基于国际化视角的动物医学专业临床教学改革与实践

面对全球一体化的浪潮,当代兽医面临更大的挑战。针对我国动物医学专业存在的问题,通过转变兽医教学理念,完善教学目标,重构兽医人才培养方案,创建“CLIPT·五位一体”教学体系,优化教学考核方法,形成了一套注重专业技能和职业素养,以学生为中心,以产出为导向,更符合学科专业特色、国内国际发展需求和实践育人要求的国际化人才培养体制,构建了基于国际化视角的动物医学专业临床教学体系,改革成果颇丰,为促进兽医教育国际化提供参考。

浙江遂昌地区同域分布猪獾与花面狸时空生态位比较

猪獾(Arctonyx collaris)与花面狸(Paguma larvata)是浙江遂昌山地小型食肉兽中的优势物种,具有相似的食性和环境选择。为探明同域分布的猪獾与花面狸的共存机制,于2020年6月至2022年6月,在浙江省遂昌县5个样区(白马山、千佛山、九龙山、牛头山和湖山)进行红外相机监测,选取相机布设位点71个,布设123台红外相机,总有效工作日19654个,独立有效事件2184次,使用物种分布模型和日活动节律模型对该地区的猪獾与花面狸的时空生态位进行分析。结果表明:(1)两者为当地中级捕食者中的优势物种,但猪獾(RAI=9.26)的相对多度指数高于花面狸(RAI=3.96);(2)两者对于生境选择具有较高相似性,空间生态位上的重叠系数为:D=0.783,I=0.960;(3)两者昼夜活动差异极显著(P<0.01),猪獾昼夜均有活动,花面狸主要在夜间活动。猪獾与花面狸在空间生态位上存在较大程度重叠,但在时间生态位上存在较大程度分化,表明两者之间倾向于通过反应性策略共存。本研究结果初步揭示了猪獾与花面狸的时空生态位特征与共存机制,为深入理解同域中级捕食者种间关系及区域内生物多样性的保护提供实例和理论参考。

动物肠缺氧模型研究进展

肠缺氧是肠组织氧气需求量高于供应量的病理现象,是多种肠道疾病的直接诱发因素、预警信号和关键特征之一。建立真实可靠的肠缺氧状态动物模型或者能模拟肠缺氧的细胞模型,对肠缺氧相关疾病的病理机制研究至关重要。本文综述了近年来适用于构建肠缺氧模型的方法,重点围绕循环性、化学性和环境性肠缺氧动物模型,物理法和化学法诱导的离体肠细胞缺氧模型和离体肠道类器官缺氧模型的构建策略、模型优劣及应用场景进行分析,为动物肠缺氧疾病的发病机制研究及治疗药物的发掘和临床药效学评价提供参考。

浙江舟山獐种群遗传多样性分析——以舟山林场为例

舟山为獐主要分布地区,多年来致力于獐种群保护工作。为掌握舟山林场獐种群的遗传多样性现状,为獐种群的健康状况提供依据,实验依据微卫星分子标记技术对其进行种群遗传多样性评估。结果表明:8个高多态性的微卫星位点中出现了2个纯和的位点;其余6个位点观测杂合度与期望杂合度分别在0.966~1.000和0.613~0.871,多态信息含量在0.530~0.848,平均近交系数在0.17~0.45。该獐种群的遗传多样性还处于较高水平,但出现了2个纯合子位点开始影响种质资源和种群稳定性,建议舟山林场引进新种群个体促进基因交流,维持种群遗传多样性。

过量重金属元素对动物生理毒性及作用机制的研究进展

饲料中重金属元素添加不当或过度使用会对动物生理健康造成极大的危害。过量重金属元素可对动物的机体组织、免疫系统、繁殖能力与生产性能产生负面影响。过量重金属元素的毒性主要表现为改变动物体内信号通路、诱发机体氧化应激以及对动物神经产生损伤。文章旨在分析过量重金属对动物健康的影响,探讨过量重金属的毒性作用及机制,为实际生产提供参考。

后生元的益生机制及其在动物生产中的应用前景

后生元是指对宿主健康有益的无生命微生物体和/或其代谢产物的总称,其主要成分包括磷壁酸、肽聚糖、有机酸、细菌素、胞外多糖和神经递质类物质等,这些物质具有调节肠道菌群平衡、增强肠粘膜屏障和免疫功能以及调节肠-脑轴等益生功能。相较于益生菌,后生元的化学结构明确、安全性更高、稳定性更强以及耐贮存等,因而逐渐被应用于医学和食品等领域,对其作用机制的研究也已成为热门。本文概述了后生元的定义、主要活性成分及益生机制研究进展,并展望其在动物生产上的应用前景。

益生菌通过肠-脑轴调控动物骨代谢的研究进展

近来,国内外研究发现肠道微生物与骨代谢密切相关,基于微生物-肠-脑轴研究益生菌对机体骨代谢的研究逐渐成为热点。本文基于肠-脑轴影响机体骨骼代谢,对益生菌通过调节肠道菌群结构产生神经递质、调节细胞免疫因子等影响代谢进行总结梳理,为相关骨骼疾病研究提供理论支撑,为动物生产提供参考。

温岭草鸡体尺和屠宰性能测定及相关性分析

温岭草鸡是浙江省优质地方品种,具有肉质好、口感佳等特点。本研究随机选择300日龄温岭草鸡公母各15只,进行体尺和屠宰性能测定并作相关性分析。结果显示,温岭草鸡胸深较大,体形紧凑,屠宰性能较好。胫围与屠宰指标相关程度高,除腹脂质量外,体尺与屠宰指标间均存在显著相关。

H3亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

H3亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染宿主广泛,具备跨物种传播的能力,不但造成了家禽的发病,还导致了多起人感染病例,具有重要的公共卫生意义。因此,有必要建立一种快速灵敏的H3亚型AIV的检测方法。本研究参考了GenBank近年来公开的H3亚型AIV HA基因序列,在保守区域设计一对特异性引物和Taq Man探针。通过对反应条件的优化,分别以cRNA阳性标准品和病毒核酸标准品为模板绘制标准曲线,建立了针对H3亚型AIV的荧光定量RT-PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性、重复性进行评估。进一步使用实验室攻毒鸡组织样品和临床拭子样品对该方法进行了验证。结果表明,该方法特异性强,与其他亚型AIV和常见禽类病原体均无交叉反应;检测下限分别为1.0×10^(2) copies·μL^(-1)和10^(2) EID 50·0.1 mL^(-1),灵敏度与常规RT-PCR相比提高了10倍;组内和组间变异系数均小于1.5%,重复性较好。动物攻毒临床试验样品和临床拭子样品检测结果显示,该检测方法敏感性高于普通RT-PCR方法,与病毒分离鉴定结果一致,符合率为100%,可用于临床检测。综上,本研究建立的H3亚型AIV荧光定量RT-PCR检测方法具备特异、快速、灵敏等特点,为H3亚型AIV的快速诊断和监测及防控提供一定的技术支持。

复方中草药对兔生长性能和肠道健康的影响

为了研究复方中草药对兔生长性能、免疫功能、肠道消化酶活性、抗氧化能力、肠道形态和肠道微生物的影响,本试验选取72只5周龄健康新西兰大白兔,随机分成对照组(CN,饲喂基础饲粮)和中草药组(CM,基础饲粮中添加600 mg/kg复方中草药),每组36只,试验周期为42 d。每周测定各组兔的采食量和体增重,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G);试验第21、42天,每组随机选择4只健康兔,采血分离血清,检测生化指标和免疫指标;试验结束(第42天),收集兔小肠肠段,通过ELISA检测小肠黏膜消化酶活性和抗氧化指标,苏木精-伊红(H.E.)染色观察小肠绒毛形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白mRNA的相对表达量,高通量测序分析盲肠微生物多样性。结果显示,两组间ADFI、ADG和F/G均差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,在试验第21天时,中草药组兔血清中总胆固醇(Tchol)含量极显著降低(P<0.01);在试验第42天时,中草药组兔血清中免疫球蛋白M(IgM)含量和回肠黏膜中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著升高(P<0.05);肠道中消化酶(α-淀粉酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶)活性显著升高(P<0.05);空肠中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05),十二指肠和空肠中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);空肠绒毛长度(V)显著增长(P<0.05),隐窝深度(C)显著降低(P<0.05),绒毛长度与隐窝深度比值(V/C)极显著升高(P<0.01);十二指肠中闭锁蛋白(Occludin)mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),回肠中膜周蛋白(ZO-1)和Occludin mRNA相对表达量也显著上调(P<0.05);盲肠内容物细菌16S rRNA基因的菌群丰富度指数(Chaol)丰度值显著升高(P<0.05);盲肠在属水平分类上的主要优势菌群为梭菌属(Clostridiales)和阿克曼菌属(Akkermansia)等。结果表明,兔日粮中添加中草药饲料添加剂能增强机体免疫力和抗氧化能力,维持肠道黏膜形态的完整,提高肠道消化酶活性,改善肠道菌群。

番鸭盲肠不同肠型特征及其与盲肠短链脂肪酸含量、屠宰性能的相关性研究

本试验旨在研究番鸭盲肠不同肠型特征及其与盲肠短链脂肪酸(SCFAs)含量和屠宰性能的关系。通过16S rRNA基因高通量测序,使用PAM算法将200只70日龄的番鸭盲肠菌群进行分型,测定不同肠型番鸭的生长性能、屠宰性能和盲肠中短链脂肪酸含量,在门和属水平上对不同肠型番鸭盲肠菌群结构和多样性进行分析,并对不同肠型番鸭盲肠差异菌属相对丰度与SCFAs含量的关系进行分析。结果显示:番鸭盲肠菌群分为2个肠型:以副拟杆菌属(Parabacteroides)为代表的肠型1(ET1)(n=165)和以梭杆菌属(Fusobacterium)为代表的肠型2(ET2)(n=35)。ET1番鸭盲肠菌群的Shannon指数显著高于ET2番鸭(P<0.05)。在属水平上,ET1番鸭盲肠菌群中拟杆菌属(Bacteroides)(29.33%)、未培养的瘤胃球菌科(Ruminococcaceae_uncultured)(4.83%)和副拟杆菌属(4.68%)的相对丰度较高;ET2番鸭盲肠菌群中拟杆菌属(20.71%)、梭杆菌属(14.56%)和副拟杆菌属(4.29%)的相对丰度较高。通过线性判别分析效应大小(LEfSe)比较分析发现,不同肠型之间的差异菌属包括粪杆菌属(Faecalibacterium)、丁酸球菌属(Butyricicoccus)和霍氏真杆菌群([Eubacterium]hallii group)等产丁酸菌。比较不同肠型番鸭盲肠中的短链脂肪酸含量发现,ET1番鸭盲肠中乙酸、丙酸和丁酸含量显著高于ET2番鸭(P<0.05),而ET1和ET2番鸭盲肠中异丁酸、戊酸和异戊酸含量均无显著差异(P>0.05)。进一步将ET1和ET2番鸭盲肠差异菌属相对丰度与短链脂肪酸含量进行Spearman相关性分析发现,粪杆菌属相对丰度与丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸含量均表现出显著正相关(P<0.05)。此外,比较不同肠型番鸭的屠宰性能发现,ET2番鸭的腹脂重和腹脂率显著高于ET1番鸭(P<0.05),而在屠体重、全净膛重、半净膛重、屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌重、腿肌重、胸肌率和腿肌率方面ET1和ET2番鸭均无显著差异(P>0.05)。由此可见,不同肠型番鸭盲肠菌群结构的差异可能造成其盲肠中短链脂肪酸含量差异,从而进一步对屠宰性能产生一定影响,该结果可为肠道微生物与宿主之间的互作提供新的见解。

影响H9N2亚型禽流感病毒生物学特性的关键氨基酸位点分析

H9N2亚型禽流感病毒是在我国家禽中流行最为广泛的亚型,严重影响养禽业健康发展,具有感染哺乳动物的能力。可感染人类的H5N1、H7N9、H10N8和H3N8等新型流感病毒中多次发现H9N2亚型禽流感病毒的内部基因,而这些感染人类的新型流感病毒对公共卫生安全造成了巨大威胁。文章围绕H9N2亚型禽流感病毒,总结了影响该亚型病毒致病性、受体结合、复制能力以及在家禽或哺乳动物中与传播有关的关键功能氨基酸位点突变的研究进展,以期进一步解析H9N2亚型禽流感病毒及其内部基因在新型流感病毒产生过程中的机制和作用。

中链脂肪酸、植物精油和益生菌对肉鸡生长、免疫、抗氧化和肠道菌群及肌肉品质的影响

试验旨在研究不同饲料添加剂(中链脂肪酸、植物精油和益生菌)对肉鸡生长、免疫、抗氧化、肠道菌群和肌肉品质的影响。选用480只1日龄健康白羽公肉仔鸡,随机分为4组,每组8个重复,每重复15只试验肉鸡。空白对照组饲喂基础饲粮,中链脂肪酸组在基础饲粮中添加中链脂肪酸(含辛酸20%、葵酸20%;前期1000mg/kg,后期500mg/kg),植物精油组在基础饲粮中添加200mg/kg植物精油(含肉桂醛69%、百里香酚21%、香芹酚10%),益生菌组在基础饲粮中添加300 mg/kg益生菌(含丁酸梭菌5×108 CFU/g、枯草芽孢杆菌5×109CFU/g)。试验期为42d。结果表明:与对照组相比,添加中链脂肪酸和植物精油提高了肉鸡体重和日增重(P<0.05),增加了血清中免疫球蛋白-A、白细胞介素-4含量(P<0.05),降低了白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-18含量(P<0.05),改善了血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力(P<0.05),降低了丙二醛含量(P<0.05),提高了肉鸡肠道绒毛高度和绒隐比(P<0.05);与对照组相比,中链脂肪酸、植物精油和益生菌均降低了肉鸡盲肠内容物中沙门氏菌和大肠杆菌的数量(P<0.05),中链脂肪酸和益生菌提高了盲肠内容物中乳酸菌的数量(P<0.05);中链脂肪酸和植物精油降低了肉鸡肌肉的L*值、蒸煮损失率、24 h和48 h滴水损失率(P<0.05);与益生菌组相比,中链脂肪酸和植物精油降低了肉鸡肌肉的48 h滴水损失(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加中链脂肪酸和植物精油可增加肉鸡日增重,改善肉鸡免疫功能、抗氧化功能、肠道形态结构、肠道菌群结构和肌肉品质,且饲喂效果优于益生菌。

牛结节性皮肤病免疫抗体监测的Meta分析

疫苗接种是预防牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)的重要措施,但是疫苗接种后诱导的体液免疫应答水平参差不齐,目前尚缺乏评价疫苗免疫效果的有效手段。本文使用R软件利用Meta分析对已发表的LSD免疫抗体监测结果进行统计,并进行亚组分析,综合评价免疫抗体监测的意义。通过计算机分别检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库、PubMed、Web of science等中英文数据库,检索时限截止至2023年7月,收集LSD免疫抗体监测的相关文献,根据制定的文献纳入与排除标准,共纳入符合筛选条件的文献24篇,涉及羊痘疫苗的文献共有13篇,涉及LSD疫苗的文献共有13篇,其中2篇文献同时涉及羊痘疫苗和LSD疫苗,包含8 638例样本,其中阳性样本2 782份,结局指标为免疫抗体阳性率。Meta分析结果显示,羊痘疫苗的免疫抗体水平为41%(95%CI:27%~55%),LSD疫苗的免疫抗体水平为73%(95%CI:64%~86%),各文献间的同质性较低,两种疫苗之间无显著性差异(P=0.59),与羊痘疫苗接种(P=0.12)和LSD疫苗接种(P=0.077)相关的文献均提示未存在明显发表偏移;按养殖环境和检测方法分类进行亚组分析,不同养殖环境(P=0.84)和检测方法(P=0.40)均无显著性差异,两亚组均非异质性的主要来源。本文结果提示,使用免疫抗体监测方法评价免疫效果存在较大的不确定性,在实际工作中需要综合分析研判。

细菌胞外囊泡与宿主的互作机制研究进展

细菌胞外囊泡(BEVs)是一类由细菌分泌的可携带和转运各种物质的纳米级颗粒,在母源细菌与宿主互作中发挥重要作用。研究发现,BEVs可携带母源细菌源抗原成分参与免疫反应信号通路,实现对宿主的免疫调节作用,为疫苗开发提供了新思路;肠道中的BEVs可刺激黏蛋白产生,增强肠道屏障效应、降低肠道炎症,既能作为修复肠炎患者肠道屏障功能的潜在药物,也可作为评估肠道损伤情况的标志物;BEVs还可通过调节糖和脂质代谢的信号通路调节宿主代谢。反过来,宿主也能影响细菌及其BEVs的分泌。本文综述了BEVs的组成及其在宿主免疫调节、肠道屏障功能和代谢过程中作用机制,以期为BEVs在临床和生产应用中提供参考。

白术和酸枣仁提取物对大肠杆菌的抑菌活性研究

药用植物是天然抗生素的潜在来源之一,具有良好的抑菌作用。白术和酸枣仁是富含多种生物活性物质的药用植物,其对大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制作用尚未在体外模型中进行评估。本试验旨在探究白术和酸枣仁提取物对大肠杆菌的抑菌效果。采用微量肉汤法测定白术、酸枣仁提取物单独和联合作用对大肠杆菌的亚抑菌浓度并绘制抑菌曲线;用酶标仪微量法测定OD260和OD280数值、碱性磷酸酶(AKP)活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性;用SDS-PAGE凝胶电泳法检测大肠杆菌菌体总蛋白;采用结晶紫染色测定白术和酸枣仁提取物对大肠杆菌生物膜的作用。结果显示:与对照组相比,0.8 mg/mL白术和酸枣仁提取物单独处理及0.4 mg/mL白术和酸枣仁提取物、联合处理均显著抑制大肠杆菌生长、增加OD260、OD280数值及AKP活力,降低菌体胞内总蛋白含量,并且对生物膜具有破坏作用;此外,与对照组相比,白术提取物单独处理和白术、酸枣仁提取物联合作用显著降低LDH活性。以上结果表明,白术、酸枣仁提取物单独及联合作用对大肠杆菌均有抑制作用,且联合处理抑菌效果较单独处理更为明显。

地衣芽孢杆菌对黄羽肉鸡生长性能、免疫能力、抗氧化功能和肠道菌群的影响

试验旨在探究日粮添加地衣芽孢杆菌对黄羽肉鸡生长性能、免疫能力、抗氧化功能和肠道形态及盲肠菌群结构的影响。选用1日龄健康、平均初重为(32.39±0.37)g的雄性岭南黄羽肉仔鸡360只,随机分为3组,每组8个重复,每重复15只鸡。对照组饲喂基础日粮(对照组),BL500组、BL1000组在基础日粮中分别添加500、1 000 mg/kg地衣芽孢杆菌(活菌数1×10^(9) CFU/g),试验期56d。结果表明:与对照组相比,添加500 mg/kg和1 000 mg/kg地衣芽孢杆菌均可增加黄羽肉鸡的末体重(FBW)和平均日增重(ADG)(P<0.05),提高肉鸡血清免疫球蛋白M(IgM)含量和血清总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),降低血清白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和丙二醛(MDA)含量(P<0.05),增加空肠绒毛高度(VH)(P<0.05),提高了肉鸡盲肠中微生物丰富度和多样性(P<0.05),降低了厚壁菌门和另枝菌属的相对丰度(P<0.05);饲粮添加1 000 mg/kg地衣芽孢杆菌组肉鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和空肠绒毛高度与隐窝深度比值(VH/CD)高于对照组(P<0.05)、血清白介素1β(IL-1β)含量低于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮添加地衣芽孢杆菌可调节厚壁菌门和另枝菌属的相对丰度,提高血清免疫力和抗氧化能力,改善肠道形态结构,进而提高黄羽肉鸡生长性能,且饲粮添加1 000 mg/kg较500 mg/kg地衣芽孢杆菌效果更优。

湖羊公羔体重与体尺的主成分分析及回归模型的建立

为研究湖羊体重和体尺性状的关联,试验选取浙江省内湖羊种羊场80只6月龄湖羊公羔,分别测定其体重和11个体尺性状并进行相关性、主成分分析及建立回归模型。结果表明:湖羊公羔的体重、尾长、尾宽、尾周长、肥周长、胸宽以及睾丸围的变异系数均大于10%;羔羊体重与除体高外所有体尺指标呈显著正相关,胸围与体重间的相关系数最大,其次为体斜长和管围,睾丸围与体重间的相关系数最小。在主成分分析中,12个性状可简化为3个主成分指标,相关矩阵特征值为4.286、2.131和1.552,累计贡献率为66.408%。使用体尺指标建立体重的最优回归方程为Y=-56.55+0.65×X1+0.671×X2(Y为体重,X1为胸围,X2为体斜长),R^(2)=0.727,P<0.01。综上,在针对湖羊公羔选育时,可将多个性状简化为综合指标以提高育种效率;逐步回归分析的结果提示,胸围和体斜长可作为重要性状进行选育。

干酪乳杆菌YG-01株的益生特性及抑菌活性研究

[目的]评价从奶酪中分离出的干酪乳杆菌YG-01的益生性及抑菌活性,为该菌株在食品动物生产中的应用提供理论参考。[方法]本研究分别检测干酪乳杆菌YG-01株的药物敏感性、肠道定植能力、消化道环境耐受特性、肠道菌群调节作用、抑制肠道致病菌活性及促生长作用。[结果]药敏试验结果显示,干酪乳杆菌YG-01对米诺环素、红霉素、克拉霉素、克林霉素、青霉素等常见抗生素极敏感;利用探针(carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester, cFDA-SE)标记的干酪乳杆菌YG-01灌喂试验兔,口服后第1天,干酪乳杆菌YG-01在兔空肠、回肠和结肠的检出率分别为70.9%、59.3%和66.0%,口服后第11天时仍保持较高定植水平(>35%);干酪乳杆菌YG-01的活菌数在模拟胃液(pH为2.5、3.5、4.5)、模拟肠液、胆酸盐浓度<2 g/L及在9%NaCl溶液中均高于1×105CFU/mL;体外抑菌试验结果显示,干酪乳杆菌YG-01能显著抑制大肠埃希菌O157、小肠结肠炎耶尔森菌、沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌等肠道致病菌生长,而对益生菌罗伊乳杆菌无抑制作用;口服干酪乳杆菌YG-01能极显著提高兔的平均日采食量和平均日增重,还可显著抑制厚壁菌门和疣微菌门细菌增殖。[结论]干酪乳杆菌YG-01株具有良好的益生性,可显著抑制肠道致病菌的增殖,改善食品动物生长性能,为开发基于干酪乳杆菌YG-01株的微生态制剂奠定了基础。

miR-127调控绵羊骨骼肌细胞增殖分化及其转录因子PAX3筛选

旨在探究miR-127对绵羊骨骼肌成肌细胞增殖与分化的影响,并通过鉴定miR-127上游核心启动子区域筛选调控其表达的转录因子。本研究以体外分离培养的小尾寒羊胎羊骨骼肌原代成肌细胞为试验材料,过表达或干扰miR-127后,采用RT-qPCR、EdU染色、流式细胞仪分析、免疫荧光染色等方法探究miR-127对绵羊成肌细胞增殖、凋亡和分化的影响。基于生物信息学分析和双荧光素酶报告试验预测并鉴定绵羊miR-127核心启动子区域及其转录因子。结果表明,在绵羊成肌细胞中过表达miR-127后,促进了细胞增殖相关基因PCNA、CDK4的表达(P<0.01);抑制了细胞凋亡相关基因Caspase3、BAX的表达(P<0.05);EdU结果显示,绵羊成肌细胞中过表达miR-127后,细胞阳性率显著提升(P<0.05);流式细胞仪分析显示,miR-127过表达可显著增加成肌细胞S期和G2期细胞比例并减少成肌细胞的凋亡。在细胞分化试验中,过表达miR-127显著增加了成肌细胞分化相关基因MYOD1和MYHC mRNA的表达水平(P<0.05),显著增加了MYHC的阳性肌管面积(P<0.05)。抑制miR-127表达则出现与上述相反的结果。为进一步揭示调控miR-127表达的调控因子,双荧光素酶活性检测结果显示,miR-127上游1 500~1 800 bp(miR-127-P6)区段活性最高,推断其为miR-127的核心启动子区。生物信息学预测表明,在miR-127核心启动子区存在一个与转录因子PAX3的结合位点。在绵羊成肌细胞中过表达转录因子PAX3后,miR-127启动子活性和miR-127的表达均极显著增加(P<0.01)。本研究表明,绵羊miR-127显著促进绵羊骨骼肌成肌细胞增殖分化,减少了成肌细胞凋亡,进而参与骨骼肌成肌细胞的发育过程;进一步研究发现,绵羊miR-127上游的1 500~1 800 bp是其核心启动子区,转录因子PAX3正向调节miR-127的转录。本研究为进一步探究绵羊肌肉生长发育性状的分子机制提供了理论参考。