髓源性抑制细胞监测在评估中晚期肝癌TACE预后中的临床价值

目的探讨髓源性抑制细胞(MDSC)监测在评估中晚期肝癌TACE预后中的临床价值。方法回顾性分析2012年8月至2017年12月收治于浙江大学丽水医院的40例中晚期肝癌患者。根据MDSC的ROC曲线,将所有患者分为低MDSC组和高MDSC组,K-M分析患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。Cox回归分析患者预后的独立危险因素。结果高MDSC组和低MDSC组患者在甲胎蛋白(AFP)水平、肝硬化、肝内转移及巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期的差异具统计学意义(P<0.05)。低MDSC组的PFS(P=0.03)、OS(P=0.0025)显著优于高MDSC组。低MDSC组患者术后6个月、1年、2年的累计PFS及术后1、2和3年的累计生存率显著优于高MDSC组(P<0.05)。Cox多因素分析显示,MDSC、肝硬化、BCLC分期是中晚期肝癌患者TACE后OS的独立预后预测因子。结论MDSC表达水平能够作为中晚期肝癌TACE预后的独立预测因子。

2016年—2021年丽水市社区获得性腹泻患者病毒检测及流行病学特征分析

目的分析丽水市社区获得性腹泻患者常见病毒的流行病学特征,为临床抗感染治疗和疫情防控提供依据。方法随机收集浙江大学丽水医院门诊腹泻患者的大便标本,采用ELISA法检测A组轮状病毒(RV),以多重PCR法检测B/C组轮状病毒、诺如病毒GⅠ/GⅡ型(NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)、札如病毒(SAPO)、星状病毒(AstV)和肠道腺病毒(EAdV),分析本地区肠道病毒分布特征。分析RV和EAdV 2种病毒在不同性别、年龄、时间和气温的发病率。结果共收集腹泻患者大便标本601份,病毒总体检出率为10.48%;其中NoV、RVA、EAdV、AstV和SAPO的构成比依次为42.29%、25.40%、20.63%、19.05%和4.76%,未见B/C组轮状病毒。共收集腹泻患者RV和EAdV抗原筛查结果8542例,二者总体阳性率分别为14.60%和3.69%。婴幼儿中,RV发病率在1岁~3岁最高,是其他年龄段的3.4倍(P<0.001);而EAdV感染阳性率却随年龄增长逐年升高。RV感染主要集中在12月—来年3月,占总数的86.61%,且人数与月平均气温高度成负相关(P<0.01);尤其日平均气温为4℃~16℃时,RV感染的相对危险度达4.81(4.26~5.42)。结论丽水地区社区获得性腹泻患者病毒感染以RV和NoV为主,日平均气温4℃~16℃是1岁~3岁婴幼儿感染RV的高危因素。

丽水地区腹泻患儿粪便轮状病毒及腺病毒流行病学分析

目的通过对丽水地区部分腹泻患儿粪便的轮状病毒(Rotavirus,RV)和腺病毒(Adenovirus,Adv)感染情况的分析,探讨本地区导致婴幼儿腹泻常见病原体的流行特征。方法收集2016年1月-2017年12月医院就诊的2951例腹泻患儿粪便,利用胶体免疫层析技术,快速诊断患儿粪便里的RV和Adv抗原,并对结果进行统计分析。结果腹泻患儿的粪便中,轮状病毒检出529例,感染率17.93%;腺病毒检出107例,感染率3.63%;轮状病毒和腺病毒双重感染55例,感染率1.86%;本地区轮状病毒感染的高发月份是11月至次年2月,以12月份最高,阳性率34.75%(P<0.001);腺病毒感染的高发月份是5月、6月,阳性率分别为22.32%、20.43%(P<0.001);轮状病毒和腺病毒双重感染的高发月份是12月至次年1月、阳性率分别为6.36%、4.20%(P<0.001),其中轮状病毒感染率随患儿年龄增加而下降(P<0.001),(6~12)月龄组患儿轮状病毒感染率最高。结论轮状病毒和腺病毒为本地区致儿童腹泻的主要病原体,并且发病具有明显的季节性,尤其要重视(0~12)月龄的婴幼儿腹泻感染轮状病毒和腺病毒的检查,选择快速准确的诊断方法,对于临床的诊治非常必要。

人巨细胞病毒DNA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用

目的探讨小儿血液、尿液及其母亲母乳的人巨细胞病毒DNA检测结果在人巨细胞病毒感染的诊断价值。方法选取2017年-2018年期间在浙江大学丽水医院就诊的疑似人巨细胞病毒感染的患儿328例为研究对象。收集患儿血液、尿液和对应母乳标本,进行实时荧光定量PCR,检测人巨细胞病毒DNA载量;再将患儿血清用化学发光法检测HCMV-IgM,比较不同标本不同检测方法的阳性率。针对阳性患儿,对不同临床症状分布构成进行分析。结果 328例患儿检测总阳性率为71.04%,男性患儿和女性患儿阳性率分别为71.02%和69.74%,差异无统计学意义(χ~2=0.065,P=0.799)。血液、尿液和乳汁的人巨细胞病毒阳性率分别为49.09%、70.43%和58.23%,尿液阳性率最高,差异有统计学意义(χ~2=31.147,P<0.001)。新生儿组的乳汁阳性率最高,为72.41%,28 d到1岁之间和1岁以上患儿尿液阳性率最高,各年龄组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05);血人巨细胞病毒DNA和血清HCMV-IgM阳性率检出率分别为49.09%(161/328)和16.16%(53/328),2种方法联合检测的阳性检出率为49.69%,对比单一血DNA检测方法,两者差异无统计学意义(P>0.05)。临床症状小于1岁患儿主要以黄疸,腹泻为主,大于1岁的患儿主要以肝损害和肺炎为主。结论在小儿血液、尿液及其母亲母乳HCMV-DNA的检测中,尿液HCMV-DNA对诊断患儿人巨细胞病毒有更好的临床应用价值。且尿标本留取方便、无创,易为家长和小儿接受,所以采用FQ-PCR方法对小儿尿标本进行检测能起到快速、简洁、灵敏的作用,对提高HCMV感染的诊断率有实际的临床意义,对于小月龄患儿临床应推广尿液HCMV-DNA检测。

基于TCGA数据肺腺癌内源竞争性RNA网络构建与分析

目的肺癌发生和发展是一个多基因参与、长时间演变的复杂过程。因此有必要对肺癌分子机制进行系统研究。本研究采用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)、信使RNA(messenger RNA,mRNA)和微小RNA(microRNA,miRNA),构建基因间调控网络,并进一步筛选和分析与患者生存预后相关的RNA分子,为肺腺癌分子标志物及治疗靶点的发掘提供依据。方法TCGA数据库获得535例肺腺癌样本和59例正常肺组织样本的RNA测序(RNA sequencing,RNA-Seq)数据,521例肺腺癌样本和46例正常肺组织样本的miRNA-seq数据以及522例肺腺癌患者临床信息进行分析。使用R语言中的“DESeq”鉴定差异表达RNA。通过miRcode数据库预测差异表达的lncRNA和miRNA之间的相互作用,并根据TargetScan、miRTarBase和miRDB数据库进一步检索miRNA靶向的mRNA。基于RNA间的相互作用构建lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络。使用DAVID 6.8和R语言中的“clusterprofiler”对网络中mRNA基因功能和信号通路进行富集分析。采用Kaplan-Meier生存分析差异表达的RNA与肺腺癌患者生存预后的关联性。采用多因素Cox风险回归筛选出影响肺腺癌患者总体生存率的独立RNA分子。结果数据分析结果表明共有lncRNA 1647个、miRNA 120个和mRNA 2503个在肺腺癌中差异表达,差异倍数>2,P<0.01。经RNA间相互作用分析结果表明这些差异表达的RNA中有lncRNA 138个,miRNA 22个和mRNA 36个参与了ceRNA网络构建。36个mRNA主要富集于11个生物学进程和5个细胞信号通路中,P<0.05。Kaplan-Meier生存分析表明,LINC00518(P<0.001)、AP002478.1(P=0.011)等31个LncRNA;CCNB1(P<0.001)、CHEK1(P=0.005)等16个mRNA以及1个miRNAhsa-mir-31(P=0.021)与肺腺癌患者总体生存率有关联。多因素Cox回归分析结果表明,患者TNM分期,LINC00221、UCA1、STEAP2-AS1、LINC00518、E2F7、DLC1、CCNE2和SALL1可作为肺腺癌患者预后的独立危险因素(HR>1,P<0.05),而MED4-AS1和CLSPN可作为肺腺癌患者预后保护因素(HR<1,P<0.05)。结论根据肺腺癌中差异表达的RNA成功构建了ceRNA调控网络,有助于进一步探索肺腺癌发生发展分子机制。同时,对网络中RNA的生物学功能进行了初步分析并筛选出影响肺腺癌患者生存预后的风险因子,有望为肺腺癌患者诊断和预后提供新的生物标志物。

产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药机制及分子流行病学研究

目的研究临床分离耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌中新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-beta-lactamase,NDM)的分子分型、耐药机制及流行特点等,为医院感染的防控与治疗提供依据。方法收集浙江大学丽水医院2017年6月—2018年2月从各种临床标本中分离得到的产NDM的大肠埃希菌。结合临床药敏、EDTA协同及增效试验与PCR扩增检测blaNDM基因;通过肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)及多位点序列分型(MLST)分析菌株之间的同源性;采用药物敏感性试验、接合试验、聚合酶链式反应(PCR)和序列分析等技术研究大肠埃希菌NDM分子分型及耐药的分子机制。结果共筛选出9株产NDM的大肠埃希菌菌株,其中3株分离自新生儿科,2株分离自妇科,重症医学科、急诊、血液内科、肾内科各1株;经测定所有菌株的NDM亚型均为NDM-5型,质粒复制子类型均为IncX3型;5株细菌接合试验阳性,分别来自妇科、重症医学科、急诊和新生儿科,同时PCR结果表明接合菌的质粒复制子类型为IncX3型;所有菌株呈现多重耐药现象;MLST分型结果显示,这9株大肠埃希菌共有4个ST分型,分别为ST206、ST167、ST354和ST1642,与ERIC-PCR分型结果相一致。结论研究结果表明本地区存在携blaNDM-5基因的大肠埃希菌的流行,同时携带有多种耐药基因,并能够通过IncX3型质粒在大肠埃希菌中传播。因此,为了预防和控制医院感染的暴发,必须重视和加强对耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的监测。

浙南地区高尿酸血症发病率及HLA-B~* 5801基因携带率分析

目的了解浙南地区高尿酸血症的发病率及HLA-B~* 5801基因携带率,为防止别嘌呤醇用药发生严重皮肤不良反应,探讨筛查HLA-B~* 5801基因的必要性。方法本研究选取浙江大学丽水医院289名需服用别嘌呤醇的患者,采用序列特异性的寡核苷酸探针LABType SSO(sequence-specific oligonudeotide,SSO)技术对患者血样DNA进行HLA-B~* 5801基因检测。同时随机抽样浙南地区2017年1-12月11344例健康体检者的血液样本数据,调查浙南地区高尿酸血症的整体发病情况。结果需服用别嘌呤醇289例患者中HLA-B~*5801基因阳性例数为60例,阳性率为20.7%,HLA-B~*5801基因阳性率在性别、年龄和疾病之间比较差异无统计学意义(P>0.05);11344例健康体检者的血尿酸平均值为(339.38±95.93)μmol/L,其中男性血尿酸平均值为(381.88±90.58)μmol/L,女性(294.79±78.51)μmol/L,不同性别血尿酸差异有统计学意义(t=54.609,P<0.001),男性20~30岁之间发病率最高,占37.28%(χ~2=71.171,P<0.05),女性70岁以后发病率最高,占29.83%,差异有统计学意义(χ~2=168.400,P<0.05)。其中,男性高尿酸血症发病率为30.75%(1786/5808),女性高尿酸血症发病率为16.31%(903/5536),差异有统计学意义(χ~2=326.800,P<0.05)。结论浙南地区高尿酸血症发病率高,且男性的发病率高于女性,男性发病年龄趋于年轻化,引起临床医师重视,同时在患者服用别嘌呤醇前进行HLA-B~* 5801基因检测十分必要,防止发生因服用别嘌呤醇导致的严重皮肤不良反应。