LncRNA FGD5-AS1对口腔鳞状细胞癌细胞恶性表型的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)FGD5-AS1对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响与机制。方法利用在线数据库分析FGD5-AS1在OSCC中的表达。以在滕州市中心人民医院口腔科收集的30例OSCC患者的肿瘤组织、正常组织和体外培养的人口腔黏膜细胞(HOK)和OSCC细胞(SCC-9、HSC-4、SCC-25、CAL-27)为研究对象,采用qRT-PCR法检测FGD5-AS1和miR-129-5p表达。将FGD5-AS1表达最高的CAL-27细胞分成Control组、si-NC组、si-FGD5-AS1组、si-FGD5-AS1+NC inhibitor组和si-FGD5-AS1+miR-129-5p inhibitor组,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证FGD5-AS1与miR-129-5p的靶向关系;Western blot检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)蛋白表达。构建体内异种移植瘤模型,并分为sh-NC组、sh-FGD5-AS1组、miR-129-5p inhibitor组和sh-FGD5-AS1+miR-129-5p inhibitor组,检测肿瘤体积和肿瘤;qRT-PCR检测移植瘤组织FGD5-AS1、miR-129-5p表达;免疫组化检测移植瘤组织HMGB1、Ki67表达。结果数据库分析显示,OSCC肿瘤组织中FGD5-AS1的表达水平是正常组织的4倍,且FGD5-AS1表达与OSCC患者分级较差相关。与正常组织或人口腔黏膜细胞相比,肿瘤组织和OSCC细胞系中FGD5-AS1表达明显升高,miR-129-5p表达明显降低(P<0.05),选择FGD5-AS1表达水平最高的CAL-27细胞进行转染实验。沉默FGD5-AS1可升高细胞凋亡率,降低细胞活力、划痕愈合率及侵袭细胞数,并增强miR-129-5p表达,下调HMGB1表达(P<0.05)。miR-129-5p是FGD5-AS1的靶基因,抑制miR-129-5p表达可逆转沉默FGD5-AS1对OSCC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。体内实验显示,沉默FGD5-AS1明显抑制移植瘤生长和HMGB1、Ki67表达(P<0.05),抑制miR-129-5p则相反;抑制miR-129-5p可逆转沉默FGD5-AS1对肿瘤生长和HMGB1、Ki67表达的抑制作用(P<0.05)。结论FGD5-AS1在OSCC细胞中上调,干扰FGD5-AS1可通过靶向调控miR-129-5p/HMGB1轴,抑制OSCC细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡。