神经系统疾病的基因治疗

神经系统疾病的基因治疗姜亚军丁德云审校浙江医科大学神经生物学实验室３１０００９何家声南京铁道医学院神经内科２１０００９基因治疗是指应用基因工程和细胞生物学技术，将功能正常的基因转移到病变细胞或者体细胞中，通过导入基因的表达，补充或修正丧失正常功能蛋白...

速激肽NK-1受体拮抗剂SR-140333对抗原引起致敏大鼠气道高反应性的影响

为观察速激肽ＮＫ１受体拮抗剂ＳＲ１４０３３３对抗原攻击引起的致敏大鼠气道高反应性的影响，测定了致敏大鼠在抗原攻击前后的基础呼吸频率，对ＭＣｈ的反应性及支气管肺泡灌洗液中的白细胞数量。实验结果显示，致敏大鼠吸入ＯＡ后６ｈ基础呼吸频率增加，并显著增加乙酰甲胆碱（ＭＣｈ）的反应性、ＭＣｈ的－ｌｏｇＰＣ３０值和支气管肺泡灌洗液中的白细胞数量。ｉｐ速激肽ＮＫ１受体拮抗剂ＳＲ１４０３３３（０１ｍｇ·ｋｇ－１）或地塞米松（０５ｍｇ·ｋｇ－１），可明显抑制上述反应，小剂量ＳＲ１４０３３３（００１ｍｇ·ｋｇ－１）仅有部分抑制作用。结果提示抗原攻击可引起致敏大鼠气道高反应性和气道炎症。

大鼠哮喘模型中气道炎症的定量研究

作者建立了一种SD大鼠的过敏性哮喘炎症模型的定量分析方法，用卵白蛋白（OA）低剂量多点皮下注射法致敏SD大鼠，2周后气雾吸入1％OA15min，吸入后6h和24h可见支气管-肺泡灌洗液中的白细胞计数显著增加，其中嗜酸性粒细胞增加较明显；肺切片显示细支气管和小血管周围水肿、大量嗜酸性粒细胞渗出浸润；计算机图象分析表明，细支气管管壁面积及管壁单位面积内嗜酸性粒细胞数增加显著。结果表明，抗原可诱导SD大鼠气道过敏性炎症，可以作为研究过敏性支气管哮喘的动物模型。

阿魏酸钠对血小板促肥大细胞释放组胺的影响

观察血小板激活前后对肥大细胞释放组胺的影响，发现致敏血小板激活后，与肥大细胞混合，其组胺释放率为８２．３％±５．７％；比未致敏血小板与肥大细胞混合后的组胺释放率５９．０％±９．０％有显著增高（Ｐ＜０．０１），用阿魏酸钠２３ｍｏｌ·Ｌ－１处理血小板后，用药组的肥大细胞组胺释放率３３．４±１５．８％比用药前显著下降（Ｐ＜０．０１），而阿魏酸钠对肥大细胞自身的组胺释放率影响不大，说明阿魏酸钠主要通过抑制血小板激活，而参与抗过敏作用的。

几种药物对大鼠过敏性气道炎症的抑制作用

在Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠过敏性气道炎症模型上观察不同药物的抗炎作用。ｉｐ地塞米松（０．５ｍｇ·ｋｇ－１），粉防己碱（３０ｍｇ·ｋｇ－１）以及非肽类神经速激肽受体拮抗剂ＣＰ－９６３４５和ＳＲ－４８９６８（各１ｍｇ·ｋｇ－１），每日２次，连续３ｄ，可抑制卵白蛋白１ｍｇ致敏大鼠吸入抗原后６ｈ或２４ｈ肺灌洗液中的白细胞数量增多，明显减轻细支气管和小血管周围嗜酸性细胞浸润及管壁水肿等炎症状况。结果证明大鼠模型可以作为评价平喘药作用的工具，并提示速激肽参与气道过敏性炎症。

速激肽受体拮抗剂对豚鼠组胺反应的影响

目的：探讨速激肽与组胺（Ｈｉｓ）反应的关系。方法：观察速激肽受体拮抗剂对豚鼠Ｈｉｓ的整体和离体的呼吸道和心血管效应。结果：单用或合用速激肽ＮＫ－１受体拮抗剂ＣＰ－９６３４５（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）及ＮＫ－２受体拮抗剂ＳＲ－４８９６８（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）均可显著降低清醒豚鼠吸入Ｈｉｓ气雾的气道反应性。ＣＰ－９６３４５（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）可显著降低静脉注射Ｈｉｓ引起麻醉豚鼠支气管和心房的伊文思蓝渗出，ＳＲ－４８９６８（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）则对肺内压升高有较弱的抑制作用，两药对平均动脉压降低无明显作用。在豚鼠的离体气管和支气管平滑肌标本，ＣＰ－９６３４５（１μｍｏｌ·Ｌ－１）及ＳＲ－４８９６８（１μｍｏｌ·Ｌ－１）对Ｈｉｓ的Ｅｍａｘ及ｐＤ２无明显作用。结论：速激肽部分参与了豚鼠的Ｈｉｓ炎症反应，速激肽受体拮抗剂有抗炎作用。

血小板对豚鼠离体气道高反应性的作用

作者观察血小板激活后对致敏豚鼠气道高反应性的作用，发现致敏血小板激活后，与豚鼠离体气道共浴５ｍｉｎ，分别用特异抗原（ＯＡ）和氨甲酰胆碱（ＣＣｈ）攻击，气道对ＯＡ和ＣＣｈ的反应性增高；而豚鼠耗竭９０％以上血小板后的气道对ＯＡ及ＣＣｈ的反应性降低。

空气湿度对致敏小鼠气道反应性的影响

采用镇静小鼠气道反应性测定方法，观察不同空气相对湿度下致敏小鼠对乙酰甲胆碱（MCh）的反应性。结果表明，致敏小鼠对MCh的反应性与空气湿度相关，在相对湿度较低时气道反应性高，相对湿度较高时气道反应性低。因此进行与气道反应性有关的某些实验，如小鼠哮喘实验时应注意空气湿度的影响，用本方法测试时以空气相对湿度在55％～75％时为宜。

速激肽受体拮抗剂对白三烯C_4引起的豚鼠心血管反应的抑制作用

ｉｖ白三烯Ｃ４（ＬＴＣ４）０．８ｎｍｏｌ·ｋｇ－１引起麻醉豚鼠血压降低和心脏微血管依文思蓝渗出增加。速激肽ＮＫ－１受体桔抗剂ＣＰ－９６３４５（２．０６ｕｍｏｌ·ｋｇ－１，ｉｖ）和ＮＫ－２受体桔抗剂ＳＲ－４８９６８（１．６６ｕｍｏｌ·ｋｇ－１，ｉｖ）部分抑制心房微血管渗漏（分别为４６．６％和３７．５％）；两药合用可明显抑制ＬＴＣ４引起的低血压和心房、心室微血管渗漏（分别为５８．１％和５４．ｌ％），其作用与白三烯特异性桔抗剂ＯＮＯ－１０７８（０．０６ｕｍｏｌ·ｋＧ－１．ｉｖ）相似。结果表明速激肽ＮＫ－１和ＮＫ－２受体可能参与白三烯引起的低血压和心脏炎症反应。

白三烯拮抗剂ONO－1078对豚鼠离体气道平滑肌的作用

白三烯拮抗剂ＯＮＯ－１０７８（１μｍｏｌ／Ｌ）使卵白蛋白（ＯＡ）引起的致敏豚鼠气管和肺条收缩持续时间缩短，并抑制肺条的收缩强度，预先加入扑尔敏后更明显；对组胺（Ｈｉｓ）和氨甲酰胆碱（ＣＣｈ）收缩作用的量效曲线无明显影响，但使Ｈｉｓ的作用持续时间缩短；还抑制辣椒素（Ｃａｐ）引起的支气管收缩；对Ｐ物质（ＳＰ）的收缩作用无影响。结果提示，ＯＮＯ－１０７８抑制抗原和Ｈｉｓ诱导的气道平滑肌收缩的维持，并减弱气道平滑肌神经原性反应。

血小板在气道速发型过敏反应中的作用及阿魏酸钠的影响

应用特异的兔抗豚鼠血小板血清耗竭脉鼠血小板，再予以卵白蛋白攻击后，诱发气道速发型变态反应，发现血小板耗竭后可明显抑制卵白蛋白所致的肺阻力增高，但对肺动态顺应性无明显影响，说明血小板在豚鼠气道速发型变态反应中起主要作用，推测其作用部位主要在大气道血小板活化因子的拮抗剂ＷＥＢ２０８６不能对抗卵白蛋白所致的肺阻力增高和肺动态顺应性的下降，而阿魏酸钠对此有抑制作用。

速激肽NK-1受体拮抗剂CP-96345对抗原诱发的豚鼠心血管反应的影响

目的：探讨内源性速激肽是否参与抗原诱导的豚鼠心血管反应。方法：观察速激肽ＮＫ－１受体拮抗剂ＣＰ－９６３４５对ｉｖ抗原（卵白蛋白，ＯＡ）或Ｐ物质（ＳＰ）引起致敏豚鼠血压变化及不同组织伊文思蓝渗出的影响。结果：ＯＡ（５ｍｇ·ｋｇ－１）或ＳＰ（２μｇ·ｋｇ－１）均引起麻醉豚鼠血压降低；支气管、肺内气道、心房、心室、耳廓和膀胱的伊文思蓝渗出增加。ＣＰ－９６３４５（０．３，１．０ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）不影响ＯＡ诱导的低血压反应，但可浓度依赖性抑制ＯＡ引起的支气管和肺内气道微血管渗漏；同时能阻断ＳＰ引起的低血压和各组织微血管渗漏反应。结论：抗原诱导的气道微血管渗漏反应与内源性速激肽有关。

一氧化氮与脑缺血的损伤及保护

在机体内，Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）通过一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的催化，生成一氧化氮（ＮＯ）。近年来，随着对脑缺血损伤发病机制的深入研究，ＮＯ及ＮＯＳ的作用正日益受到重视。在中枢神经系统中含有３种ＮＯＳ，包括神经元型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）、诱生型ＮＯＳ（ｉＮ...

速激肽受体拮抗剂研究近况

速激肽受体拮抗剂分为NK－1、NK-2、NK-1／NK－2和NK－3受体拮抗剂四类；对于前三类已开发了相应的高选择性高效非肽类或环肽类拮抗剂。这些拮抗剂在支气管哮喘、炎症、疼痛、咳嗽和呕吐等的防治方面已显示一定的应用前景。

白三烯拮抗剂ONO－1078对辣椒素和P物质诱导豚鼠支气管收缩和微血管渗漏的作用

目的：探讨白三烯特异性拮抗剂４氧８［对（４苯丁氧基）苯甲酰氨基］２（５四唑基）４Ｈ１苯并吡喃半水合物（ＯＮＯ１０７８）对气道辣椒素敏感的感觉神经功能的调节作用．方法：观察豚鼠肺内压（ＩＰＰ）、伊文思蓝渗出量和离体支气管平滑肌收缩反应．结果：辣椒素（Ｃａｐ，００５ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）、Ｐ物质（ＳＰ，１μｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）和白三烯Ｃ４（ＬＴＣ４，０５μｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）增高ＩＰＰ和支气管及肺内气道伊文思蓝渗出量，ＯＮＯ１０７８（００３ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ）完全阻断ＬＴＣ４的作用，减弱Ｃａｐ的作用，但不影响ＳＰ的作用．ＯＮＯ１０７８（１μｍｏｌ·Ｌ－１）还显著抑制Ｃａｐ收缩支气管平滑肌，对ＳＰ无效．结论：ＯＮＯ１０７８通过抑制感觉神经肽释放而部分抑制Ｃａｐ的作用．

速激肽受体拮抗剂对豚鼠离体气道平滑肌的作用

速激肽NK－2受体拮抗剂SR－48968（1μmol／L）能抑制抗原（OA，10mg／L）诱导的气管和支气管平滑肌收缩；NK－1受体拮抗剂CP－96345（1μmol／L）仅抑制支气管的收缩．两药均抑制辣椒素和P物质引起的支气管平滑肌收缩，对组胺和氨甲酸胆碱引起气管、支气管收缩作用无明显影响．结果证明速激肽参与抗原诱导的气道平滑肌收缩，速激肽受体拮抗剂具有抗过敏性哮喘的作用．