SiO_2粉尘介导的DNA损伤及其影响因素的研究

目的 研究小剂量 (7.5～ 12 0 .0 μg/ml)SiO2 粉尘对中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHLF)的DNA损伤作用。方法 采用彗星试验 ,按SiO2 粉尘不同的作用浓度和时间分组来观察DNA损伤 ,通过去铁胺(DFX)和盐酸维拉帕米 (Ver)的作用间接观察钙离子和羟自由基对DNA损伤的影响。以彗星尾长作为DNA损伤程度的评价指标。结果 与对照组相比 ,SiO2 明显增加了CHLF的DNA迁移距离 ,差异有显著性(P <0 .0 1) ;在 7.5～ 12 0 .0 μg/ml剂量范围内 ,彗星尾长随SiO2 剂量的增加而增加 ,2h组的DNA损伤比1h组更严重。 0 .5～ 2 .0mmol/LDFX和 2 .5～ 2 0 .0 μg/mlVer能有效减轻 90 μg/mlSiO2 所致的DNA损伤 ,其保护作用随浓度加大而增加。结论 小剂量SiO2 有致CHLFDNA损伤的作用 ,损伤过程中有羟自由基和钙离子的参与 ,抗氧化剂和钙拮抗剂可对抗SiO2 对机体DNA的损伤作用。

SiO_2刺激肺泡上皮细胞间隙连接功能下调的研究

目的 探索矽肺发病过程中 ,SiO2 对肺泡上皮细胞增殖和间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 不同剂量的SiO2 刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞 (PAM)培养上清液 ,作用于正常貂肺泡上皮细胞株CCL 6 4细胞。用四唑盐 (MTT)法测定CCL 6 4细胞增殖 (以A570nm值表示 ) ;采用激光扫描共焦显微镜 (LSCM ,LeicaTCSSP)用荧光光漂白后再恢复 (FRAP)技术测定CCL 6 4细胞GJIC功能 [以荧光扩散率K(× 10 -3 /s) ]表示。结果 体积分数为 5 %的SiO2 刺激的PAM上清液能诱导CCL 6 4细胞增殖 (F =9.6 79,P <0 .0 1) ,并抑制CCL 6 4细胞间GJIC功能 (F =2 0 .5 87,P <0 .0 1)。在 5 0～ 5 0 0 μg/mlSiO2 范围内 ,随SiO2 浓度增加 ,两者均呈良好的剂量依赖性关系 (GJIC :r =- 0 .943,P <0 .0 5 ;增殖 :r=0 .891,P <0 .0 5 )。结论 SiO2 刺激PAM培养上清液可以抑制肺泡上皮细胞的GJIC功能 ,并诱导细胞增殖。推论肺泡上皮细胞GJIC功能下调在SiO2 介导的肺泡上皮组织损伤中有重要的作用。

二氧化硅对成纤维细胞和肺上皮细胞的DNA损伤作用

目的 研究小剂量二氧化硅 (SiO2 )粉尘对中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)和貂肺上皮细胞 (CCL 6 4)的DNA损伤作用。方法 采用彗星试验 ,按SiO2 粉尘不同的作用浓度 (终浓度 0、7 5、15、30、6 0、12 0mg/L)和时间分组 ( 1h、2h)来观察DNA损伤。以彗星尾长 (彗头末端到彗尾末端的长度 )作为DNA损伤程度的评价指标。结果 与对照组相比 ,SiO2明显增加了CHL及CCL 6 4细胞的DNA迁移距离 (P <0 0 1) ,在 7 5～ 12 0mg/L的剂量范围内 ,彗星尾长随作用剂量的增加而增加 ;一般 2h组比 1h组引起更严重的DNA损伤。结论 小剂量SiO2 粉尘确有遗传毒性 ,体外试验可致CHL细胞和CCL 6 4细胞DNA链断裂。由彗星试验的系列浓度SiO2