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中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
1
作者
张馨月
章颉
+1 位作者
邓凤林
吴建祥
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期85-90,共6页
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的...
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。
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关键词
中国番茄黄化曲叶病毒
AC4蛋白
原核表达
电泳迁移率变动试验
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职称材料
题名
中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
1
作者
张馨月
章颉
邓凤林
吴建祥
机构
浙江大学农业与生物技术学院/生物技术研究所
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期85-90,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30670087)
国家自然科学基金重点项目(30530520)
文摘
农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。
关键词
中国番茄黄化曲叶病毒
AC4蛋白
原核表达
电泳迁移率变动试验
Keywords
Tomato yellow leaf curl China virus(TYLCCNV)
AC4 protein
prokaryotic expression
electrophoretic mobility shift assay
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S432.4 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性
张馨月
章颉
邓凤林
吴建祥
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
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