非酒精性脂肪性肝病儿童肠道菌群特异性的变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患儿肠道菌群的组成和丰度变化，阐述NAFLD儿童的肠道菌群结构特征并探讨其参与NAFLD发生发展的可能机制。方法前瞻性病例对照研究。选择2015年11月至2017年6月浙江中医药大学附属第二医院及第一医院收治的NAFLD患儿19例为研究对象，并以健康儿童22名为对照组，NAFLD组男10例，女9例，年龄（11.0±1.0）岁；对照组男10名，女12名，年龄（9.0±1.2）岁；测定两组儿童的体质指数（BMI）及腰围；检测空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白；收集粪便，磁珠法提取粪便样品细菌DNA，采用16 S rDNA高通量测序技术检测两组儿童粪便中肠道菌群的组成和丰度，并分析比较两组样本肠道菌群的结构特征。应用PICRUST软件对菌群的KO差异基因表达及KEGG信号通路富集分析进行预测。组间比较采用t检验或Mann-Whitney U检验及Willcoxon W检验。结果NAFLD组BMI[（25.1±2.7）比（18.2±1.5）kg/m2，t=9.912，P=0.000]，腰围[（88.6±6.6）比（71.5±6.3）cm，t=8.520，P=0.000]，甘油三酯[（0.9±0.4）比（0.7±0.3）mmol/L，t=2.060，P=0.046]均高于对照组，差异均有统计学意义。NAFLD组香浓指数[3.99（3.13,4.54）比4.63（4.21,4.81），Z=-2.065，P=0.039]，辛普森指数[0.85（0.70,0.89）比0.90（0.88,0.93），Z=-2.431，P=0.015]，ACE指数[235.76（205.26,361.94）比326.96（275.34,368.65），Z=-2.092，P=0.036]均明显低于对照组，差异均有统计学意义。在门水平上，NAFLD组放线菌门比例低于对照组[29.807（14.723,62.080） ×10-3比63.212（46.133,172.071） ×10-3，Z=-2.667，P=0.008]，栖热菌门比例高于对照组[0.033（0.000,0.226） ×10-3比0.000（0.000,0.031） ×10-3，Z=-2.729，P=0.006]，差异均有统计学意义；在属水平上，NAFLD组拟杆菌属比例[78.757（11.430,151.621） ×10-3比356.821（161.049,403.037） ×10^-3，Z=-2.771，P=0.006]、双歧杆菌属比例明显低于对照组[19.680（6.181,53.944） ×10-3比54.721（31.911,146.410） ×10-3，Z=-2.458，P=0.014]，普氏菌属比例显著高于对照组[3.089（0.165,63.502） ×10-3比0.432（0.029,2.257） ×10-3，Z=-2.112，P=0.035]，差异均有统计学意义。基于KEGG数据库，共发现78个差异表达基因及26条差异代谢途径，其中K01470、K01961、K07258这几种功能基因集中于精氨酸和脯氨酸的代谢、脂肪酸合成、多糖的生物合成和代谢这3条差异代谢途径上，且与拟杆菌属、普氏菌属、双歧杆菌属及瘤胃球菌属相关。结论NAFLD患儿存在代谢异常及肠道菌群紊乱；差异菌属有可能通过功能基因的差异表达改变相关代谢途径进而影响脂代谢过程，参与NAFLD的发生发展。