浅谈《古今医案按》外用中药剂型在内科疾病中的应用

中药剂型就是中医药方剂的制剂形式。由于治疗经验的积累和临床证治的需要,长期以来,中医方剂已发展有汤、酒、茶、露、丸、散、膏、丹、片、锭、胶、曲,以及条剂、线剂等多种内服、外服剂型。治内者,自内达外,汤醴丸散丹之类,见于服饮者是也;治外者,由外以通内,膏熨蒸浴粉之类,借于气达者也。由此可见,不论是'汤醴丸散丹',抑或'膏熨蒸浴粉'的临床应用,总是以疾病治疗的实际需要为出发点。

基于网络药理学及实验验证探究益肾活血方治疗肾纤维化的作用机制

目的采用网络药理学、分子对接技术结合动物实验,探讨益肾活血方治疗肾纤维化的作用机制。方法通过TCMSP数据库获取益肾活血方的活性成分和作用靶点;采用GeneCards、OMIM、PharmGkb和TTD数据库获取肾纤维化的疾病靶点,构建“益肾活血方成分-疾病靶点”网络图;采用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI);使用R软件进行GO功能及KEGG通路富集分析;对活性成分与关键靶点进行分子对接验证。动物实验采用腺嘌呤灌胃制备肾纤维化小鼠模型,给予益肾活血方灌胃治疗,连续2周。Masson染色检测小鼠肾脏胶原纤维沉积水平。ELISA法测定肾脏组织Col-I和FN蛋白水平。qRT-PCR法验证分子对接结果。Western blot法检测小鼠肾组织E-cadherin、α-SMA、TP53和STAT3蛋白水平。结果发现关键活性成分为槲皮素、木犀草素、山柰酚、丹参酮ⅡA等。核心靶点网络显示其关键靶点为STAT3、TP53、HSP90AA1等。富集分析发现益肾活血方可能通过调控PI3K-Akt、AGE-RAGE、TNF等信号通路改善肾纤维化。分子对接结果验证了槲皮素、木犀草素和丹参酮ⅡA等与核心靶点均具有较强的结合能力。动物实验表明,益肾活血方能有效改善肾纤维化小鼠肾脏胶原纤维沉积,降低Col-I和FN蛋白表达水平,降低E-cadherin蛋白表达,促进α-SMA表达,还可显著下调TP53、STAT3的表达。结论益肾活血方可能是通过槲皮素、木犀草素和丹参酮ⅡA等关键活性成分作用于STAT3、TP53等靶点改善肾纤维化。

补肾活血法联合钙尔奇D治疗农村中老年原发性骨质疏松症临床观察

目的观察补肾活血法联合钙尔奇D治疗农村中老年原发性骨质疏松症的效果。方法将78例中老年原发性骨质疏松症患者依随机数字表法分为观察组40例和对照组38例。对照组患者口服钙尔奇D片,观察组患者采用补肾活血法中药煎膏剂联合钙尔奇D治疗,连续治疗3个月后,对比两组患者治疗前后骨密度测定和疗效。结果治疗后两组患者腰椎、股骨颈骨密度值较治疗前均有提高,观察组提高幅度略大,但差异无统计学意义;观察组总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义;观察组不良反应发生率低于对照组,但差异无统计学意义。结论补肾活血法联合钙尔奇D可提高原发性骨质疏松症患者的骨密度和疗效,具有较高的安全性。

壮筋补骨丸联合清热活血消肿合剂对骨伤愈合的影响

目的:观察壮筋补骨丸联合清热活血消肿合剂对骨伤愈合的临床效果。方法:将60例骨伤患者随机分为观察组和对照组进行研究,每组30例。对照组给予使用壮筋补骨丸治疗,观察组采用壮筋补骨丸与清热活血消肿合剂进行联合治疗。观察2组患者治疗前后血清中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)以及神经肽Y (NPY)水平值和治疗后的临床效果。结果:观察组和对照组有效率分别为96.6%和80.0%,2组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗前,2组血清中ET、NO以及NPY水平比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后,2组各项指标均较前改善,2组间指标比较,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:壮筋补骨丸联合清热活血消肿合剂治疗骨伤,临床疗效显著,可以减轻疼痛和炎症反应,促进骨伤愈合。

基于网络药理学与分子对接探讨风引汤治疗癫痫作用机制

目的:基于网络药理学与分子对接探讨风引汤治疗癫痫的潜在作用机制,并通过动物实验验证其预测靶点的可靠性。方法:结合文献,借助TCMSP、CTD数据库,获取风引汤的活性成分及其相关分子靶点;通过GeneCards、DisGeNET、TTD和OMIM数据库检索癫痫相关的基因,运用Cytoscape3.7.0软件构建风引汤治疗癫痫的蛋白相互作用网络和成分-靶点网络,筛选出风引汤治疗癫痫的关键靶点;利用R软件将关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过分子对接进行半柔性对接反向验证并运用实时荧光定量PCR法对关键靶点进行验证。结果:筛选出风引汤治疗癫痫的活性成分134个,与癫痫的共有靶点46个,其中风引汤抗癫痫的关键靶点主要包括半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)、转录因子AP-1(JUN)、Myc原癌基因蛋白(MYC)、前列腺素G/H合成酶2(PTGS2)和过氧化氢酶(CAT)等,涉及信号通路有AGE-RAGE信号通路、p53信号通路、神经退行性信号通路等。实时荧光定量PCR实验证明风引汤能降低癫痫大鼠海马中CASP3、JUN mRNA表达(P<0.05),升高CAT mRNA表达(P<0.05)。结论:风引汤治疗癫痫主要作用靶点与CASP3、JUN、CAT有关,其作用机制可能与AGE-RAGE、p53、神经退行性等信号通路相关。

基于网络药理学联合GEO芯片探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化的作用机制

目的:基于网络药理学联合GEO芯片差异基因分析方法探讨肾气丸治疗肾小管上皮间质转化(EMT)的作用机制,动物实验进一步验证肾气丸治疗EMT的作用靶点。方法:依据中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和BATMAN-TCM数据库筛选出肾气丸的活性成分及其对应靶点,利用GEO数据库获取疾病相关靶点,通过Cytoscape3.7.0软件绘制“药物-成分-靶点”网络。使用STRING数据库与Cytoscape3.7.0软件绘制核心靶点蛋白相互作用网络,并利用R语言对核心靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。通过实时荧光定量PCR验证肾气丸对苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、细胞分裂周期蛋白20(CDC20)、表皮生长因子受体(EGFR)、核受体辅激活蛋白1(NCOA1)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)mRNA的影响。结果:共得到肾气丸活性成分229个,预测作用靶点共1331个,与EMT GEO芯片共同靶点共221个。肾气丸治疗EMT主要作用于AKT1、CDC20、EGFR、NCOA1、CCNB1等靶点。GO富集分析涉及到营养物质反应、金属离子反应、氧化应激反应等多种生物过程,KEGG富集分析得到cAMP信号通路、钙信号通路、甲状腺激素信号通路、催产素信号通路、HIF-1信号通路等多条信号通路。实时荧光定量PCR证明肾气丸治疗可升高腺嘌呤造模小鼠肾组织中AKT1 mRNA表达,降低CDC20、EGFR和CCNB1 mRNA表达(P<0.05)。结论:基于网络药理学方法及实验验证,初步阐明肾气丸可通过调节AKT1、CDC20、EGFR、CCNB1 mRNA表达来改善EMT,其作用机制可能与cAMP信号通路、钙信号通路等多条信号通路有关。

温经活络方治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型实验研究

目的 基于肿瘤坏死因子α(TNF-α)/核因子-κB(NF-κB)及辅助性T细胞17(Th17)细胞分化探讨温经活络方治疗胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠作用机制。方法 40只6周雄性DBA/1小鼠采用随机数字表法分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组和温经活络方组,共4组,每组10只。以胶原注射的方式构建胶原诱导性关节炎模型,在初次免疫后21天起分别以双蒸水、甲氨蝶呤、温经活络方干预35天,期间每周评价各组小鼠的体重,从初次免疫后第24天起每周评价各组足肿胀度、关节炎症评分。HE染色检测足趾及踝关节病理改变情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中抗环瓜氨酸肽抗体(CCP-Ab)、小鼠白细胞介素-6(IL-6)和TNF-α水平;实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测足关节NF-κB、骨保护素(OPG)和破骨细胞分化因子(RANKL)mRNA表达水平;免疫蛋白质印迹(Western Blot)检测小鼠脾脏及足关节NF-κB、p-NF-κB表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏中Th17细胞表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠毛发枯槁,进食量减少,体重明显降低(P<0.05,P<0.01);小鼠血清中抗CCP抗体、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01);足趾中NF-κB、RANKL mRNA表达亦明显升高(P<0.01),OPG mRNA表达明显下降(P<0.05);脾脏及足趾关节p-NF-κB蛋白表达明显升高(P<0.01);脾脏中Th17细胞比值显著升高(P<0.01)。与模型组比较,温经活络方组小鼠体重减轻情况得到缓解(P<0.05);两干预组脾脏肿大得到显著缓解(P<0.01),足肿胀度显著降低(P<0.01)。温经活络方组关节炎症评分显著下降(P<0.05,P<0.01);小鼠足趾及踝关节滑膜细胞增生减轻,浸润的炎细胞数量显著减少,血管翳生成减少,骨和软骨破坏明显减轻。两干预组血清抗CCP-Ab、TNF-α、IL-6水平下降(P<0.05,P<0.01);脾脏和足趾p-NF-κB水平降低(P<0.05,P<0.01);NF-κB、RANKL mRNA表达水平下降(P<0.01),OPG mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。Th17细胞表达明显抑制(P<0.01)。结论 温经活络方能够通过抑制TNF-α、IL-6等相关炎症因子表达,进一步抑制TNF-α/NF-κB信号通路及Th17细胞的活化,从而减轻RA关节炎症、降低关节炎症评分、抑制骨质破坏、改善其病理变化。