雷公藤多苷对溃疡性结肠炎大鼠模型炎症及TLR4／MyD88信号通路的作用

目的观察雷公藤多苷（TWP）对溃疡性结肠炎（UC）的作用，以及对Toll样受体4（TLR4）／髓样分化因子88（MyD88）信号通路的干预作用，以探讨其可能的作用机制。方法采用三硝基苯磺酸（TNBS）／乙醇灌肠法建立UC大鼠模型。采用随机数字表法将90只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组及TWP低、中、高剂量（3、6、12mg／kg）组、硫唑嘌呤（AZA）组（6mg／kg），每组15只。造模后第4天，各组分别给予相应药物连续灌胃14d。观察各组大鼠疾病活动指数（DAI）、结肠大体形态损伤以及组织学评分，采用反转录（RT）-PCR法和Western印迹法检测各组大鼠肠道组织中TLR4／MyD88信号通路相关蛋白——TLR4、MyD88、肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF-6）、核因子κB（NF—κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的表达。结果模型对照组大鼠DAI、结肠大体形态损伤及组织学评分均显著高于正常对照组（均P〈0．01），大鼠造模成功；TwP高剂量组的DAI评分、结肠大体形态损伤评分及组织学评分均低于模型对照组[（0．87±0．25）比（1．60±0．76）分，（3．93±1．94）比（5．40±2．21）分，（5．45±2．73）比（13．27±3．50）分，均P〈0．05]。模型对照组大鼠TLR4、MyD88、TRAF-6、NF—κB、TNF-α、IL-1βmRNA及蛋白表达明显高于正常对照组（均P〈0．01）；TWP高剂量组上述指标mRNA及蛋白表达均明显低于模型对照组（mRNA：2．166±0．475比5．647±0．275、1．295±0．087比3．774±0．418、1．125±0．188比2．535±0．320、1．201±0．152比2．082±0．077、1．525±0．218比3．094±0．022、1．797±0．257比17．152±0．145；蛋白：0．252±0．010比0．277±0．008、0．172±0．002比0．213±0．005、0．233±0．006比0．248±0．003、0．099±0．003比0．122±0．007、0．238±0．002比0．252±0．005、0．235±0．003比0．245±0．006，均P〈0．05），AZA组上述指标mRNA及蛋白表达明显低于模型对照组（均P〈0．01），TWP高剂量组与AZA组之间差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论TWP能减轻肠道炎症反应，促进黏膜愈合，对UC具有治疗作用；抑制TLR4的表达，影响MyD88引发信号通路下游的TRAF-6表达，从而抑制NF—KB的活化，减少炎症因子TNF-α、IL-1β的释放是其作用机制之-。