溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种影响结肠、直肠的慢性特发性炎症性疾病,近年来随着UC发病率逐渐增高,有关UC治疗的研究越来越受到重视。胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2,GLP-2)是一种在营养摄入的反应中释放的胃...溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种影响结肠、直肠的慢性特发性炎症性疾病,近年来随着UC发病率逐渐增高,有关UC治疗的研究越来越受到重视。胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2,GLP-2)是一种在营养摄入的反应中释放的胃肠激素。GLP-2与GLP-2受体(glucagon like peptide-2 receptor,GLP-2R)结合后具有促进营养吸收、降低炎症反应、改善肠道血流灌注、促进肠黏膜增殖,改善肠道屏障功能等作用。GLP-2对肠道的有益作用,为UC的治疗提供了新方法、新思路。展开更多
目的:探索CRISPR干扰(CRISPR interference,C R I S P R i)能否实现在体抑制肝脏m i R-122表达.方法:针对m i R-1 2 2启动子区设计sg RNA(sg T1和sg T2),并分别将其与无DNA切割活性仅保留识别活性的d Cas9-KRAB载体通过尾静脉流体力学...目的:探索CRISPR干扰(CRISPR interference,C R I S P R i)能否实现在体抑制肝脏m i R-122表达.方法:针对m i R-1 2 2启动子区设计sg RNA(sg T1和sg T2),并分别将其与无DNA切割活性仅保留识别活性的d Cas9-KRAB载体通过尾静脉流体力学法注射到8-10 wk龄小鼠,注射1、2、4 wk后通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)方法检测肝脏mmu-mi R-122的表达;设计不同的sg RNA浓度梯度,探索CRISPRi在体抑制肝脏mi R-122表达是否存在剂量依赖性;通过q RT-PCR及Western blot方法检测肝脏mi R-122靶分子HOMX1和Cyclin G1的表达变化.结果:在注射1 wk和2 wk后,sg T1介导的C R I S P R i在体抑制肝脏m i R-122的表达水平分别为23%(P<0.05)和16%(P<0.05);随sg RNA的剂量升高,肝脏mi R-122表达降低,当lenti Guide-Puro-sg T1质粒为120?g时,可将mi R-122的表达抑制约30%;CRIPSRi在体抑制肝脏mi R-122表达的同时,上调了mi R-122下游靶分子HMOX1和Cyclin G1的表达.结论:本研究利用CRISPRi实现了在体抑制肝脏mi R-122的表达,为抗丙型肝炎病毒(hepatitis C virus)的在体治疗提供了新的策略.展开更多
文摘溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种影响结肠、直肠的慢性特发性炎症性疾病,近年来随着UC发病率逐渐增高,有关UC治疗的研究越来越受到重视。胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2,GLP-2)是一种在营养摄入的反应中释放的胃肠激素。GLP-2与GLP-2受体(glucagon like peptide-2 receptor,GLP-2R)结合后具有促进营养吸收、降低炎症反应、改善肠道血流灌注、促进肠黏膜增殖,改善肠道屏障功能等作用。GLP-2对肠道的有益作用,为UC的治疗提供了新方法、新思路。
文摘目的:探索CRISPR干扰(CRISPR interference,C R I S P R i)能否实现在体抑制肝脏m i R-122表达.方法:针对m i R-1 2 2启动子区设计sg RNA(sg T1和sg T2),并分别将其与无DNA切割活性仅保留识别活性的d Cas9-KRAB载体通过尾静脉流体力学法注射到8-10 wk龄小鼠,注射1、2、4 wk后通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)方法检测肝脏mmu-mi R-122的表达;设计不同的sg RNA浓度梯度,探索CRISPRi在体抑制肝脏mi R-122表达是否存在剂量依赖性;通过q RT-PCR及Western blot方法检测肝脏mi R-122靶分子HOMX1和Cyclin G1的表达变化.结果:在注射1 wk和2 wk后,sg T1介导的C R I S P R i在体抑制肝脏m i R-122的表达水平分别为23%(P<0.05)和16%(P<0.05);随sg RNA的剂量升高,肝脏mi R-122表达降低,当lenti Guide-Puro-sg T1质粒为120?g时,可将mi R-122的表达抑制约30%;CRIPSRi在体抑制肝脏mi R-122表达的同时,上调了mi R-122下游靶分子HMOX1和Cyclin G1的表达.结论:本研究利用CRISPRi实现了在体抑制肝脏mi R-122的表达,为抗丙型肝炎病毒(hepatitis C virus)的在体治疗提供了新的策略.