血小板单采样品中残留白细胞计数两种方法的评价

为评价流式细胞计数法和Nageotte血细胞计数法计数单采血小板中残留白细胞,应用系列的稀释实验研究其准确性;对已知白细胞浓度的同一样本,反复检测14次,研究其重复性;分别用流式细胞计数法和Nageotte血细胞计数法检测102份去白细胞的单采血小板样本,对其结果进行比较。结果发现,当白细胞浓度为0.8<WBC/μl<10时,两方法无显著差异(P>0.05)。结论:两种方法均可用于少白细胞成分的质量控制。

红花注射液对野百合碱损伤血管内皮细胞NO活性、内皮型NO合成酶及结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨红花注射液对野百合碱(MCT)损伤的血管内皮细胞一氧化氮(NO)产生、内皮型NO合成酶(e NOS及结缔组织生长因子(CTGF)表达及活性的影响。方法人血管内皮细胞(HUVECs)分为空白对照组、MCT组、红花注射液组。以CCK-8法检测红花注射液对HUVECs增殖的抑制作用,硝酸还原酶法检测NO含量,荧光定量PCR和Western blot法检测e NOS和CTGF的mRNA和蛋白表达情况。结果红花注射液有效抑制HUVECs增殖,呈浓度依赖性。与空白对照组相比,MCT组e NOS表达降低,NO生成降低(均P<0.05),而CTGF表达增加(P<0.05);与MCT组比较,红花注射液组e NOS活性及NO的生成均增加(均P<0.05),而CTGF表达降低(P<0.05)。结论红花注射液可促进MCT损伤的血管内皮细胞e NOS活性增加及NO产生,抑制CTGF的表达和分泌。

NMDA受体依赖的神经元存活及保护作用的机制

NMDA受体属于谷氨酸受体,它在突触传递和突触可塑性中都发挥着非常重要的作用,其介导的兴奋性毒性是脑缺血、缺氧和脑外伤等导致脑损伤的重要分子机制。但是,近年来的研究发现,在生理和某些病理情况下,NMDA受体的激活具有促进神经元存活及保护神经元免受损伤的作用。

整合素和钙通道在人与小鼠钩端螺旋体主要宿主细胞上分布的差异

目的:了解人和小鼠钩端螺旋体(简称钩体)主要宿主细胞上整合素与钙通道表达情况及其差异。方法:采用免疫荧光和Western blot法,检测人单核细胞株THP-1、小鼠单核!巨噬样细胞株J774A.1、人脐静脉内皮细胞株HUVEC、小鼠血管内皮细胞株EOMA、人肝细胞株L-02、小鼠肝细胞株Hepa1-6、人肾小管上皮细胞株HEK-293、小鼠肾小球系膜上皮细胞株SV40-MES13、小鼠肾成纤维细胞株NIH/3T3、人及小鼠血小板的β1、β2、β3类整合素分子以及Cav3.1、Cav3.2、Cav3.3、Cav2.3电压门控型钙通道蛋白和P2X1、P2X2、P2X3、P2X4、P2X5、P2X6、P2X7受体门控型钙通道蛋白的分布差异。结果:整合素β1分子表达于J774A.1、THP-1、HUVEC、EOMA、L-02、Hepa1-6、HEK-239细胞以及人和小鼠血小板膜表面,β2分子表达于J774A.1、THP-1、HUVEC、EOMA和NIH-3T3细胞膜表面,β3分子表达于J774A.1、THP-1、HUVEC、EOMA、Hepa1-6、HEK-239、NIH-3T3细胞以及人和小鼠血小板膜表面。ATP依赖性受体门控型钙通道蛋白P2X1表达于人和小鼠血小板膜表面,P2X5表达于J774A.1、THP-1、L-02、Hepa1-6、HEK-239和HUVEC细胞膜表面,但未检测出上述细胞或血小板表达其它钙通道蛋白。结论:不同种类整合素分子和钙通道蛋白在钩体主要宿主细胞上表达明显不同,这可能与钩体对不同组织细胞致病性差异有关。

淋病奈瑟菌pI优势基因型及其G120／A121突变与耐药性关系

目的分析浙江省上虞地区淋病奈瑟菌临床菌株外膜孔蛋白优势基因型及其G120和A121突变与耐药性关系。方法建立能同时检测pIA和pIB基因的双重PCR。目的扩增产物T-A克隆后测序，以分析G120和A121突变情况及证实双重PCR的检测特异性。采用酸性纸片法和二倍琼脂稀释法，分别检测pIA^＋和pIB^＋菌株产β-内酰胺酶情况以及对6种抗生素的耐药性。结果多重PCR可准确地对所有受检淋病奈瑟菌临床菌株进行porinI（p1）基因分型，其检测灵敏度为1ngDNA模板。116株淋病奈瑟菌临床菌株中，30。2％（35／116）为pIA^＋菌株，69．8％（81／136）为pIB^＋菌株。所有pIA^＋菌株出现G120D／A121G双突变（88．6％）或A121G单突变（11．4％），98．8％pIB^＋菌株出现G120K／A121D（65．0％）、G120K／A121G或G120N／A121D（13．8％）双突变以及G120D／N／K单突变（21．3％）。34．5％（40／116）菌株产β-内酰胺酶，其中p／A’菌株产酶率（20％）明显低Tpm’菌株（40．7％）（P〈0．05）。上述临床菌株对青霉素、四环素、环丙沙星和阿奇霉素耐药率高达75．0％-90．5％，仅有3株菌株对头孢曲松耐药，未发现大观霉素耐药菌株。100％和71．4％不产β-内酰胺酶、G120和／或A121突变pIA^＋菌株分别对青霉素和四环素敏感，但不产β-内酰胺酶G120和／或A121突变的pIB^＋菌株对该2种抗生素耐药率均为100％。结论所建立的多重PCR可用于淋病奈瑟菌∥基因快速和准确分型。上虞地区流行的淋病奈瑟菌主要携带plB基因。大观霉素和头孢曲松仍可作为治疗淋病的首选药物。G120和／或A121突变增强对青霉素和四环素耐药性仅限于β-菌株。