2-甲基-正丁酰紫草素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡机制的研究

2-甲基-正丁酰紫草素[（2-methyl-n-butyl）shikonin,MBS,图1]是从紫草科植物紫草的根部提取得到的一个萘醌类化合物。研究表明,紫草素具有抗炎、抗菌、抗肿瘤的作用[1？3]。体外实验证实紫草素通过增加caspase-3的活化诱导多种肿瘤细胞的凋亡,

大黄酸大鼠体内血液/肾脏同步药动学研究

目的研究大黄酸(RH)iv给药后在大鼠血液和肾脏内的同步药动学行为以评价RH肾脏的渗透性。方法应用HPLC法测定给药后大鼠血浆中RH质量浓度,经血浆蛋白结合率折算为血中游离药物浓度;采用微透析(MD)技术定时获取肾脏透析液,高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术测定大鼠肾脏透析液中RH的质量浓度;采用非房室模型拟合药动学参数。结果给药后RH较快进入肾脏,在给药后1 h左右浓度达到峰值,其后持续下降,在给药后整个过程中,肾脏药物浓度均明显低于血液药物浓度。RH给药后在大鼠血液及肾脏中的平均滞留时间(MRT)分别为(87.217±29.889)、(122.387±12.521)min;药时曲线下面积(AUC)分别为(114.236±45.585)、(16.596±1.732)μg·min/m L,肾脏渗透率(AUC肾脏/AUC血液)为0.161±0.056。结论大鼠血液/肾脏同步药动学研究是研究药物肾脏渗透性能的有效方法;RH iv给药后可有效地向肾脏渗透,从而有利于肾脏疾病的治疗。

桔梗皂苷D诱导人肺癌细胞A549的凋亡及机制

目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5～20μmol.L-1。MTT法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,JC-1检测线粒体膜电位的变化,Western blot方法检测PD对Caspase-3,Caspase-9,PARP的剪切片段和Bax,Bcl-2,Bak,Bcl-xl蛋白表达的影响。结果:PD抑制A549细胞的增殖,并随药物浓度的增加和作用时间的延长,作用更显著;与对照组相比,不同浓度的PD作用24 h后,细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,且差异显著。蛋白电泳检测结果显示蛋白Caspase-3,Caspase-9均出现剪切片断,并随着时间的增加断裂更明显。PD处理A549细胞后,Bax和Bak蛋白表达升高,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达下降。结论:PD具有明显的细胞毒作用,能诱导A549细胞凋亡,通过对Bax,Bak和Bcl-2,Bcl-xl表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase最终导致肺癌细胞死亡。

白芍中芍药苷及其衍生物的UPLC-MS/MS分析

目的：采用超高效液相色谱与四级杆-线性离子阱串联质谱联用技术（UPLC-Q-Trap MS-MS）对白芍中单萜糖苷类成分进行分析和鉴别。方法：用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）乙腈（B）为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,在负离子模式下采集数据,数据采集范围m/z100~1200,雾化气124.11 kPa,脱溶剂气103.43 kPa,气帘气206.85kPa;离子源温度为450℃;离子喷雾电压为-4.5 kV;结果：白芍中化学成分获得了较好的分离和检测,共推测出6个糖苷类化合物的化学结构;结论：该方法灵敏度高,分离度好,适用于白芍中单萜糖苷类成分的快速分析与结构鉴定。

LC-MS/MS法测定去甲斑蝥素在大鼠体内的组织分布

目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,从低、中、高3种剂量研究去甲斑蝥素(NCTD)在体内变化特征。方法液相色谱分离采用CAPCELL PAK MG II C_(18)色谱柱,乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温为室温。质谱检测采用ESI离子源,离子对监测(MRM)模式下测定(离子对n/z 169.3→123.1,NCTD;m/z 267.1→135.1,内标利巴韦林)。大鼠尾静脉注射给药后于特定时间点处死动物,取各组织,匀浆,沉淀蛋白后,采用LC-MS/MS法测定NCTD在大鼠各组织中的浓度。结果 NCTD在心、肝、肺中的线性范围为(0.01~10.00)mg/L,在脾和肾中的线性范围为(0.10~10.00)mg/L。各组织样品的日内与日间精密度均小于14%,提取回收率在81.0%~106%之间。3种剂量NCTID静注给药后在大鼠体内呈现相似的动态变化过程(脾除外),给药后1 h达最大浓度,随后快速消除。NCTD在肝和肾中分布较高,且呈剂量依赖性。结论本文建立了一种简便、灵敏、准确的LC-MS/MS测定方法,可用于NCTD大鼠体内组织分布研究。NCTD高剂量给药时,其在肾中较高的浓度可能与肾毒性有关,为临床合理用药提供了参考依据。