的无关和内容重复者,保留39篇文献做进一步分析。结果与结论:神经干细胞移植能在一定程度上缓解缺血缺氧导致的神经功能的障碍,起到一定的治疗作用,给缺血缺氧性脑病患者带来新希望。但是该研究还处于实验室研究阶段,影响移植的一些关键因素,如:移植途径、时间、单纯或联合移植以及移植的细胞发挥作用的机制等还不明确,还有待科学实验来予以验证。

肝衰竭患者血浆置换前后血清诱导脐带间充质干细胞向肝细胞的分化

背景:脐带间充质干细胞治疗肝衰竭已经取得了一定的疗效,但是肝衰竭患者的血清微环境对脐带间充质干细胞分化的影响尚未见报道。目的:探讨慢加急性肝衰竭患者血浆置换前、后血清对脐带间充质干细胞向功能肝细胞分化的影响。方法:采用组织块贴壁培养法获得脐带间充质干细胞并进行细胞形态及表型鉴定;取第3代脐带间充质干细胞,用含有肝衰竭患者血浆置换前、后血清的α-MEM培养基诱导培养,常规胎牛血清培养基为对照组,显微镜下观察各组细胞的形态,免疫组化检测细胞甲胎蛋白、白蛋白和细胞角蛋白18的表达水平。结果与结论:(1)组织块贴壁培养法能够获得大量高纯度的脐带间充质干细胞,细胞高表达CD44,CD73,CD90,CD105,不表达CD45,符合间充质干细胞的表型特征;(2)慢加急性肝衰竭患者血清可改变脐带间充质干细胞的形态,并诱导脐带间充质干细胞表达甲胎蛋白、白蛋白和细胞角蛋白18。血浆置换后血清组3种蛋白阳性率高于血浆置换前血清组,差异有显著性意义(P<0.05);(3)结果表明,肝衰竭患者血浆置换后血清更加有利于脐带间充质干细胞生长及向肝细胞分化。

α-半乳糖神经酰胺负载DC促进CIK细胞对肝癌细胞的杀伤效应

目的:研究负载α-半乳糖神经酰胺(alpha-galactosylceramide,α-Gal Cer)的DC功能与成熟度的改变情况,探讨α-Gal Cer-DC与CIK共培养对CIK细胞表型、增殖活性及杀伤肝癌细胞效率的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血中分离出单个核细胞,悬浮细胞诱导培养CIK细胞,贴壁细胞诱导培养DC;流式细胞仪检测α-Gal Cer负载DC的表型,Real-time PCR检测DC相关基因的mRNA表达改变。将α-Gal Cer-DC与CIK细胞共培养,流式细胞仪检测DC与CIK细胞表面标志物;锥虫蓝染色法检测CIK细胞的增殖倍数;Real-time PCR检测CIK细胞功能相关基因的表达情况;CCK-8试剂盒检测α-Gal Cer-DC对CIK杀伤Hep G2细胞的影响。结果:经过多种细胞因子诱导,可获得CIK细胞和成熟的DC;α-Gal Cer负载可促进DC成熟,DC表面标志物CD80、CD86、CD83和CD11c的阳性率均升高(P<0.05或P<0.01),表面趋化因子受体CCR-7、IL-12、IL-10的mRNA水平升高(P<0.05)。α-Gal Cer-DC与CIK共培养,可显著提高CIK细胞CD3+CD56+的表达和增殖活性(P<0.05或P<0.01),并显著提高INF-γ、IL-12、穿孔素和颗粒酶素B的mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01);CIK、DC-CIK、α-Gal Cer-DC-CIK细胞对Hep G2细胞的杀伤作用随效靶比的升高而增强,在同一效靶比时α-Gal Cer-DC-CIK细胞对靶细胞的杀伤作用最强(P<0.05)。结论:α-Gal Cer负载可促进DC成熟,α-Gal Cer-DC与CIK共培养能促进后者增殖和成熟,能显著增强其对肝癌细胞的杀伤活性,为DC-CIK在肿瘤免疫治疗中的应用提供了实验依据。

人脐带间充质干细胞对宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法分离培养脐带MSCs,将MSCs或其条件培养基与宫颈癌细胞Hela共培养,生长曲线、集落形成实验及RT-PCR分别检测MSCs细胞或条件培养基对Hela细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。结果生长曲线结果显示,MSCs细胞及条件培养液可抑制Hela细胞增殖,并呈现一定的浓度依赖性。集落形成实验结果显示,MSCs条件培养液可抑制Hela细胞集落形成能力;RT-PCR结果显示,MSCs条件培养基促进Hela细胞P53、Bax及caspase-3基因表达,下调Bcl-2及survivin表达。结论 MSCs体外可促进宫颈癌细胞凋亡,抑制Hela细胞增殖。