不同丛枝菌根真菌促进资阳香橙幼苗生长研究

【目的】筛选促进柑橘砧木资阳香橙盆栽幼苗生长的丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF),为柑橘菌根种苗应用提供参考,也为利用菌根柑橘种苗抑制柑橘黄龙病探索新途径。【方法】采用盆栽试验,利用资阳香橙幼苗接种从广西土壤分离纯化获得的15株AMF菌株,研究不同AMF对根系的侵染及对植株的促生效应。【结果】15株AMF均能与资阳香橙根系形成共生关系。其中,黄雷德克囊霉1(Redeckera fulvum 1)对植株根系的侵染率最高,达到81.27%;脆无梗囊霉(Acaulospora delicata)的侵染率最低,为8.57%;15株菌株的平均侵染率为50.97%。幼套近明球囊霉(Claroideoglomus etunicatum)和摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)可促进资阳香橙的生长,其株高、茎粗、叶片数和叶绿素SPAD值均显著高于对照(P<0.05)。【结论】幼套近明球囊霉和摩西斗管囊霉是促进资阳香橙生长的优势菌株。

丛枝菌根真菌与胡萝卜毛状根双重培养体系研究

以发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)K599诱导胡萝卜产生毛状根,接种丛枝菌根(AM)真菌摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)建立双重培养体系,研究不同消毒方法、超声波、低温预处理和培养基pH对摩西斗管囊霉孢子萌发的影响及其与胡萝卜毛状根建立双重培养体系的最佳条件。研究结果表明:消毒方法3孢子萌发率最高,孢子污染率最低,15 d孢子萌发率达48.88%,而污染率仅为9.98%;超声波处理能降低孢子污染率11.17%~14.53%;低温预处理可有效提高孢子的萌发率,4℃低温处理10 d和15 d效果较好,其萌发率分别为70%和65%;AM真菌孢子在水琼脂培养基萌发最佳pH为6.5,萌发率达到48.50%,pH<5.5或pH>8.0均抑制孢子萌发,pH 5.5和pH 8.0的萌发率分别为15.43%和16.06%。消毒孢子先于水琼脂萌发后,再挑取萌发管多,菌丝较长的孢子并将菌丝生长方向正对毛状根方向进行转接,可以提高双重培养的成功率。MSR培养基为双重培养的最优培养基。胡萝卜毛状根与AM真菌双重培养可为菌根真菌繁殖及相关分子机理研究提供可行有效的途径。

水产品生物活性肽的研究进展

水产品种类繁多,所含氨基酸比例与人体氨基酸组成接近。与陆生动植物蛋白来源的生物活性肽相比,水产品生物活性肽具有自身优势,这引起了研究人员的广泛关注,成为近年来食品领域的研究热点。该文概括了水产品生物活性肽的基本概念、研究现状,制备方法及构效关系,并以鱼类、贝类、甲壳类动物为例,综合阐述了水产品抗氧化肽、降血压肽、抗菌肽等生物活性肽的研究进展。最后,对水产品生物活性肽当前发展中的共性问题进行了总结与展望,为水产品生物活性肽进一步开发利用提供参考。

针叶樱桃浓缩物及其配伍组合物的抗炎作用研究

目的研究针叶樱桃浓缩物及其各组合物的抗炎作用。方法雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药对照组、针叶樱桃浓缩物低、中、高剂量组,经二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验,研究不同剂量针叶樱桃浓缩物的抗炎作用,并选择具有抗炎效果剂量的针叶樱桃浓缩物,分别与接骨木莓+野樱莓、接骨木莓+葡萄糖酸锌配伍,考察其抗炎作用。结果与模型组相比,针叶樱桃浓缩物各剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著降低,并呈剂量依赖性,低剂量组与中、高剂量组比较差异有统计学意义,血清中IL-1β含量显著降低;针叶樱桃浓缩物各剂量组均能有效抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增高。选择针叶樱桃浓缩物低剂量组配伍制成2种组合物,对比模型组,组合物小鼠耳廓肿胀度、血清中IL-1β含量均显著降低,小鼠腹腔毛细血管通透性增高均得到显著抑制;组合物小鼠耳廓肿胀度较针叶樱桃浓缩物低剂量组显著降低。结论针叶樱桃浓缩物具有良好的抗炎作用;配伍接骨木莓与野樱莓或葡萄糖酸锌具有协同增效作用,其机制可能与抑制炎症因子的释放有关。

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠的作用研究

目的观察主流降脂药瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(ApoE-/-)基因敲除动脉粥样硬化小鼠血管壁保护及斑块的稳定作用,探讨干预高脂血症、动脉粥样硬化,防治心血管疾病的可能机制。方法20只ApoE-/-小鼠随机分为模型组和瑞舒伐他汀组,每组各10只,另10只C57BL/6/J小鼠设为正常组。模型组和瑞舒伐他汀组小鼠于6周起西方膳食饲料饲养至20周龄,瑞舒伐他汀组自16周龄起每日予以瑞舒伐他汀(10 mg/kg)灌胃,并同时对正常组及模型组每日给予饮水灌胃,观察至20周龄取材。采用生化方法检测各组小鼠血脂及炎症指标变化,采用苏丹Ⅳ染色法以及Image J检测小鼠主动脉斑块沉积情况,通过小动物主动脉超声测得小鼠中膜厚度等结果,使用Von Kossa染色法检测主动脉弓钙化程度。结果与正常组比较,模型组小鼠的血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组小鼠的血清TG水平下降,差异有统计学意义(P<0.01)。瑞舒伐他汀组小鼠的血清LDL、TC水平与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,模型组小鼠血清的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。瑞舒伐他汀组小鼠的血清TNF-α、ICAM-1、MCP-1水平与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠的主动脉斑块沉积面积平均值达39.66%,瑞舒伐他汀组小鼠的主动脉斑块沉积面积平均值达25.87%;瑞舒伐他汀组与模型组小鼠的主动脉斑块沉积面积比较,差异有统计学意义(P<0.01)。主动脉超声结果显示,各组小鼠的主动脉中膜厚度比较,差异无统计学意义(F=0.8965,P=0.4302)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组的斑块易损指数降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,瑞舒伐他汀组的血管钙化面积降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论瑞舒伐他汀对ApoE-/-基因敲除动脉粥样硬化小鼠可改善其斑块易损性和血管钙化程度,并具有抗动脉粥样硬化斑块沉积作用。

综合放血法所致血虚证小鼠模型的比较研究

目的通过比较不同造模参数的综合放血方法,确定血虚模型的最优造模参数,为该方法的可重复标准化提供数据支持。方法将100只ICR小鼠随机分为5组:正常对照组(n=20)、模型组A(每日游泳15 min+隔日放血0.3 ml,n=20)、模型组B(每日游泳10 min+隔日放血0.3 ml,n=20),模型组C(每日游泳15 min+隔日放血0.5 ml,n=20)以及模型组D(每日游泳10 min+隔日放血0.5 ml,n=20),造模9 d后取胸腺、脾脏以及血液,测定5组小鼠的体重、免疫器官指数、死亡率、血常规指标、血清免疫因子白细胞介素-6(IL-6)水平及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。结果模型组A、B、C、D小鼠造模9 d后的体重、免疫器官指数、血常规指标(红细胞、白细胞、血红蛋白和血小板)、血清IL-6水平和红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组B小鼠造模9 d后的死亡率低于模型组A、C和D,差异有统计学意义(P<0.05)。结论每日游泳10 min+隔日放血0.3 ml为较优的中医血虚证候模型的造模参数。

基于功能磁性材料和固相微萃取净化富集一体化的茶饮料中三唑类农药残留分析

构建了固相微萃取(SPME)富集与功能磁性材料净化相结合的一体化协同提取技术,并应用于茶饮料中三唑类杀菌剂的残留分析。以磁性材料四氧化三铁-N-丙基乙二胺(Fe3O4-PSA)为净化吸附剂,采用SPME萃取针富集样品溶液中的目标农药后直接进气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)进样口解吸附、分析,无需其他样品转移等操作,方法简便、灵敏。本研究系统优化了SPME条件(如萃取时间、萃取温度、氯化钠用量及pH值),并采用正交试验设计,探明了磁性材料用量与SPME条件的交互影响,以确定最佳试验条件。对优化的分析方法进行方法确证,结果表明:在0.002~0.2 mg/L范围内,19种三唑类农药在茶饮料中均表现出很好的线性关系,相关系数(r)均大于0.99,检出限(LOD)在0.00012~0.0089 mg/L之间,定量限(LOQ)均为0.002 mg/L。采用基质匹配标准溶液校正时,回收率在71%~98%之间,RSD不高于16%(n=3)。此方法较常规法简单、操作便捷、可靠,且环境友好,适用于茶饮料中三唑类农药残留的分析。

5种染色剂对枳砧纽荷尔脐橙根系AM真菌染色效果比较

以广西富川栽培的枳砧纽荷尔脐橙健康植株的根系为试验材料,探讨5种染色剂(苏丹红Ⅳ、酸性品红、苯胺蓝、台酚蓝和Quink牌纯黑墨水)对根系AM真菌染色效果的影响。结果表明,Quink牌纯黑墨水的染色效果最佳,根系AM真菌的菌丝、泡囊、丛枝等结构清晰可见,且不易褪色、操作简单、安全无毒,适用于根系AM真菌的染色和制片观察。研究也显示AM真菌在广西富川的枳砧纽荷尔脐橙根系上普遍存在。

复配酶法制备南极磷虾鲜味酶解液的工艺优化

以脱脂南极磷虾粉为原料,采用复配酶法制备鲜味酶解液。以感官评价、多肽得率、水解度等评价手段,进行外源酶的筛选及单因素实验。为进一步优化酶解液滋味,以呈鲜味的氨基酸总量为指标进行酶解工艺优化。结果表明:最佳酶解条件为:胰蛋白酶和胃蛋白酶复配比1:100,总加酶量为2800 U/g,料液比1:4 g·mL^(-1),酶解pH7.0,酶解温度40℃,酶解时间3 h,该条件下获得的酶解产物中鲜味游离氨基酸含量为331.79 mg/100 mL。除色氨酸外,其余八种必需氨基酸含量占总氨基酸的63.66%,游离苦味氨基酸占总氨基酸的27.83%,游离鲜甜味氨基酸占总氨基酸26.22%,与鲜味形成具有关键作用的游离谷氨酸和游离天冬氨酸共占总游离氨基酸的10.26%。本研究可为南极磷虾鲜味调味料等产品的开发提供理论基础和技术指导。

长春花接种丛枝菌根真菌对柑橘黄龙病菌的抑制效果

通过筛选获得具有显著促生和抗病能力的AM真菌菌株,为防治柑橘黄龙病提供理论依据和基础,并探索防治新途径。采用盆栽法,于长春花幼苗期分别接种17株AM真菌进行长春花农艺性状和对柑橘黄龙病的抗病性比较试验,研究不同丛枝菌根真菌菌株对长春花的促生效果及对柑橘黄龙病的抑制效果。结果表明,长春花接种AM真菌后,菌株GZ10、GZ5和JX70能显著促进植株生长,其中接种GZ10的株高和茎径分别比CK增加了23.1%和12.1%,接种GZ5的叶片数比CK增加了12.9%;接种菌株GZ1、BNMJ和PWJ有效提高了长春花对柑橘黄龙病的抗病和耐病能力,其相对防效分别为78.39%、66.87%和69.75%。

14种AM真菌对枳生长的影响

在盆栽条件下,以柑橘砧木枳(Fructus aurantii)幼苗为试验材料,在基质中接种从广西土壤中分离得到的不同丛枝菌根(AM)真菌菌株,探讨不同AM真菌对枳根系的侵染能力和植株生长的影响。结果表明:用于试验的14个AM真菌菌株均能与枳根系形成共生关系,平均侵染率为36.16%,其中侵染率最高的菌株是黄雷德克囊霉(Redeckera fulvum, Rf),侵染率高达92.83%,侵染率最低的菌株是副冠球囊霉(Glomus coronatum, Gc),侵染率仅为0.23%;接种黄雷德克囊霉、摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae, Fm2)和副冠球囊霉这3个菌株处理的枳植株的株高、茎粗、叶片数和叶柄长均高于CK,是枳的优势菌株,能促进枳的生长。

胶原蛋白凝胶软糖的研制

以胶原蛋白为功能原料,通过对比试验对凝胶剂进行最佳选择,结果表明,选择明胶和变性淀粉复配凝胶的软糖产品口感和稳定性最好。通过正交实验确定产品的最佳配方为：胶原蛋白粉6g,淀粉糖浆40g,白砂糖32g,明胶7g,变性淀粉3g,缓冲乳酸1.5g;在水分为7%的淀粉盘中干燥（28℃-30℃,RH45%）40h左右脱模除粉,所得软糖产品具有良好的质感,咀嚼性和口味接受度很高,综合品质较好。

氧嗪酸钾联合不同造模剂对小鼠高尿酸血症的尿酸值的影响

目的探讨氧嗪酸钾联合不同造模剂对小鼠高尿酸血症(HUA)尿酸值的影响,为早期HUA的防治和药物筛选提供参考。方法采用300 mg/kg氧嗪酸钾、500 mg/kg尿酸、500 mg/kg次黄嘌呤、250 mg/kg乙胺丁醇多个造模剂,对ICR小鼠进行HUA造模,通过不同时间段取血测定尿酸值,比较不同造模因素对血尿酸的影响。结果给予300 mg/kg氧嗪酸钾能使小鼠尿酸水平升高,但是不能维持尿酸的高水平状态;给予300 mg/kg氧嗪酸钾联合500 mg/kg尿酸溶液能使血尿酸水平升高,且上升幅度较大(上升幅度为207.2%),但同样不能维持尿酸的高水平状态;给予300 mg/kg氧嗪酸钾联合500 mg/kg次黄嘌呤溶液能使血尿酸水平升高,且上升幅度较大(上升幅度为384.4%),但同样不能维持尿酸的高水平状态;给予300 mg/kg氧嗪酸钾联合250 mg/kg乙胺丁醇溶液能使血尿酸水平升高,上升幅度较大(上升幅度为320.8%),且能稳定维持尿酸在高水平的状态。结论氧嗪酸钾联合乙胺丁醇可成功使ICR小鼠尿酸值升高,并稳定维持尿酸的水平,造模效果优于单独的氧嗪酸钾、氧嗪酸钾联合尿酸、氧嗪酸钾联合次黄嘌呤。

慢性心肌缺血不同造模方式的比较

目的比较两种不同慢性心肌缺血造模方式之间的差异及优劣情况。方法选取雄性ICR小鼠30只,根据造模方式的不同分为皮下注射组、缓释泵释放组、正常对照组,每组各10只。皮下注射组于小鼠腰背部皮下注射异丙肾上腺素(ISO)30 mg/(kg·d),连续注射14 d;缓释泵释放组于小鼠腰背部皮下埋入微量缓释泵,ISO释放量30 mg/(kg·d);正常对照组小鼠皮下注射等剂量生理盐水。采用心肌酶谱、心脏切片TTC染色等指标衡量小鼠的心肌缺血程度。结果皮下注射组与缓释泵释放组小鼠的造模死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05);皮下注射组与缓释泵释放组小鼠的心脏心肌肥大指数高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);皮下注射组与缓释泵释放组小鼠的心肌肥大指数比较,差异无统计学意义(P>0.05);缓释泵释放组小鼠的心肌缺血面积百分比高于皮下注射组,差异有统计学意义(P<0.05);缓释泵释放组小鼠的心肌酶谱各项指标和肌钙蛋白(cTnT)水平高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);皮下注射组小鼠的血清α-羟丁酸脱氧酶(α-HBDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及同工酶(mAST)、cTnT水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);皮下注射组小鼠的血清肌酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)、乳酸脱氧酶(LDH)水平与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);缓释泵释放组与皮下注射组小鼠的心肌酶谱各项指标及cTnT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论皮下注射及缓释泵释放ISO两种方式均可以造成小鼠心肌肥大,缓释泵释放则能更大程度上诱导小鼠出现心肌缺血,缓释泵释放同时在更大程度上造成了心肌功能的损伤。

高新技术企业研发项目费用核算与管理

为促进高新技术企业发展,国家出台了一系列的扶持高新技术企业发展政策措施,为使高新技术企业对有关优惠政策应享尽享,使政策落到实处,以及从高新技术企业长远发展、规范发展角度,如何做好研发项目费用管理工作是企业发展的重要方面。本文从高新技术企业研发项目费用的特点、项目费用管理存在的问题及解决措施角度进行探讨,希望能够促进高新技术企业研发项目费用管理的科学化和规范化。

人分泌型磷脂酶A2(hsPLA2-IIA)基因的克隆、表达及活性鉴定

目的为了构建人分泌型磷脂酶A2(secretaryphospholipaseA2,sPLA2-IIA)的有效表达系统,从胎脾中提取总RNA。方法采用RT-PCR方法扩增出编码sPLA2-IIA的基因定向地克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pET32a的TrxA基因3′末端,构建符合读码框的融合表达载体pET32a-sPLA2-IIA。37℃下经IPTG诱导,hsPLA2-IIA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物以包涵体的形式存在。包涵体经8mol/L尿素溶解、复性后检测结果显示具有较高的催化活性并呈现剂量依赖关系。结论以大肠杆菌为宿主,成功表达了hsPLA2-IIA蛋白,为进一步进行hsPLA2-IIA的大量生产和功能研究奠定了基础。

基于气味指纹技术的牛奶香精鉴别研究

奶味香精是现代食品工业非常重要且应用非常广泛的添加剂之一,不同类型牛奶香精的气味差异仅靠色谱技术和人工感官鉴别比较困难。为了建立奶味香精的气味指纹分析鉴别方法,本文以天然牛奶香精、复配牛奶香精、酶解奶油香精和实验室制牛奶香精为样品,分析了样品的挥发性化合物组成和气味指纹信息,比较了市面上常见几种奶味香精的气味差异,建立了基于气味指纹技术的奶味香精香料的鉴别研究方法。研究结果表明:气味指纹技术能准确区分和鉴别奶味香精的气味差别,识别效果显著。天然牛奶香精与实验室制牛奶香精在主要特征风味物质方面的相似度较高,复配牛奶香精的整体气味则和其他样品差异较大,分析数据表明天然牛奶香精的香味可能是酶解奶油产物经过进一步处理和修饰得到的。