Caveolin-1在17β-雌二醇对抗脂多糖诱导的血管平滑肌细胞MCP-1表达中的作用

目的:旨在观察小窝蛋白-1(caveolin-1)在17β-雌二醇(E2)抑制脂多糖(LPS)诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中的作用。方法:原代培养VSMCs,以不同浓度E2(10-9-10-6mol/L)干预LPS诱导的MCP-1的分泌,ELISA法检测MCP-1生成的变化。分别使用caveo-lin-1的阻断剂β-甲基环糊精(β-MCD)以及特异性caveolin-1 siRNA抑制caveolin-1表达,W estern b lotting法检测caveolin-1蛋白表达的变化。结果:LPS浓度和时间依赖地诱导MCP-1的表达,不同浓度E2(10-9-10-6mol/L)抑制LPS诱导的MCP-1的表达;分别使用β-MCD以及caveolin-1 siRNA抑制caveolin-1的表达,能抑制LPS诱导的MCP-1的表达,而E2(10-6-10-9mol/L)又可以抑制caveolin-1的表达。结论:E2抑制LPS诱导的血管平滑肌细胞MCP-1的表达,caveolin-1是这一抑制作用的中间环节。

碱性成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶-9mRNA表达与胃癌临床病理学及生存期的关系

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA在胃癌中的表达及其与肿瘤微血管密度(MVD)、浸润转移和生存期的关系。方法 应用原位杂交和免疫组织化学技术,检测105例胃癌组织中bFGFmRNA和MMP-9mRNA及CD34蛋白的表达。结果bFGFmRNA和MMP-9mRNA在胃癌中的阳性表达率分别为60.95%和58.1%;阳性表达组的平均血管数(46.09±11.52)个/0.72mm2和(43.75±13.41)个/0.72mm2分别显著高于阴性表达组的平均血管数(29.41±12.47)个/0.72mm2和(33.45±13.92)个/0.72mm2;bFGFmRNA和MMP-9mRNA的阳性表达率与肿瘤浸润深度(rs=0.211,P=0.031;rs=0.335,P=0.001)、生长方式(rs=0.324,P=0.001;rs=0.267,P=0.006)、脉管侵犯(rs=0.579,P=0.001;rs=0.209,P=0.032)、淋巴结转移(rs=0.405,P=0.001;rs=0.343,P=0.001)及远处转移(rs=0.474,P=0.001;rs=0.468,P=0.001)有关;MVD分别与bFGFmRNA(t=32.07,P=0.002)和MMP9mRNA(t=70.35,P=0.001)的表达水平呈正相关;阳性表达组及MVD值≥39.5的病例的平均生存时间和5年生存率均显著低于阴性表达及MVD值<39.5的病例。结论 胃癌组织中bFGF和MMP-9表达与肿瘤微血管密度及生存期密切相关,两者在促进胃癌血管生成方面具有协同作用。

高通量实时荧光定量RT-PCR方法验证FL细胞对苯并(a)芘7,8-二氢二醇9,10-环氧化物处理的差异表达基因

目的验证由寡核苷酸微阵列检出的FL细胞对苯并(a)芘7,8-二氢二醇9,10-环氧化物(BPDE)处理的差异表达基因。方法FL细胞分别经0.1%二甲亚砜(DMSO)和0.5μmol.L-1BPDE处理,以高通量实时荧光定量RT-PCR方法(TaqMan(低密度芯片)平行检测185个目标基因的相对表达水平。结果BPDE处理组相对DMSO对照组,51个基因表达有差异,12个基因表达上调,39个基因表达下调,(n=3,P<0.05),涉及细胞增殖,分化,凋亡调控基因,转录调节基因和代谢酶基因等。结论高通量实时荧光定量RT-PCR可迅速对微阵列数据进行验证,差异表达谱有助于研究BPDE的毒理机制和细胞的应答反应。

尿激酶型纤溶酶原激活物和基质金属蛋白酶9的mRNA表达与胃癌浸润转移的关系

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物mRNA(UPAmRNA)及基质金属蛋白酶 9mR NA(MMP 9mRNA)在胃癌中的表达及其与肿瘤类型、生长方式、分化、脉管侵犯、转移和预后的关系。方法应用原位杂交技术 ,检测 10 5例胃癌组织中UPA和MMP 9的mRNA。结果 10 5例胃癌中UPAmRNA及MMP 9mRNA的阳性率均为 5 8 1% ;UPAmRNA阳性表达率与组织学类型(r =0 12 3,P =0 2 10 )和分化程度 (r =0 10 2 ,P =0 2 98)无关 ,而与肿瘤生长方式 (r =0 344 ,P =0 0 0 1)、浸润深度 (r=0 2 96 ,P =0 0 0 2 )、脉管侵犯 (r =0 198,P =0 0 4 2 )、淋巴结转移 (r =0 332 ,P=0 0 0 1)和远处转移 (r =0 5 30 ,P =0 0 0 1)呈正相关 ;MMP 9mRNA阳性表达率与组织学类型 (r =0 14 3,P =0 14 5 )和分化程度 (r =0 10 2 ,P =0 2 98)无关 ,而与肿瘤生长方式 (r =0 2 6 7,P =0 0 0 6 )、浸润深度 (r=0 335 ,P =0 0 0 1)、脉管侵犯 (r =0 2 0 9,P =0 0 32 )、淋巴结转移 (r =0 343,P=0 0 0 1)和远处转移 (r =0 4 6 8,P =0 0 0 1)呈正相关 ;UPAmRNA表达水平与MMP 9mRNA呈正相关 (r =0 2 37,P =0 0 15 ) ;UPAmRNA和MMP 9mRNA阳性表达病例的平均生存时间和 5年生存率均明显低于阴性表达的病例。结论UPAmRNA和MMP 9mRNA的表达可预?

细胞周期素E和表皮生长因子受体在乳腺癌中的表达及与预后的关系

目的探讨细胞周期素E(cyclinE)和表皮生长因子受体 (epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)在乳腺癌组织中的表达及其与转移复发和预后的关系。方法应用免疫组织化学方法检测110例乳腺癌组织中cyclinE蛋白和EGFR蛋白的表达水平。结果 110例乳腺癌中cyclinE和EGFR的阳性率均为 5 4 5 5 % ,这两种蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关 (rs=0 82 3,P =0 0 0 1) ;乳腺癌组织中cyclinE和EGFR表达与肿瘤临床分期 (χ2 =12 86 ,P =0 0 0 5 ;χ2 =14 2 1,P =0 0 0 4 )、组织学分级 (χ2 =8 86 ,P =0 0 0 5 ;χ2 =4 90 ,P =0 0 4 )、淋巴结转移 (χ2 =10 2 2 ,P =0 0 0 1;χ2 =9 6 2 ,P =0 0 0 2 )、ER(χ2 =2 9 87,P =0 0 0 1;χ2 =32 0 8,P =0 0 0 1)、PR(χ2 =19 5 6 ,P =0 0 0 1;χ2 =2 6 92 ,P =0 0 0 1)均相关 ;cyclinE和EGFR阳性表达组的病例有局部复发和远处转移的发生率明显高于阴性表达组的病例 (χ2 =7 33,P =0 0 1;χ2 =7 88,P =0 0 0 5 ) ;cyclinE和EGFR阳性表达病例的平均生存时间和 5年生存率均明显低于阴性表达的病例。结论cyclinE和EGFR的表达可预测乳腺癌的转移和复发 ,是指导临床治疗及估计预后的有意义指标。