留兰香油对大鼠慢性阻塞性肺疾病模型肺组织炎症氧化改变和Nrf2蛋白表达的影响

目的：观察肺炎克雷伯杆菌和脂多糖所致大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型肺组织炎症氧化改变，以及Nrf2蛋白表达及留兰香油的影响。方法：用经气管滴入脂多糖和肺炎克雷伯杆菌反复感染法12周建立大鼠COPD模型后，留兰香油灌胃治疗3周。观察大鼠COPD模型病理学变化、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞数变化、肺组织匀浆MDA变化、免疫组化检测Nrf2蛋白表达特点，以及留兰香油对其的影响。结果：留兰香油100mg·kg^-1能明显降低BALF中白细胞数，减轻细支气管炎和肺间质炎及炎症细胞浸润；30～300mg·kg^-1能减少肺泡破坏，使细支气管壁变薄以及抑制杯状细胞增生；留兰香油能明显降低肺组织MDA含量，抗氧化效果明显，而且30mg·kg^-1可降低肺组织Nrf2蛋白表达。结论：留兰香油对肺炎克雷伯杆菌和脂多糖引起的大鼠COPD模型的肺部炎症、肺气肿、杯状细胞增生和氧化改变有改善作用，并对肺炎克雷伯杆菌和LPS引起的肺组织Nrf2蛋白表达增强有降低作用。

甘草酸单铵对脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)气道滴入诱导小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,研究甘草酸单铵(monoammonium glycyrrhizinate,MAG)对ALI的防治作用及其机制。雄性ICR小鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、MAG 3、10及30 mg.kg-1组、LPS组、地塞米松(dexamethasone,DXM)5 mg.kg-1组。MAG各组气道滴入LPS前1 h及滴入后3 h各给药1次,DXM组气道滴入LPS前1 h给药1次。LPS气道滴入后6 h处死动物,测定各组的肺湿重/干重比、肺通透性、肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量、ELISA法检测肺组织匀浆TNF-α、IL-10含量,常规细胞形态学检测中性粒细胞在支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的比例和肺组织病理改变。结果表明,MAG剂量依赖性减轻气道内滴入LPS诱导的小鼠ALI程度,降低肺湿重/干重比及肺组织伊文斯蓝的渗出,降低BALF中白细胞总数和中性粒细胞数比例,抑制组织MPO的释放,降低肺组织匀浆TNF-α的含量,增加肺组织IL-10的释放。以上结果提示,MAG可能通过调节TNF-α/IL-10的平衡而有效保护脂多糖诱导的急性肺损伤。

枇杷叶三萜酸的抗炎作用

目的研究枇杷叶三萜酸(TAL)对急、慢性炎症的抑制作用。方法采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀、冰醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性实验、角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和福氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎模型,观察TAL的抗炎作用。结果TAL(75、225、675mg/kg)ig给药对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀和冰醋酸引起的腹腔毛细血管渗出有明显的抑制作用;TAL(50、150、450mg/kg)ig给药可明显减轻角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀、棉球诱导的大鼠肉芽肿和AA大鼠的原发性、继发性炎症病变。进一步研究表明,TAL(0.05、0.5、5、50mg/L)体外给药可增加ConA、LPS诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应和IL-2的产生,同时抑制AA大鼠PMФ产生过高的IL-1。结论TAL具有良好的抗炎作用。

蓝桉油对单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响

目的 :探讨蓝桉油对人单核细胞 THP- 1细胞株核因子 - κB(NF- κB)核转位活化的影响。方法 :蓝桉油 (1、10、10 0 mg/L,30 min)预处理 THP- 1细胞 ,经脂多糖 (L PS,1mg/L,30 min)刺激后 ,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜 ,测定 THP- 1细胞 NF- κB p6 5亚基 (NF- κB/p6 5 )定位 ;Western- blot法分析细胞核内NF- κB/p6 5水平。结果 :免疫荧光分析显示 ,正常细胞 NF- κB/p6 5荧光标记主要分布于胞浆区 ,核区很少 ,L PS刺激后 NF- κB/p6 5荧光标记浓集于核区 ,胞浆区少见 ;但经蓝桉油 (10 0 mg/L)预处理后 ,LPS刺激的 THP- 1细胞NF- κB/p6 5荧光标记则主要位于胞浆区 ;Western- blot分析显示 ,在正常 THP- 1细胞核蛋白中有低水平的 NF- κB/p6 5表达 ,经 L PS刺激 ,核内 NF- κB/p6 5表达明显增高 ;蓝桉油预处理后 ,可以抑制 LPS诱导的核内 NF- κB/p6 5高水平表达 ,且呈剂量依赖关系。结论 :蓝桉油预处理阻止了 LPS诱导的 NF- κB/p6 5核转位 ,从而抑制了其活性功能的发挥。蓝桉油可抑制 LPS刺激引起的 NF- κB核转位活化。

LPS致大鼠急性肺损伤TLR_4的表达及蓝桉油的影响

目的:观察正常大鼠气道TLR4的分布,LPS对大鼠气道TLR4分布以及蓝桉油对TLR4表达的影响。方法:气管内注入LPS复制大鼠急性肺损伤模型,观察72 h后的病理变化、支气管肺泡灌洗液中细胞总数的变化、免疫组织化学特点以及蓝桉油的影响。结果:免疫组化结果显示TLR4在正常组大鼠气道内有广泛分布。急性肺损伤组大鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数明显增高,病理结果显示支气管、肺内炎症程度均明显高于正常组,免疫组化结果显示主支气管和肺内细支气管上皮细胞内TLR4表达明显增强。蓝桉油300 mg.kg-1组支气管肺泡灌洗液中白细胞总数明显低于急性肺损伤组,病理结果显示气管和主支气管的炎症程度明显减轻,免疫组化提示肺内细支气管上皮细胞内TLR4的表达量减少。结论:TLR4在大鼠气道内广泛分布,LPS刺激可使TLR4的表达增强,蓝桉油可降低由LPS引起的肺内细支气管上皮细胞内TLR4表达的增高。

隐孔菌多糖成分对致敏大鼠气道高反应性和炎症细胞的影响

目的 :研究隐孔菌多糖成分对大鼠气道高反应性的影响 ,初步探索其作用机制。方法 :采用卵白蛋白致敏雾化吸入攻击制备大鼠哮喘模型 ,隐孔菌多糖成分 A、B(5 mg/ kg、2 0 mg/ kg)和酮替芬 (5 mg/ kg)及溶媒对照(等量生理盐水 )灌胃 10 d。用甲酰胆碱激发气道高反应性后 ,行支气管肺泡灌洗和腹腔灌洗 ,计数支气管肺泡灌洗液中细胞总数并分类 ,和腹腔灌洗液中脱颗粒肥大细胞及白细胞分类。结果 :隐孔菌多糖成分 A、B均能明显抑制致敏大鼠抗原攻击后气道阻力的增加及肺顺应性的下降 ;减少支气管肺泡灌洗液中白细胞总数 ,降低嗜酸细胞的数目 ,以多糖 B作用更明显 ;多糖 A和多糖 B也明显抑制腹腔肥大细胞脱颗粒及腹腔嗜酸性粒细胞的渗出。结论 :隐孔菌多糖 A、B成分抑制大鼠的气道高反应性 ,其作用可能与稳定肥大细胞膜、抑制嗜酸细胞炎症和趋化有关。

哮喘大鼠肺与大脑皮层的白三烯B_4含量和白三烯A_4水解酶的mRNA表达上升

目的 :观察抗原攻击的哮喘大鼠肺组织和大脑皮层的 LTB4含量及其合成酶 m RNA表达量的变化。方法 :用卵白蛋白致敏大鼠 ,抗原攻击后 ,用反向高效液相法 (RP- HPLC)测定肺组织和大脑皮层匀浆的 LTB4含量。用半定量 RT- PCR法检测 LTA4水解酶 m RNA的表达量。结果 :哮喘大鼠肺组织和大脑皮层匀浆中的 LTB4含量显著高于正常对照组 ,其 L TA4水解酶 m RNA的表达也明显提高。地塞米松 (DXM,0 .5 mg/ kg,ip)可以减少 L TB4含量的增加 ,抑制 LTA4水解酶 m RNA的表达。结论 :哮喘大鼠肺组织和大脑皮层的 LTB4含量及其合成酶的 m R-NA的表达同步增高 ,提示哮喘时中枢神经系统对肺组织可能有神经免疫调节作用。

西地那非对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的作用

目的明确西地那非对急性肺损伤(ALI)的治疗作用及可能机制。方法采用脂多糖(LPS,4 mg·kg^(-1))气道滴入诱导的小鼠ALI模型。随机分为生理盐水组、LPS模型组、西地那非3,10及30 mg·kg^(-1)组、地塞米松5 mg·kg^(-1)组。测定肺干/湿重比值,常规细胞形态学检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞,肺组织切片观察病理改变;测定肺组织匀浆髓过氧化酶(MPO)活性、NO含量、NOS活性及TNF-α含量。结果LPS诱导的ALI小鼠肺干/湿重比值明显下降;BALF中白细胞总数及中性粒细胞比例明显增加;肺毛细血管通透性明显增加;肺组织间隙大量中性粒细胞浸润和红细胞渗出;肺组织匀浆TNF-α含量和MPO活性明显增加,NO含量、总NOS活性及iNOS活性明显增加。同时腹腔注射西地那非可剂量依赖性地降低ALI小鼠肺干/湿重比值;减少BALF中的白细胞总数及中性粒细胞的比例;降低肺毛细血管通透性;改善肺组织病理变化;抑制肺组织匀浆TNF-α含量、MPO活性及NO含量、总NOS活性及iNOS活性的增加。结论西地那非对LPS诱导的ALI有保护作用,提示NO- cGMP途径可能在ALI中起重要作用。

可用于SARS治疗的抗病毒药物

严重急性呼吸综合征(SARS)的爆发是对人类健康的严重威胁,在抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)的小分子化合物和疫苗尚未面市之前,在已经注册上市的抗病毒药物中寻找对SARS-CoV有效的药物不失为一条捷径,一旦发现有效的抗SARS-CoV药物,即可直接应用于临床治疗。本文对有关药物的研究状况进行了简要总结综述。

隐孔菌多糖对小鼠内毒素性肺损伤的保护作用

目的研究隐孔菌多糖(cryptoporus polysaccharide,CP)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法LPS气管内滴入诱导小鼠ALI模型,设立对照组、模型组、隐孔菌多糖(1、10、30mg·kg-1)组和地塞米松(0·5mg·kg-1)组,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中中性粒细胞的浸润情况、比色法测定伊文氏兰渗出量及BALF中的中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)、超氧根阴离子自由基(O2·)含量,观察肺组织病理及肺湿重/干重比值改变,ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10含量。结果隐孔菌多糖(1、10、30mg·kg-1)尾静脉给药能够抑制BALF MPO活性,改善ALI小鼠BALF及肺组织中的炎症细胞的聚集和肺水肿程度,降低肺组织中TNF-α水平及升高IL-10/TNF-α比值。结论隐孔菌多糖通过抑制中性粒细胞黏附、趋化、减轻肺水肿等改善LPS诱导的小鼠ALI。

BIO-1211对嗜酸粒细胞趋化和聚集及释放介质的影响

目的 :研究 VL A- 4拮抗剂 BIO- 12 11对嗜酸粒细胞趋化、聚集和释放的影响。方法 :采用离体方法测定血小板活化因子 (PAF)诱导的嗜酸性粒细胞反应 ,整体方法观察嗜酸性粒细胞聚集和释放反应。结果 :BIO- 12 11能明显抑制 PAF对嗜酸性粒细胞的趋化作用 ,BIO- 12 114× 10 -11、4× 10 -10、4× 10 -9mol· L-1的抑制率分别为2 4 .9%、2 9.9%、31.3%。BIO- 12 111、3、10 mg·kg-1单次腹腔给药 ,呈剂量依赖性抑制大鼠葡聚糖凝胶引起的腹腔嗜酸粒细胞聚集 ,抑制率分别为 6 0 .3%、6 8.9%和 72 .9% (P<0 .0 5 ) ,但不能抑制嗜酸性粒细胞释放嗜酸细胞过氧化物酶。结论 :BIO- 12 11抑制嗜酸性粒细胞趋化和聚集 ,减轻局部炎症反应 ,有可能发展成为一种新的抗变态反应性药物。

环孢素A气雾吸入对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的 研究环孢素A(CsA)气雾吸入对抗原诱导的大鼠过敏性气道炎症的作用。方法 用卵白蛋白 (OA)致敏大鼠 ,2周后气雾吸入CsA(5 ,10 ,2 0g·L- 1 ) ,每天 1次 ,连续 7d。大鼠致敏后d 2 0和d 2 1用OA(10g·L- 1 ,每天 1次 )攻击 ,观察第 2次OA攻击 2 4h后支气管肺泡灌洗液及外周血中嗜酸性粒细胞的数量和支气管肺组织病理学改变情况 ,测定支气管肺泡灌洗液中TNF α含量。结果 CsA气雾吸入能明显降低支气管肺泡灌洗液及外周血中嗜酸性粒细胞的数量 ,减轻肺组织中炎症细胞特别是嗜酸性粒细胞的浸润 ,减轻组织水肿及上皮损伤等气道炎症状况 ,降低支气管肺泡灌洗液中TNF α含量。结论 CsA气雾吸入对大鼠过敏性气道炎症具有抑制作用 ,其作用机制与细胞因子TNF

隐孔菌发酵物对离体中性粒细胞释放白三烯B_4和C_4及D_4的抑制作用

目的 :探讨隐孔菌发酵物 (Cryptoporus volvatus ferment substance,CVFS)对中性粒细胞释放白三烯的影响。方法 :给大鼠腹腔注射糖原诱导中性粒细胞聚集 ,16 h后收集腹腔灌洗液 ,分离中性粒细胞 ,以 calciumionophore A2 3187刺激离体中性粒细胞释放白三烯 ,再用 HPLC法测定中性粒细胞中白三烯 (L T) B4、LTC4和LTD4的含量。结果 :CVFS 0 .2 5、1、4 mg· L-1呈浓度依赖抑制中性粒细胞释放 L TB4、LTC4和 LTD4,对 L TB4抑制率分别为 2 7.4 %、5 4.2 %和 78.8% ;对 LTC4抑制率分别为 6 5 .1%、74 .3和 79.0 % ;对 LTD4抑制率分别为5 5 .6 %、6 0 .9%和 72 .8%。与生理盐水对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :CVFS抑制中性粒细胞释放LTB4、L TC4和 L TD4可能是其抗炎平喘作用机制之一。

咯利普兰对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的抑制作用

目的探讨磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂治疗急性肺损伤的作用机制。方法气道内滴入脂多糖3 mg.kg-1制备小鼠急性肺损伤模型,10 min后一次性ip不同剂量咯利普兰或地塞米松;同时设假手术和模型组。给药6 h后处死小鼠,观察肺湿重/干重比值和肺组织的病理改变;用细胞形态学方法计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和中性粒细胞;考马斯亮蓝法测定BALF总蛋白含量;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒测定肺组织匀浆MPO活性;ELISA法测定肺组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;高效液相色谱法测定肺组织匀浆中cAMP-PDE和PDE4活性。结果小鼠气道内滴入脂多糖6 h后,与假手术组比较,模型组肺湿重/干重比值明显升高;肺组织病理观察可见肺血管和气道周围有大量中性粒细胞浸润;BALF中白细胞和中性粒细胞增多,蛋白含量增加;肺组织MPO活性、TNF-α水平、cAMP-PDE和PDE4活性升高。与模型组比较,咯利普兰(0.1,0.3及1.0 mg.kg-1)和地塞米松(0.5 mg.kg-1)可降低肺组织湿重/干重比值,降低BALF中白细胞总数、中性粒细胞数目和蛋白含量,改善肺组织病理变化,肺组织中MPO活性、TNF-α含量、cAMP-PDE和PDE4活性亦明显降低。结论咯利普兰治疗急性肺损伤的作用机制可能与抑制PDE4活性、抑制中性粒细胞黏附和趋化及降低TNF-α水平有关。

支气管哮喘发病机制和抗哮喘新药研究进展

支气管哮喘 (以下简称哮喘 )是呼吸系统疾病中的一种常见病 ,现在认为哮喘是气道慢性炎症性疾病 ,以肺部可逆性气流阻塞、气道黏膜炎症和气道高反应性为特征。近年来 ,主要在磷酸二酯酶、磷脂酶 D、中枢神经系统在哮喘发病过程中的神经免疫调节作用和新药开发等方面进行了研究 ,并建立了相应的实验研究方法 ,为今后进一步的研究工作打下坚实基础。

来氟米特对肝星状细胞增殖和胶原合成的影响

目的 :研究来氟米特活性代谢物 A77172 6对肝星状细胞 (HSC)增殖和胶原合成的影响。方法 :用链蛋白酶和胶原酶原位肝灌注、Nycodenz密度离心法分离大鼠 HSC和 Kupffer细胞 ,制备 Kupffer培养上清液 (KCCM) ,并以不同浓度、不同培养时间的 CCl4损伤的 KCCM作为刺激因素观察了 A77172 6对 HSC增殖 (3 H- Td R掺入法 )和胶原合成 (3 H- Pro掺入法 )的影响。EL ISA法测定 KCCM内 TGF- β、TNF- α和 IL- 1含量。结果 :HSC和 Kupffer细胞得到较好的分离。CCl4损伤的 KCCM显著增加 HSC增殖和胶原合成 ,并且稀释度为 1∶ 2的 KCCM在培养 7d时 ,对 HSC增殖和胶原合成的刺激作用明显。 A77172 6(0 .0 0 1～ 10 μmol/ L)对 CCl4损伤的 KCCM刺激 HSC增殖和胶原合成有不同程度的抑制作用 ,并且 A77172 6(0 .0 0 1～ 10 μmol/ L)明显抑制 CCl4损伤 KCCM内升高的 TGF- β、TNF- α和 IL- 1水平。结论 :CCl4损伤的 KCCM可明显刺激 HSC增殖和胶原合成 ,而 A77172 6对此有明显的抑制作用 ,并且与其抑制致 HSC激活的因子如 TGF- β、TNF- α和 IL- 1分泌有关。

磷酸二酯酶4作为抗炎药物靶点的研究现状及未来发展方向

环腺苷酸(cAMP)-特异性磷酸二酯酶4(PDE4)是目前最热门的药物靶点之一。PDE4抑制剂在临床已表现出对数种炎症性疾病有效,包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、过敏性鼻炎和过敏性皮炎等,在动物模型上对其它多种疾病包括关节炎,败血症等也有效。由于有恶心及呕吐等不良反应,进入临床研究的第1代PDE4抑制剂如咯利普兰(rolipram),吡拉米特(piclamilast)已中止研究,但是有数个第2代PDE4抑制剂(如西洛司特和罗氟司特)正在研究和开发中。由于,它们仍不能避免恶心呕吐的不良反应,因此,它们的临床使用受到限制。PDE4家族包括4种亚型。目前正在研发中的PDE4抑制剂一般都不能区别PDE4的亚型。最近,已有一些重要的进展使我们能更好的理解各种亚型的不同作用。PDE4亚型的特异性抑制剂有可能降低药物的不良反应并仍保持药物的抗炎活性,因而有可能开发出比目前正在研制的第2代PDE4抑制剂更好的抗炎药物。

QTY06对LPS引起的大鼠慢性气道炎症及MUC5ac表达的影响

目的:观察合成药QTY06对大鼠气管滴入脂多糖(LPS)诱发的慢性气道炎症及黏蛋白表达的影响。方法:以LPS气管滴注制作慢性支气管炎症模型,观察3周后的支气管肺泡灌洗液中磷脂和白细胞总数的变化、病理学改变、免疫组化特点以及QTY06对其的影响。结果:合成药QTY06给药后能使BALF中的磷脂含量明显增加、中性粒细胞和淋巴细胞百分率及白细胞总数降低。病理切片观察发现QTY06给药组与模型组相比气管炎、支气管炎和肺间质炎严重程度明显降低,上皮损害减轻,炎症细胞浸润减少,阳性杯状细胞数下降。QTY06使气管和细支气管上皮内黏蛋白MUC5ac表达的阳性染色区域和程度明显减轻,通过图像分析系统测得的光密度值和黏蛋白面积%均明显低于模型组。结论:QTY06对LPS诱发的大鼠慢性气道炎症反应有抑制作用,能增加肺表面活性物质磷脂量,并能抑制气道黏蛋白高分泌。

凝集素化昔萘酸沙美特罗纳米粒-微粒的药效和药动学研究

目的研究小鼠体内干粉吸入麦胚凝集素(WGA)化修饰的昔萘酸沙美特罗(SalX)纳米粒-微粒(NiMS)的药效学及药动学。方法通过皮下和腹腔注射卵清蛋白(OVA)建立小鼠肺哮喘病理模型,经气道干粉吸入给予WGA-SalXNiMS粉末,采用对照实验法,检测给药后的肺组织及气道炎症情况,并对药物在小鼠血浆和肺组织中的药代动力学行为进行研究。数据用Sigma State统计软件包处理。结果与模型组相比,SalX-NiMS组和WGA-SalX-NiMS组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞数目呈下降趋势。WGA-SalX-NiMS组小鼠BALF中淋巴细胞及巨噬细胞数与SalX-NiMS组相比减少(P<0.05)。在小鼠血浆中,SalX-NiMS组的tmax为1.500h,Cmax为57.366mg/L,t1/2β为69.315h,AUC0-∞为2 427.205mg·L-1·h,MRT0-∞为55.294h;WGA-SalX-NiMS组的tmax为1.000h,Cmax为62.581mg/L,t1/2β为69.315h,AUC0-∞为4 071.838mg·L-1·h,MRT0-∞为75.094h。在小鼠肺组织中,SalXNiMS组的tmax为0.083h,Cmax为0.497μg/mg,t1/2β为11.231h,AUC0-∞为3.936μg·mg-1·h,MRT0-∞为13.854h;WGASalX-NiMS组的tmax为0.083h,Cmax为0.796μg/mg,t1/2β为27.294h,AUC0-∞为5.578μg·mg-1·h,MRT0-∞为26.330h。WGA-SalX-NiMS组的血浆及肺组织药物浓度均高于SalX-NiMS组(P<0.05)。结论 WGA修饰后的SalX-NiMS在小鼠体内易于释药,血浆和肺组织中药物浓度较高,有利于哮喘发作时炎症的控制与改善。