知母皂苷Ⅱ对老龄大鼠学习记忆行为及海马区神经元的影响

目的本实验研究知母皂苷BⅡ(Timosaponin B-Ⅱ,TB-Ⅱ)对自然衰老大鼠学习记忆能力的改善及海马区神经元的保护作用。方法 SD大鼠老年对照组(15只)、青年大鼠对照组(15只)、TB-II 1 mg/kg组(15只)、TB-II2 mg/kg组(15只)和TB-II 4 mg/kg组(15只)。Morris水迷宫实验测量动物逃避潜伏时间; Elisa法测定脑脊液IL-6和TNF-α含量; TUNEL法检测海马区凋亡神经元; HPLC法检测多巴胺、去甲肾上腺素和5-羟色胺含量。结果水迷宫实验显示老龄对照组逃避潜伏时间比青年对照组增加,差异有统计学意义(P <0. 05);给药组与老年对照组相比逃避潜伏时间明显缩短,差异有统计学意义(P <0. 05);给药组脑脊液IL-6和TNF-α浓度下降(P <0. 05);给药组海马区神经元凋亡减少(P <0. 05);给药组DA、NE和5-HT含量增加(P <0. 05)。结论知母皂苷BⅡ通过抑制大脑炎症介质生成和抑制海马区神经元凋亡,提高神经递质含量,明显改善自然衰老大鼠的学习和记忆能力。

ERK信号通路在DPA诱导神经干细胞分化中的作用

目的探讨ERK信号通路在二十二碳戊烯酸(docosapentenoic acid,DPA)诱导神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化中的作用。方法原代培养SD大鼠来源神经干细胞,用不同浓度DPA和血清对照组进行神经干细胞诱导分化;用图像分析软件Image-pro Plus 2. 0采集突起长度和突触形成率;免疫组织化学方法检测NES在的表达率; Western blot法检测βⅢ-tubulin的表达和ERK信号途径磷酸化水平。结果与对照组相比神经突起以及突触形成在DPA作用下随着浓度增加而增加,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);与对照组相比NSE阳性细胞表达率随着DAP浓度增加而增加(P <0. 05,P <0. 01);与对照组相比细胞骨架蛋白βⅢ-tubulin的表达增加,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);与对照组相比ERK信号分子磷酸化水平升高,差异有统计学意义(P<0. 05,P <0. 01)。结论 DPA促进NSCs分化中神经突起的表达和神经元的分化,活化的ERK信号途径通过信号转导可能是诱导神经突起表达的重要机制。

青蒿素对老年小鼠学习记忆及炎性细胞因子和单胺类神经递质的影响

目的探讨青蒿素对老年小鼠记忆能力的改善作用及对炎性细胞因子和单胺类神经递质的影响。方法30只22月龄老年小鼠随机分成老年小鼠模型对照组、青蒿素小剂量组（饲料中含青蒿素0．1％）和青蒿素大剂量组（饲料中含青蒿素0．3％），每组10只。另设10只2月龄小鼠作为青年小鼠模型对照组；给药组连续10周喂饲含青蒿素饲料，老年小鼠模型对照组和青年小鼠模型对照组喂饲标准饲料。采用Morris水迷宫实验检测小鼠的记忆能力、Elisa法检测小鼠血清炎性因子（IL-6和TNF-α）水平、HPLC法分析小鼠脑中神经递质（多巴胺、去甲肾上腺素和5-羟色胺）的含量。结果（1）水迷宫隐形平台实验中，老年小鼠模型对照组与青年小鼠模型对照组相比在水中滞留时间明显延长（P〈0．05）；青蒿素小剂量组和青蒿素大剂量组与老年小鼠模型对照组相比在水中滞留时间明显缩短（P〈0．05）。在反向隐性平台实验的第9天，青蒿素小剂量组[（50．1±19．9）S]及青蒿素大剂量组[（43．2±17．6）s]在水中滞留时间与老年对照组[（66．1±29．1）S]相比显著缩短（P〈0．05）。（2）血清炎性因子测定实验中，青蒿素小剂量组[IL-6：（28．4±4．3）pg／ml，TNF—α：（51．8±8．2）pg／ml]和青蒿素大剂量组[IL-6：（17．6±2．3）pg／ml，TNF-α：（38．6±12．5）pg／ml]IL-6与TNF—α水平与老年小鼠模型对照组[IL-6：（36．12±7．98）pg／ml），TNF-α：（67．32±10．27）pg／ml）]相比显著降低（P〈0．05）。（3）脑组织神经递质含量测定中，青蒿素小剂量组DA[（19．96±3．89）mmol／ml]、5-HT[（5．73±0．93）mmol／ml]含量高于老年小鼠模型对照组，青蒿素大剂量组DA[（26．13±5．66）mmol／ml]、NE[（16．31±2．69）mmol／ml]、5-HT[（8．03±1．93）mmol／ml]含量高于老年小鼠模型对照组[DA（13．96±3．89）mmol／ml，NE（8．73±2．16）mmol／ml，5-HT（3．82±1．09）mmol／ml]，均差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论青蒿素对老年小鼠学习记忆能力降低具有改善作用，其机制可能与其抑制老年小鼠炎症发生和促进老年小鼠脑内神经递质水平相关。

二十二碳五烯酸对PC12细胞神经突起生长的诱导作用

目的探讨二十二碳五烯酸（docosapentenoicacid，DPA）对PCI2细胞神经突起生长的诱导作用。方法通过培养PCI2细胞，利用MoticZamgesPlus软件测绘细胞图像，观察不同浓度DPA对神经突起形成的影响；Western blot法检测神经元突起标志物βⅢ—tubulin的表达及细胞外调节蛋白激酶（ERK）和蛋白激酶B（Akt）磷酸化程度。结果P12细胞神经突起形成率在DPA的诱导下呈浓度依赖性增加，较对照组分别增加2．4％（DPA10μg／ml，P〉0．05）、18．6％（DPA30μg／ml，P〈0．05）和25．0％（DPA50μg／ml，P〈0．05）；DPA可促进pmtubulin的表达（P〈0．05），提高ERK与Akt的磷酸化水平（P〈0．05）。结论DPA促进PCI2细胞神经细胞突起生长，其机制可能与激活ERK和Akt信号通路有关。