实验性结肠炎小鼠Th17/Treg细胞变化及云母保护作用研究

目的 观察三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎小鼠中Foxp3/ROR-γt变化,探讨Th17/Treg细胞失衡在结肠炎中的作用以及云母的保护效应和可能机制.方法 将30只清洁级雄性BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组和云母组,每组10只.模型组和云母组采用TNBS法制备结肠炎小鼠模型;造模后第1天起对照组和模型组予生理盐水灌肠,云母组予云母混悬液灌肠,连续3d,第4天处死小鼠,留取标本.观察小鼠一般状况、结肠大体及病理损伤情况.使用RT-qPCR、免疫组化和ELISA法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3、IL-10、IL-17A的表达.结果 与模型组相比较,云母组疾病活动指数评分下降,结肠大体、组织病理损伤评分明显降低(P均＜ 0.05).与对照组比较,模型组结肠组织中Foxp3、IL-10、ROR-γt、IL-17A表达均明显升高(P均＜0.05),Foxp3/ROR-γt比值明显下降(P=0.012);与模型组比较,云母组ROR-γt、IL-17A的表达明显降低(P均＜0.05),而Foxp3、IL-10表达显著升高(P均＜0.05),Foxp3/ROR-γt比值也显著升高(P=0.00).Pearson相关性分析表明小鼠结肠组织Foxp3/ROR-γt比值与IL-10表达呈正相关(r=0.72,P=0.03),与IL-17A表达呈负相关(r=-0.67,P=0.05).结论 TNBS诱导的实验性结肠炎小鼠中存在Th17/Treg细胞及相关炎性因子的失衡.云母对实验性结肠炎小鼠结肠黏膜具有保护作用,可调节失衡的Th 17/Treg细胞,上调IL-10,抑制IL-17A表达,减轻炎症反应.