非酒精性脂肪肝炎动物模型的研究概况

随着全球代谢综合征患病率不断上升,非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患病率也急剧上升,已是全球最常见的慢性肝疾病,包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、晚期纤维化、肝硬化和肝细胞癌。而NASH是由单纯性脂肪肝发展至肝纤维化、肝硬化和肝癌的重要阶段,因此,预防和治疗NASH已成为一个研究焦点。动物模型是研究疾病的发病机制、治疗药物的研发以及制定防治策略的重要环节。目前已经开发的动物模型主要是模拟人类NASH的病理形态和临床特征,包括膳食动物模型、药物诱导动物模型和基因修饰动物模型,但这些模型均存在各自的优缺点。本文就近年来NASH动物模型的研究及其应用情况进行总结,以供NASH研究者参考。

D-半乳糖致衰老模型大鼠肝肾功能和自由基代谢与中药的干预作用

目的观察D-半乳糖致衰老模型大鼠血糖血脂、肝肾功能和自由基代谢的变化,探讨中药的干预作用及其抗衰老的机制。方法大鼠每日皮下注射D-半乳糖,连续造模7周,建立大鼠衰老模型,造模同时,用抗衰老片和首乌延寿片进行干预,测定试验大鼠的血糖血脂、肝肾功能和SOD、MDA、Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase等自由基代谢指标。结果造模7周后,模型对照组衰老大鼠TG、BUN明显升高(P<0.05,P<0.01),AST、ALP、CREA呈上升趋势(P>0.05),肝、肾组织SOD活性明显降低(P<0.05),肾组织MDA含量明显升高(P<0.05),肝组织Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase活性均显著降低(P<0.05,P<0.01);给予抗衰老片和首乌延寿片后,衰老大鼠TG、AST、BUN、CREA和UA均显著降低(P<0.05,P<0.01),肝、肾组织MDA含量显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05,P<0.01),肝组织Na+-K+-ATPase和Ca++-Mg++-ATPase活性均显著升高(P<0.01)。结论D-半乳糖致衰老大鼠模型的血脂上升、肝肾功能异常和抗脂质过氧化的能力下降;给予抗衰老片和首乌延寿片后,可有效改善衰老大鼠的糖脂代谢和肝肾功能,提高肝肾组织的抗脂质过氧化的能力,提示中药的抗衰老作用可能与其抗氧化作用有关。

豚鼠铜绿假单胞菌生物膜肺感染模型的建立

目的建立豚鼠铜绿假单胞菌生物膜肺感染模型。方法 40只Hartley品系雄性豚鼠随机分为模型组和对照组,经气管注射含琼脂微颗粒的铜绿假单胞菌生物膜(模型组),或生理盐水(对照组)。第30天取肺和支气管组织,观察组织形态变化以及生物膜形成,从肺和支气管肺泡灌洗液(BALF)内分离细菌并测定其生物膜形成能力。结果模型组豚鼠肺泡壁萎缩,肺组织实变,炎症细胞聚集,脓肿形成,肺泡间隔炎症细胞浸润,肺不张;支气管纤毛上皮脱落,黏膜下淋巴细胞浸润,部分支气管管腔内炎症渗出。支气管以及肺泡内壁有细菌生物膜生长。左肺和BALF内分离的铜绿假单胞菌生物膜形成能力无差异(P=0.82)。结论豚鼠气管内注射含琼脂微颗粒的铜绿假单胞菌生物膜可建立可靠的生物膜肺感染模型,该模型适用于探讨细菌生物膜感染与宿主免疫系统之间的相互作用。

不同多囊肾大小鼠模型的研究进展

为多囊肾病发病机理、研发多囊肾病新药选择合适的动物模型提供选择基础,本文总结国内外近年来使用最多的几种多囊肾鼠模型的建立方法,从各模型鼠的来历,造模方法,使用频率和及模型的优缺点等方面进行综述。

益气补肾调脂方对非酒精性脂肪性肝炎小鼠氧化应激损伤的影响

目的:观察中药复方益气补肾调脂方对高脂高果糖诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝组织氧化应激损伤的影响。方法:以高脂饲料加自由饮用20%果糖水16周诱导小鼠高脂高果糖NASH模型,于实验第5周起分别以高、中、低剂量的益气补肾调脂方干预12周,采用Folch方法测定肝组织甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)水平;HE染色光镜观察肝组织脂肪变和炎症程度;比色法检测肝组织血清总抗氧化能力(TAOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平;黄嘌呤氧化酶法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)水平,免疫组织化学法检测肝组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。结果:模型组小鼠肝组织出现重度脂肪变并伴有不同程度的炎症细胞浸润及肝细胞气球样变;与正常组比较,模型组小鼠肝脏TG、CHOL水平、MDA含量以及8-OHdG表达显著增高(P<0.01),而肝脏T-AOC、T-SOD、GSH–PX水平则明显下降(P<0.01)。与模型组比较,益气补肾调脂方的高、中剂量组肝脏TG水平、MDA含量、8-OHdG表达以及高剂量组肝脏CHOL水平显著降低(P<0.05、P<0.01),高、中、低剂量组小鼠肝脏T-AOC、T-SOD水平及高、中剂量组小鼠肝脏GSH–PX水平明显升高(P<0.05、P<0.01)。结论:高脂高果糖诱导的NASH小鼠肝脏氧化应激水平增强,益气补肾调脂方可能通过抗氧化应激损伤防治NASH的进展。

Mito Q10联合二甲双胍作用于PCOS-IR大鼠的疗效实验观察

目的比较基于线粒体为靶点的抗氧化剂(MitoQ10)和二甲双胍对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗(IR)的生殖内分泌紊乱的治疗作用,为MitoQ10进一步应用于PCOS-IR治疗的临床研究提供理论依据。方法选取50只21日龄SPF级雌性SD大鼠,随机分为A、B、C、D、E组,使用丙酸睾丸酮和高脂饮食建立PCOS-IR老鼠模型。建模成功后,A组大鼠给予100mg/kg的二甲双胍治疗,B组大鼠给予2mg/mL的MitoQ10治疗,C组大鼠给予100mg/kg二甲双胍和2mg/mL的MitoQ10联合治疗,D组大鼠设定为模型组,E组大鼠设为空白组。干预前后采血测定睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FPG),甘油三酯(TG),胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL),并计算HOMA-IR的指数,最后剖取卵巢进行病理切片观察。结果治疗前后大鼠的血FINS、T、TG、TC、LDL以及HOMA-IR均显著降低(P<0.05);MitoQ10与二甲双胍能在不同程度的改善PCOS-IR大鼠的内分泌代谢的病理改变。结论 MitoQ10可以较好的改善PCOS-IR大鼠的内分泌状态,具有较好的疗效。

山楂叶总黄酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠组织COX-2/Nrf2表达的影响

观察山楂叶总黄酮(THFL)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏COX-2/Nrf2表达的影响,探讨其抗NASH的作用机制。32只SD大鼠随机分成正常组、模型组、THFL高剂量组及THFL低剂量组,每组8只,以高脂饮食12周建立NASH大鼠模型,同时以250,125 mg·kg-1·d-1的TFHL进行干预,常规HE染色观察大鼠肝组织脂肪变和炎症程度,比色法测定T-AOC水平,免疫组织化学法检测肝组织8-OHdG水平及COX-2,Nrf2,HO-1蛋白表达,Real time-PCR法检测肝组织中COX-2,Nrf2,HO-1 mRNA表达。模型组大鼠肝组织脂肪变和炎症程度气球样变及NAFLD活动度积分(NAS)较正常组明显增强,总抗氧化能力(T-AOC)下降,DNA损害标志物8-OHdG水平增加,COX-2,Nrf2,HO-1 mRNA和蛋白表达较正常组显著增强;应用高、低剂量的TFHL干预后,肝组织炎症程度和NAS较模型组显著降低,8-OHdG水平、COX-2 mRNA和蛋白表达较模型组减少,Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白的表达则较模型组显著增高。COX-2/Nrf2通路参与高脂饮食诱导的NASH的发生发展,TFHL能通过进一步促进Nrf2/HO-1表达,从而负调节COX-2,抑制COX-2的过表达,减轻氧化反应导致的细胞损伤和肝组织炎症,防止NASH的进展。

载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒的制备及体内体外评价

目的本实验拟制备载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒(NH2-MSN-RES),以期提高白藜芦醇(Res)的生物利用度。方法采用改良的Stober法合成氨基修饰介孔二氧化硅(NH2-MSN),发明了反复饱和溶液吸附法载入白藜芦醇制备载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒,透析袋法考察其体外释药特性,MTT法考察载体对Caco-2的细胞毒性,研究载体对白藜芦醇的跨膜转运能力和在大鼠体内的药动学特性。结果氨基修饰介孔二氧化硅氨基成功修饰,呈圆整球形,分布均一,对Caco-2细胞无明显的毒性。反复饱和溶液吸附法吸附8次,载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒的载药量为(19.26±2.51)%,体外释药呈现明显的缓控释特性,载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒对Caco-2细胞单层模型具有良好的跨膜转运能力。药动学参数表明,载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒的AUC0-t是白藜芦醇溶液的2.58倍,并且t1/2、tmax和ρmax显著提高,同时载体使白藜芦醇由单室模型变为二室模型。结论改良的Stober法成功合成氨基修饰介孔二氧化硅,反复饱和溶液吸附法能够有效提高载药量,载白藜芦醇的氨基修饰介孔二氧化硅纳米粒提高了白藜芦醇的生物利用度,氨基修饰介孔二氧化硅是一种有前景的口服给药纳米材料。

纳米银和二氧化钛对金黄色葡萄球菌核酸的影响

目的 研究纳米银（Ag）和二氧化钛（TiO2）两种无机抗菌剂对金黄色葡萄球菌核酸含量的影响，分析抗菌剂的抗菌作用机制。方法 制备牛肉膏蛋白胨液体培养基，分别测定纳米Ag和TiO2的最低抑菌浓度（MIC）；以1/2MIC纳米Ag和TiO2浓度作用于金黄色葡萄球菌的培养液，用紫外分光光度计检测培养液中从菌体漏出的DNA和DNA等大分子物质含量，确定抗菌剂对细菌细胞膜的损伤程度； 用荧光显微镜观察菌体荧光强度，确定菌体内核酸染色程度；并用荧光分光光度计测定荧光值，确定菌体内核酸DNA和RNA含量。结果 纳米Ag和TiO2对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为5.781μg/ml和1.6mg/ml，以1/2MIC为作用浓度，纳米Ag组和TiO2组分别与对照组相比培养液上清液中漏出的DNA和DNA等大分子物质含量，结果显示没有明显差别（P〉0.05），菌体核酸染色荧光强度和DNA和RNA含量，结果显示纳米Ag组和TiO2组与对照组相比显著减少（P〈0.05或P〈0.01）。结论 纳米Ag比TiO2对金黄色葡萄球菌具有明显抗菌作用，纳米Ag比TiO2有更强的抗菌性能；纳米Ag和TiO2的抗菌机制可能与抑制了金黄色葡萄球菌核酸DNA和RNA的合成有关，从而抑制细菌蛋白合成，抑制细菌的生长。