浙江省医学实验动物微生物和寄生虫检测

目的 检测我省医学实验动物微生物和寄生虫感染或携带情况。方法 按生产繁殖群体采集不同数量个体进行检测。结果 从 2 2家单位 8个品种、 3 4个繁殖群体中发现 1个豚鼠群体、 2个家兔群体、 5个小鼠群体存在体外寄生虫 ,其余项目均达标。结论 为确保实验动物质量 ,需对动物作微生物和寄生虫检测。

关于实验动物清洁区的消毒隔离问题

清洁级以上实验动物设施如何启动并维持合乎标准的环境 ,是值得思考和探讨的问题。本文从微生物学、外科学等角度出发 ,结合本中心“重点区域净化”的工作经验加以探讨。

两个品系豚鼠对化学介质诱导产生气道反应的差异性研究

目的 研究新育成的Zmu 1∶DHP豚鼠气道对外界化学介质诱导产生的反应性。为研究哮喘选择和提供具有较高敏感性的速发型过敏性动物模型。方法 采用雾化气体吸入法 ,按递增浓度 ,让动物吸入组胺及乙酰胆碱气体 ,记录豚鼠到达哮喘发作时的介质浓度和呼吸频率及幅度 ,评定对化学介质的敏感程度 ,同时用DHP品系豚鼠进行对照。结果 当 0 2 %组胺浓度雾化吸入时 ,Zmu 1∶DHP豚鼠哮喘发作的呼吸频率及每分钟通气量 ,显著大于DHP豚鼠 (P <0 0 5 ) ;当 0 4 %浓度时 ,前者的潮气量及每分钟通气量 ,比后者有增高的趋势 (P <0 0 5 ) ;当0 6 %浓度时 ,前者的潮气量及每分钟通气量 ,显著小于后者 (P <0 0 5 )。二个品系豚鼠吸入乙酰胆碱雾化气体后 ,无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 在低浓度组胺雾化吸入时 ,Zmu 1∶DHP品系豚鼠产生哮喘的敏感性显著高于DHP豚鼠 ;高浓度时 。

三个品种豚鼠血液蛋白多态性的比较分析

目的比较分析白毛黑眼(WHBE)豚鼠和DHP豚鼠、花色豚鼠三个品种豚鼠在13个血液蛋白位点上的多态性。方法采用垂直板浓度和pH均不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳法对WHBE豚鼠、DHP豚鼠和花色豚鼠的66只个体的后白蛋白(Po)、前转铁蛋白1(Prt1)、前转铁蛋白2(Prt2)、转铁蛋白1(Tf1)、转铁蛋白2(Tf2)、后转铁蛋白(Ptf)、慢α球蛋白(Sag)、红细胞酯酶(Es)、血清酯酶1(Est1)、血清酯酶3(Est3)、血红蛋白α(Hbα)、血红蛋白β(Hbβ)和白蛋白(Alb)共13个蛋白位点进行了电泳及染色,再利用电泳图谱对各蛋白位点基因频率、平均杂合度和遗传距离进行计算,然后结合聚类分析。结果 Tf1、Tf2、Ptf、Est1和Es在三个豚鼠品种中表现为多态,其中Tf1可作为识别WHBE豚鼠的遗传标记。Po、Prt1、Prt2、Sag、Est3、Hbα、Hbβ和Alb等位点在三个豚鼠品种中的表型一致。Hardy-Weinberg平衡状态分析表明,Es为DHP豚鼠的高度不平衡位点。Ptf为花色豚鼠的高度不平衡位点。在WHBE豚鼠中,Tf1为高度不平衡位点,Est1为不平衡位点。在三个豚鼠品种中,所检测的13个蛋白位点的平均杂合度的排列顺序为:花色豚鼠(0.350 1)>WHBE豚鼠(0.339 0)>DHP豚鼠(0.313 5)。聚类分析结果表明,花色豚鼠和WHBE豚鼠的遗传遗传距离最近(0.064 3),DHP豚鼠与花色豚鼠的遗传距离最远(0.179 2)。结论利用这些蛋白位点可以有效鉴别WHBE豚鼠、DHP豚鼠和花色豚鼠血液蛋白的遗传多态性。

Zmu-1:DHP豚鼠部分生物学特性研究

为积累Zmu-1:DHP豚鼠的生物学特性资料,本研究使用肥大细胞抗原攻击、补体溶血CH50、流式细胞仪及病毒感染方法,测定了豚鼠致敏肥大细胞对抗原的敏感性、血清总补体的活性、血液多形核白细胞的吞噬和呼吸爆发功能及对口蹄疫病毒的敏感性。结果显示,Zmu-1:DHP豚鼠致敏肥大细胞的脱颗粒反应明显低于其它品系(P<0.01),血清补体含量大于其它品系(P<0.01),多形核白细胞的吞噬功能高于其它品系(P<0.05),而呼吸爆发功能低于其它品系(P<0.01),对口蹄疫病毒呈现100%的敏感性。表明Zmu-1:DHP豚鼠的生物学特征已不同于其它品系,形成独特的遗传组成和生物学性状,具有较高的应用优势及推广价值。

用DNA指纹技术研究Zmu-1:DHP豚鼠的群体遗传结构

为了鉴定Zm u-1∶DHP新品系豚鼠的遗传组成,试验以Jeffreys 33.6和33.15探针,分别与Zm u-1∶DHP和DHP 2个品系豚鼠基因组DNA的H in fⅠ和H aeⅢ酶切限制性片段进行Sou thern杂交,绘制豚鼠DNA指纹图,分析豚鼠基因组DNA限制性片段长度的多态性。结果显示,33.6探针与H in fⅠ酶组合应用,多态性程度较高,制图效果好;Zm u-1∶DHP豚鼠的DNA指纹图中,在6 kb和9 kb标记点出现特征性基因序列片段;Zm u-1∶DHP品系内的相似系数Fm=0.834±0.066,显著高于DHP品系内的Fm=0.653±0.158,也高于2个品系的Fm=0.670±0.115;Zm u-1∶DHP豚鼠2随机个体间遗传组成完全相同的机率Fmn=1.07×10-2,高于DHP豚鼠的Fmn=8.474×10-5。表明该方法用于豚鼠遗传质量检测和品系鉴定是可行的。Zm u-1∶DHP和DHP豚鼠都属远交系动物,但前者的遗传基因纯合性显著高于后者,结合性状可以看出,Zm u-1∶DHP豚鼠遗传分化形成了新的品系。

多柔比星对兔心脏的损伤和牛磺酸的保护作用

为了研究多柔比星 (Dox)心脏损伤机理和牛磺酸 (Tau)的保护作用 ,将实验兔随机分成Dox组 ,对照组 (即生理盐水组 ,NS组 )和Dox +Tau组 .兔均于第12周 ,测量心输出量 (CO) ,颈动脉收缩压 (SP)和舒张压 (DP) ,颈动脉平均压 (MAP) ,左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压 (LVEDP) .取左心室心肌细胞检测细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i) ;用血清检测一氧化氮 (NO)的含量 .结果表明 ,Dox组CO ,SP ,DP ,MAP ,LVSP均明显低于NS组 ,LVEDP显著高于NS组 ,Dox +Tau组SP ,DP ,MAP ,LVSP均显著低于NS组 ,LVEDP明显低于Dox组 ,但明显高于NS组 .Dox组和Dox +Tau组血清NO含量均明显高于NS组 .Dox组左心室心肌细胞 [Ca2 +]i 明显高于NS组 ,Dox +Tau组心肌细胞 [Ca2 +]i 明显低于Dox组 .本文提示 。

Zmu-1:DHP豚鼠的随机扩增多态性DNA分析

目的 研究Zmu 1:DHP豚鼠基因组DNA的遗传多态性及其遗传概貌 ,探讨随机引物PCR(RAPD PCR)在豚鼠遗传质量检测中运用的可行性。方法 用RAPD PCR法 ,对新培育的Zmu 1:DHP豚鼠和对照品系DHP豚鼠的基因组DNA进行PCR扩增。结果 从 4 0条随机引物中 ,筛选出 2条呈多态性的引物 ,分别是第S1 2 0 2 号和第S1 2 1 9号引物。Zmu 1:DHP品系的扩增产物无多态性变化 ,而且其条带与多数DHP品系的个体相同。少数DHP品系的个体呈多态性变化 ,并找到该品系增加和缺失的特征性条带各一种。结论 Zmu 1:DHP品系的基因纯合性及个体一致性较DHP品系高。二个品系的DNA序列存在较少差异 ,说明豚鼠品系间遗传结构比较接近。一旦选定具有多态性的引物 ,RAPD PCR法可以区分豚鼠品系 ,适用于豚鼠遗传质量检定。

大鼠性偏爱及性行为视频跟踪系统的建立

目的建立大鼠性偏爱及性行为视频跟踪观察系统。方法利用计算机视频分析和跟踪技术,并应用MiceGrayAuto软件和MiceGrayManu软件分析大鼠的性偏爱和性行为。结果通过视频跟踪,实现计算机上实时观察并记录大鼠性偏爱和性行为活动,成像清晰稳定,可重复观看,实验资料直观、客观。结论本实验建立的大鼠的性偏爱及性行为视频跟踪观察系统性能良好,为进一步研究提供了较好地实验和技术平台。

不同粗蛋白和氨基酸组合日粮对实验兔氮代谢和免疫功能的影响

选用100日龄成年日本大耳白兔36只,随机分为6组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组),分别喂以6种不同粗蛋白和氨基酸组合的日粮,其中Ⅰ-Ⅲ组日粮粗蛋白水平为12%,赖氨酸含量分别为0.72%,0.9%和1.08%,含硫氨基酸含量分别为0.52%,0.65%和0.78%;Ⅳ-Ⅵ组日粮粗蛋白水平为16%,赖氨酸与含硫氨基酸组成分别与Ⅰ-Ⅲ组相同。通过饲养试验、氮代谢试验和免疫学实验,观察这6种粗蛋白和氨基酸组合日粮对实验兔的氮代谢和免疫功能的影响。试验结果表明,动物的日增重和氮利用率以Ⅲ、Ⅳ组最高,Ⅰ、Ⅵ组最低,Ⅲ、Ⅳ组分别与Ⅰ、Ⅵ差异显著(P<0.01),但Ⅲ组的总氮排泄量明显低于Ⅳ组(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ组动物的脾脏指数和胸腺指数也都高于其他4组动物,Ⅳ组动物的脾脏指数分别与Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组差异显著(P<0.01)。抗卵清白蛋白抗体阳性的动物数以Ⅲ组最多,分别与Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组差异显著(P<0.05)。血清总蛋白含量随日粮氨基酸水平提高有上升趋势,血清尿素氮含量以Ⅴ和Ⅵ组最高,与其他各组差异显著(P<0.01,P<0.05)。综上所述,Ⅲ、Ⅳ组日粮粗蛋白和氨基酸组合比较适宜,考虑到Ⅳ组氮排放量较高,故以Ⅲ组最佳。

Zmu-1:DHP豚鼠免疫学功能研究

采用ELISA法和流式细胞法,测定经卵白蛋白(OVA)免疫豚鼠的球蛋白Ig和T淋巴细胞增殖率的变化规律,研究Zmu-1:DHP豚鼠对病毒易感性的免疫学基础。结果表明:①豚鼠最佳OVA免疫剂量为0.1 mg/只;②OVA刺激后,Zmu-1:DHP豚鼠产生的特异性IgG及其亚类抗体,与DHP豚鼠基本相同;③Zmu-1:DHP豚鼠经OVA刺激,T淋巴细胞的增殖率显著低于DHP豚鼠;④OVA刺激豚鼠很少产生IgE;⑤加与不加Al(OH)3免疫比较,IgG1含量变化较大。表明Zmu-1:DHP豚鼠的细胞免疫功能较低,体液免疫功能与其他豚鼠相同,初步认为T细胞免疫功能低下,可能是引起Zmu-1:DHP豚鼠对某些病毒较敏感的原因之一。豚鼠的变态性抗体IgE产量较小;Zmu-1:DHP豚鼠适合于制作感染模型、研究免疫学机制或免疫功能的动物模型。

两种豚鼠血清蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳比较

为探讨不同品系豚鼠间的区别 ,对 Zmu- 1:DHP品系豚鼠和 Hartley品系豚鼠的血清蛋白质进行 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定 .结果显示该品系豚鼠的血清蛋白可分辨出 2 1条蛋白区带 ,Hartley品系豚鼠有 2 0条蛋白区带 .表明两品系豚鼠血清蛋白组成上有差异 .

牛磺酸对阿霉素损伤兔心肌的保护作用

目的 探讨治疗剂量阿霉素对兔心脏功能和心肌组织微量元素铁、镁含量的影响和牛磺酸对心肌的保护作用。方法 新西兰纯种兔 2 6只 ,随机分成对照组 (NS组 )、阿霉素 (ADR)组和ADR加牛磺酸 (Tau)组。ADR组 ,每周静注ADR 2mg kg ,共八次。ADR加Tau组除与ADR组一样 ,另在第三周开始每天喂牛磺酸 2 0 0mg kg。对照组仅静注生理盐水。兔于末次用药后 3周 ,测量心输出量 (CO)、颈动脉压 (BP)和心肌组织微量元素铁、镁的含量。结果 ADR组CO和BP均显著低于NS组 (P <0 0 1) ,Tau组BP显著低于NS组 (P <0 .0 1) ,CO与NS组相比差异无显著性 (P >0 0 5)。对照组铁、镁含量显著高于ADR组 (P <0 .0 5;P <0 0 1)。Tau组铁含量显著高于ADR组 (P<0 0 5)而与对照组相近 (P >0 0 5)。结论 治疗剂量阿霉素会使心功能降低 ,牛磺酸对心脏具有保护作用而对心脏损伤的修补作用并不理想。

断奶至80日龄日本大耳白兔日粮适宜粗蛋白水平研究

选用60只40日龄断奶日本大耳白兔,随机分为5组,分别饲以粗蛋白水平为12%,14%,16%,18%和20%的等代谢能、等粗纤维日粮,通过对各组动物进行生长试验和血清生化指标测定,确定动物在断奶至80日龄期间的日粮适宜粗蛋白水平.试验结果表明,生长兔的日增重和试验末重以16%粗蛋白含量组最高,12%组最低,两者差异显著(P<0.05).各组动物血清总蛋白、白蛋白、尿素氮含量随着日粮粗蛋白水平的提高而升高,各组间尿素氮含量差异显著(P<0.05,P<0.01),但以粗蛋白水平为16%时为宜.日粮粗蛋白水平对血清球蛋白含量影响不显著.碱性磷酸酶的活力以16%粗蛋白组最高,但各组间差异不显著(P>0.05).综上所述,生长期日本大耳白兔的日粮适宜粗蛋白水平为16%.

Linomide对人大肠癌裸鼠肠壁原位移植SW1116肿瘤的抑制作用

目的 研究 L inomide对人大肠癌 SW1116裸鼠肠壁原位移植瘤的抑制及抗转移作用。方法 用肿瘤肠壁粘接原位接种新技术和脾切除的方法为肿瘤创造生长及转移的条件 ,经裸鼠体内筛选获得稳定模型 ,模型用于 L inom ide对 SW1116裸鼠肠壁原位移植瘤的抑制及抗转移作用的研究 ,设立丝裂霉素 (MMC)和不给药对照。结果 L inomide和 MMC对肠壁原位肿瘤的抑制率分别为 71.9%和 81.3% ,两种药物均抑制了肿瘤的转移 ,对照组的肿瘤肝转移率为 75 % (6 / 8)。结论 采用新的粘接接种技术和脾切除的方法 ,降低了受体的免疫力 ,不仅使模型稳定传代 ,而且还能产生自发转移 ,初步显示了此模型在研究转移机制及抗转移药物方面有一定的应用价值。

16SrDNAPCR法对实验用小鼠细菌感染的检测试验

通过合成细菌 16 Sr DNA高度保守区引物 ,采用 PCR法对 16种标准菌株 DNA和小鼠的基因组 DNA、人基因组 DNA、乙肝病毒、巨细胞病毒进行扩增。 PCR法结果表明 :细菌具有371bp扩增产物 ,与小鼠基因组 DNA、人基因组 DNA、巨细胞病毒和乙肝病毒无交叉阳性反应。PCR法最低能检测 10 0 fg大肠埃希菌 DNA。检测实验动物细菌感染 ,具有快速、特异性和敏感性高的特点。本研究证实 :16 Sr DNA PCR法能够快速 ,特异地检测实验动物常见细菌感染 ,具敏感性高。

小鼠细胞间隙连接蛋白基因的克隆和序列分析

通过提取小鼠细胞总RNA ,采用RT -PCR的方法 ,扩增了连接蛋白Cx4 3的cDNA整个氨基酸编码区域 ,并将其克隆到了pGEM质粒中的EcoR .I位点。对序列的分析显示其有 114 6bp ,编码 382个氨基酸。与已有大鼠、牛及人相应序列比较 ,存在部分差异。该重组质粒工作的完成 ,为其表达、调控等方面的研究奠定了基础。

阿霉素对兔心脏主要功能的影响

为了了解研究阿霉素对兔心脏功能的影响。将新西兰兔 2 0只 ,随机分成阿霉素(ADR)组和对照组。ADR组 ,每周注射一次 ADR(2 mg/ kg,用生理盐水配制成 1 mg/ml) ,共注射 8次。对照组 ,注射生理盐水。于末次注射后 3周 ,测量兔体重 (BW)、心室重量(VW)、心输出量 (CO)、颈动脉压 (BP)、颈动脉平均压 (MAP)、左心室收缩压 (L VSP)和左心室舒张末压 (LVEDP)。结果表明 ADR组 BW明显低于对照组 ,VW/ BW明显高于对照组 ;ADR组 CO、BP、MAP、L VSP均明显低于对照组 ,而 L VEDP明显高于对照组。