甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA表达水平研究

目的和方法：本实验室曾报道，低浓度０－２ μｍｏｌＬ 烷化剂甲基硝基亚硝基胍（ Ｎ－ ｍｅｔｈｙｌ－ Ｎ′－ ｎｉｔｒｏ － Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ ， ＭＮＮＧ） 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制，本文利用定量ＲＴ－ ＰＣＲ 方法，研究了该低浓度ＭＮＮＧ 对人ＨｅＬａ 及猴肾ｖｅｒｏ 细胞ＤＮＡ 聚合酶β（ｐｏｌ β） ｍ ＲＮＡ 表达水平的影响。结果：经０－２ μｍｏｌＬ ＭＮＮＧ２ ．５ ｈ 处理后，ＨｅＬａ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在６ ～２４ ｈ 内升高约１ 倍；而ｖｅｒｏ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在１２ ～３０ ｈ 内亦升高１倍左右。结论：提示ｐｏｌ βｍＲＮＡ 水平改变可能参与ＭＮＮＧ

甲基硝基亚硝胍诱发的遗传不稳定Vero细胞中错配结合蛋白的研究

应用凝胶阻滞技术（gelretaldation），在甲基硝基亚硝胍（MNNG）诱发的遗传不稳定的Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）抽提物中，发现存在特异性针对G·T的错配结合蛋白（mismatchbindingprotein），能选择性识别DNA中的G·T错配，并与之结合.经与正常Vero细胞相比较，证实其功能并无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。

MNNG诱发的遗传不稳定vero细胞中错配修复功能的研究

在MNNG诱发的延迟发生的,以非定标性突变形成为特征的遗传不稳定vero细胞抽提物中,应用凝胶阻滞和体外错配修复技术,发现仍存在特异性针对G·T的错配结合蛋白,能选择性识别并结合DNA中的G·T错配;同时发现在该细胞核抽提物中G·T错配能被有效、特异地修复成G·C。经与正常vero细胞比较,证实二者功能均无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白及G·T错配修复功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。