TXNRD1在肝细胞癌中活性氧相关细胞凋亡导致多药耐药性中的作用

目的耐药性是肝细胞癌(HCC)化疗失败的主要原因,硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)作为活性氧(ROS)代谢的主要影响因素,已被证明与HCC患者的不良预后有关。本研究探究TXNRD1在HCC多药耐药机制中的作用。方法选取BEL-7402细胞系的BEL/FU细胞作为多重耐药细胞株。siRNA用来干预细胞TXNRD1的表达;实时定量PCR和蛋白质印迹检测TXNRD1的表达;CCK-8法检测和流式细胞术检测用来评估TXNRD1对肝癌细胞ROS蓄积、5-氟尿嘧啶(5-Fu)和多柔比星(DOX)耐药性以及体外凋亡的影响;异种肿瘤移植模型的构建用来研究金诺芬(AUR)在体内对细胞耐药性的影响。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果BEL/FU作为多重耐药HCC细胞系表现出TXNRD1 mRNA与蛋白水平的高表达(P值均<0.05)。AUR作为TXNRD1的抑制剂,联合化疗药物5-FU及DOX处理与单一化疗药物处理相比,细胞克隆集落形成数目明显减少(P值均<0.01),凋亡比例明显增加(P值均<0.001)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)作为ROS的清除剂,可以明显削弱siRNA敲低TXNRD1表达对BEL/FU细胞耐药性的影响,应用NAC可以有效降低干扰后细胞的凋亡比例(P值均<0.001)。动物实验也证实,5-Fu与AUR联合治疗相对于单一5-Fu治疗,裸鼠的肿瘤质量更轻(P<0.001),体积更小(P<0.001)。结论TXNRD1在HCC耐药中扮演重要角色,抑制其在细胞水平作用可有效改善耐药性,AUR作为TXNRD1抑制剂在HCC综合治疗中也具备极大的应用前景。