化瘀散结法对子宫内膜息肉术后雌孕激素受体和Ki-67表达的影响

目的观察化瘀散结法分期治疗对宫腔镜子宫内膜息肉切除术(TCRP)术后患者子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和增殖细胞相关抗原Ki-67表达的影响。方法 TCRP术后病理诊断为子宫内膜息肉患者147例,以随机单盲法分为中药组、西药组、对照组,各49例,术后分别予中药化瘀散结法分期治疗、妈富隆片周期性治疗、不予任何药物治疗,疗程3个月。免疫组化法检测子宫内膜ER、PR及Ki-67的表达,比较三组患者治疗前后ER、PR及Ki-67的变化。结果三组患者治疗前后比较,中药组PR 3级表达增加(45例比30例,P<0.01),Ki-67 3级表达减少(6例比25例,P<0.01),且中药组疗效优于其他两组(PR 3级:45例比36例、31例;Ki-67 3级:6例比16例、28例;P<0.01),三组ER表达治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TCRP术后应用中药化瘀散结分期治疗可提升子宫内膜PR表达,抑制Ki-67表达,达到防治子宫内膜息肉复发的治疗效果。

桃红四物汤辅助治疗盆腔炎性包块的效果观察

目的探讨桃红四物汤辅助治疗盆腔炎性包块的临床效果。方法按照随机表顺序选取盆腔炎性包块患者286例，其中对照组133例，治疗组153例。对照组采用单纯抗生素治疗，治疗组在对照组治疗方法的基础上联合桃红四物汤治疗。研究对比两组治疗效果。结果对照组总有效率为63．90％，治疗组总有效率为98．69％，两组差异有统计学意义（X2=59．67，P〈0．01）。两组均有发生不良反应的患者。结论抗生素联合桃红四物汤治疗盆腔炎性包块简单安全不增加药物的毒副作用治愈率高，特别是避免了手术，易被患者接受值得临床推广。

基于生物信息学探究“养血活血安胎”法指导下当归-白芍调节PI3K/AKT改善复发性流产母胎界面血管生成的机制

目的基于生物信息学结合动物实验探究“养血活血安胎”法指导下当归-白芍通过调节磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,AKT)改善复发性流产(RSA)母胎界面血管生成的作用机制。方法基于基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)获取RSA相关基因芯片,并通过R软件limma包进行差异表达分析。通过人类基因数据库(GeneCards)得到血管生成相关基因,并通过Venn在线制图工具将其与得到的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)取交集。应用基因富集分析在线工具进行京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路分析。建立正常妊娠小鼠模型和Clark经典RSA模型,将正常妊娠小鼠模型作为正常对照组(n=10),将RSA小鼠随机分为模型组、黄体酮组、高剂量、中剂量和低剂量当归-白芍水煎剂组,并于妊娠第1天开始给予相应药物灌胃,每日1次,共给药15 d;正常对照组给予等体积等频次生理盐水灌胃,于末次给药后12 h处死小鼠并取材。采用免疫组织化学法测定各组小鼠蜕膜组织中内皮抑素(endostain,ES)和微血管密度(micro vessel density,MVD)标记物白细胞分化抗原34(cluster of differentiation,CD34)的阳性表达,免疫印迹(Western blotting)法检测蜕膜组织中PI3K、AKT、ES和CD34的水平。结果芯片GSE113790被纳入本研究,从中共获得704个RSA相关的差异表达基因。此外,通过Genecards数据库共获得1258个血管生成相关基因。两者交集共有65个基因,此即为RSA血管生成异常相关DEGs。富集分析结果显示65个DEGs共参与45个信号通路的调控(P<0.05),其中PI3K/AKT富集最为显著。免疫组化结果表明,与对照组相比,模型组ES水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,当归-白芍中剂量、高剂量组CD34水平显著升高,ES水平显著下降(P<0.05)。Western blotting结果表明,模型组ES水平显著升高,CD34、PI3K、pAKT/AKT水平显著下降(P<0.05),而黄体酮组及当归-白芍各剂量组ES水平均显著下降,pAKT/AKT水平显著上升;黄体酮组CD34水平显著上升;黄体酮组及当归-白芍高剂量组PI3K水平显著上升。结论RSA母胎界面存在血管生成障碍,在“养血活血安胎”法指导下,当归-白芍药对可促进RSA小鼠母胎界面血管生成,并与激活PI3K/AKT通路相关。

基于网络药理学和动物实验探究当归-白芍药对治疗复发性流产母胎界面血管生成障碍的机制

目的利用网络药理学及动物实验探讨当归-白芍药对治疗复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)母胎界面血管生成障碍的作用机制,为中药的临床推广提供依据。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)数据库和中药分子机制的生物信息学分析工具(bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional Chinese medicine,BATMAN-TCM)数据库收集并筛选当归-白芍药对的活性物质成分和作用靶点。在人类基因数据库(GeneCards)与在线人类孟德尔遗传(online Mendelian inheritance in man,OMIM)数据库中筛选RSA以及血管生成相关靶点。利用韦恩图(Venn)在线制图网站获得当归-白芍、RSA和血管生成的共同靶点,分别利用基因/蛋白相互作用检索搜查工具(search tool for the retrieval of interacting genes/proteins,STRING)数据库和Cytoscape对共同靶点进行蛋白互作网络分析(Protein-protein interaction,PPI)分析,构建药物、活性和共同靶点的作用网络。并且,对共同靶点进行富集分析。以雌性CBA/J小鼠配雄性DBA/2小鼠建立复发性流产模型,分别给予不同浓度当归-白芍水煎剂或黄体酮干预,以雌性CBA/J小鼠配雄性BALB/C小鼠建立正常妊娠模型,给予等体积生理盐水。所有小鼠均连续灌胃15 d后处死,用苏木素-伊红法观察各组小鼠蜕膜组织形态和血管数量;免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组小鼠蜕膜组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)蛋白的分布和表达含量。结果通过网络药理学分析获得当归-白芍药对潜在活性成分27个,对应1084个靶点。在GeneCards数据库与OMIM数据库中共获得496个RSA相关蛋白靶点以及150个血管生成相关靶点。Venn图得到当归-白芍、RSA、血管生成障碍的交集靶点28个。PPI可视化共同靶点间的相互关系,并得到10个关键基因(hub基因)。28个共同靶点富集于486个基因本体(Gene Ontology,GO)条目(P<0.05)和51条京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路(P<0.05)。动物模型验证结果表明,与模型组相比,当归-白芍低、中、高剂量组及黄体酮组能够显著改善蜕膜组织中血管生成,显著提高蜕膜组织中HIF-1α、VEGF和VEGFR2的水平(P<0.01)。结论当归-白芍药对改善RSA母胎血管生成具有多组分、多靶点和多通路的优势,其中当归-白芍药对可能通过作用于HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路基因的表达改善RSA母胎界面的血管生成,达到治疗功效。