浅论医学研究生科研素养的培养

国家建设“双一流”大学,需要汇聚一流人才,获得一流成果,其中最重要的是研究生教育。以往国内医学研究生培养过程中采用传统的教育模式,导致学生在科研过程中缺乏发现和解决科学问题的主动性,科研创新思维能力不足。因此,只有提升医学研究生的科研素养,才能促进国家医学创新型人才的培养。科研素养是科研工作者应具备的基本素质,包括学术道德素养、科研理论素养和科研能力素养3个方面。文章从学校、导师和研究生三个层面来探讨医学研究生科研道德素养,基本理论素养和科研能力的培养策略,只有培养医学研究生养成良好的学术道德和严谨的科研态度,获得系统的理论知识和坚定的科研自信,形成扎实的科研能力和积极创新的科研态度,这样才能最终提高医学研究生的创新能力。

五味子乙素对MRP介导的肿瘤多药耐药逆转作用的研究

目的探讨五味子乙素(SchB)对表达MRP1的肿瘤耐药细胞株的逆转耐药作用及相关机制。方法噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度SchB对柔红霉素(DNR)抑制HL60／ADR生长及同一浓度SchB对不同化疗药物抑制HL60／ADR和HL60/MRP细胞生长的影响;流式细胞仪检测SchB作用前后,HL50／ADR和HL60／MRP细胞内化疗药物DNR和MRP1特异性底物CFDA积聚的变化。结果4～25μM Sch B作用范围内浓度依赖性下降,逆转倍数显著上升;SchB可有效降低HL60／ADR、HL60/MRP对DNR、长春新碱(VCR)和VP16的IC50,逆转倍数2倍到20倍不等;SchB能够增加DNR和MRP1特异性底物CFDA在细胞内的积聚。结论SchB对同一细胞MDR的逆转与浓度相关,在一定浓度范围内,依浓度增加而增加;SchB可以逆转不同化疗药物对MRP1介导的耐药,其逆转机制与增加化疗药物的积聚能力有关。

结合小类配平法的Logistic回归提高大肠肿瘤筛查效果的研究

目的研究结合小类配平法的Logistic回归能否提高大肠肿瘤筛查的效益。方法通过增加病例样本量,均衡病例与对照样本比例后对浙江嘉善的6个乡镇筛查人群结果进行结合小类配平法的Logistic回归分析,并在另一筛查乡镇(天凝镇)的人群中验证结合小类配平法的Logistic回归对大肠肿瘤筛查的效益。结果 6个乡镇在病例对照样本明显不均衡(病例为对照的4.7%,即进展期肿瘤样本为非进展期肿瘤样本量的4.7%)的情况下,进展期肿瘤的分类准确率(敏感度)为0.1%,而非进展期肿瘤的分类准确率为99.9%。将小类病例样本数复制扩增,随着两类样本数量逐渐接近,进展期肿瘤判断准确率相应上升。病例和对照样本比例为1.1时,进展期肿瘤的敏感度提高至82.2%,特异度为46.5%。在验证的天凝镇人群中同样发现,在病例和对照样本比例为0.7时,进展期肿瘤的敏感度为64.6%,特异度为63.6%;病例复制后与对照样本比例提高至1.3,敏感度提高至89.7%,而特异度降至30.6%。结论初步研究表明,通过结合小类配平法的Logistic回归能够显著提高大肠肿瘤筛查中对进展期肿瘤的敏感度,从而提高筛查效益。

基质金属蛋白酶7在肿瘤中的作用研究进展

基质金属蛋白酶7(MMP7)通过酶解胞外基质蛋白和抑制fas/fasl介导凋亡信号的转导,在肿瘤发生、发展、预后的预测以及某些药物的耐药方面发挥着重要的作用。文章就MMP7在肿瘤中的作用和可能机制及其在肿瘤治疗方面的研究进展作一综述。

2023年第2版《NCCN恶性骨肿瘤临床实践指南》更新解读

美国国家综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)是由美国32家顶尖癌症中心组成的非盈利联盟组织,致力于改善和促进高效和优质的癌症医疗服务。作为全世界范围内最权威的癌症研究机构之一,NCCN每年定期更新发布临床实践指南,旨在提供注重实证和讲求共识的癌症管理方案。该指南是目前癌症管理中临床指导和政策的公认标准,也是医学领域最全面、最常更新的临床实践指南。目前2023年《NCCN恶性骨肿瘤临床实践指南》已更新至第2版,其较2022年第2版主要在骨巨细胞瘤、骨肉瘤、尤文肉瘤、高肿瘤突变负荷患者的药物治疗及恶性骨肿瘤的放疗原则等方面进行了更新,本文就新版指南的更新内容进行逐一解读。

胃肠胰神经内分泌肿瘤诊疗进展

神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasm,NEN)的发病率和患病率近年来迅速增长,其中以原发于胃肠道和胰腺的NEN最常见。2022年,美国国家综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)NEN指南及中国胃肠胰NEN专家共识进行了更新。本文主要参照比对2022年NCCN指南及2022版中国胃肠胰NEN专家共识对NEN的诊疗新进展进行评述。

肿瘤新抗原预测与鉴定的研究进展

肿瘤新抗原是肿瘤免疫治疗的特异性靶标,具有高度异质性。如何准确且快速地鉴定肿瘤新抗原是其应用于临床肿瘤免疫治疗的关键,目前仍处于早期开发阶段且具有挑战性。根据基因组测序、转录组测序或表位肽质谱数据、并结合计算工具评估免疫原性是肿瘤新抗原预测和鉴定的基本方法。

美国医学教育对我国肿瘤专科医师培养的启示

恶性肿瘤仍是我国乃至全世界最主要及最棘手的公共卫生问题之一,在导致大量肿瘤相关死亡的同时为社会经济带来了沉重的负担。2020年,我国的恶性肿瘤新发病例数和肿瘤相关死亡数分别占全世界总数的24%和30%[1]。并且随着我国人口老龄化不断加深、经济发展模式转变以及人民生活方式的改变,由恶性肿瘤引起的疾病相关负担可能呈现持续快速增长的态势。因此,这严峻的形势也为我国肿瘤学科的发展和对肿瘤专科医学人才的培养提出了更高的要求。

2023年度生命科学部科学基金项目评审工作综述

本文总结了2023年度生命科学部各类科学基金项目评审情况,梳理了本年度科学基金深化改革的实施情况,并提出下一年度项目评审的工作思路。

结直肠癌研究30年回顾和现状

结直肠癌是我国常见癌症之一。30年来,结直肠癌发病率年均上升3%~4%,但地区差异较大,如上海2012年发病率达56/10万。从全局看,我国结直肠癌发病仍暂处非高发水平。世界卫生组织国家癌症研究代表处（Internatinal Agency for Research on Cancer,IARC）发表的Globocan 2012估算中国大陆结直肠癌标化发病率为14.2/10万。

基于芯片和生物信息学分析结直肠癌肝转移中差异表达的微小RNA及其意义

目的分析有肝转移与无肝转移的结直肠癌微小RNA(microRNA,miRNA)表达的差异及其与结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases,CRLM)发生的关系。方法收集2011年2月1日至2018年9月10日浙江大学医学院附属第二医院60例有肝转移(n=29)和无肝转移(n=31)的结直肠癌新鲜标本,采用Agilent芯片检测miRNA表达,利用Gene Spring GX v11.5.1软件筛选出差异表达的miRNA。进一步收集2003年3月1日至2012年12月31日浙江大学医学院附属第二医院62例有肝转移(n=31)和无肝转移(n=31)的结直肠癌4%甲醛固定的石蜡包埋(formalin-fixed and paraffinembedded,FFPE)标本,对差异miRNA表达进行验证。利用Gene Ontology(GO)功能数据库及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)数据库进行靶基因的信号通路的富集,推测CRLM相关通路。TCGA数据库分析CRLM组织与正常肝脏组织中miR494、miR19a、miR223和miR20a的表达。通过反向传播(back propagation,BP)神经网络模型构建CRLM的预测模型。结果对新鲜结直肠癌样本肝转移组和无肝转移组进行miRNA芯片分析,筛选出差异表达的miRNA,包括miR19a、miR20a、miR223和miR494。实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证显示,FFPE肝转移组和无肝转移组miR19a、miR20a、miR223和miR494的表达水平比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示,FFPE肝转移组miR494、miR19a和miR223高表达和低表达患者总生存期比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。TCGA数据库分析显示,miR494、miR19a、miR223和miR20a在正常肝脏组织和CRLM组织中的表达比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。通过BP神经网络模型构建miR494、miR19a、miR223和miR20a联合预测CRLM发生的准确度高,曲线下面积(area under the curve,AUC)为1.000。结论miR494、miR19a、miR223和miR20a在CRLM患者原发灶中差异表达,与患者生存相关。miR494、miR19a、miR223和miR20a共同预测CRLM发生的准确度高。

康莱特注射液对肺癌A549细胞环氧化酶作用的研究

目的:研究康莱特注射液对IL-1β刺激后A549肺癌细胞环氧化酶(COX)表达的抑制作用.方法:用妹RT-PCR方法检测100～300μL·mL-1不同含量康莱特注射液作用前后A549肺癌细胞COX-1,COX-2 mRNA表达变化,同时用Western-blot检测COX-2蛋白表达变化.结果:A549细胞在康莱特注射液作用前后COX-1的mRNA表达无明显变化,但COX-2的mRNA和蛋白表达随着药物作用浓度增加而逐渐降低.结论:康莱特注射液能选择性抑制A549肺癌细胞COX-2表达.

人组织中大肠癌负相关基因ST13的蛋白表达研究(英文)

目的原核表达大肠癌负相关基因ST13，制备ST13蛋白单克隆抗体，研究人大肠等组织中表达的STl3蛋白的生物学特性。方法将ST13ORF克隆至GST融合蛋白表达质粒，原核表达并以Glutathione纯化GST-ST13蛋白，以凝血酶切得到ST13蛋白。以GST-ST13融合蛋白免疫小鼠，以ST13蛋白筛选杂交瘤细胞株，按杂交瘤技术制备STl3蛋白单克隆抗体，并以ST13蛋白亲和层析纯化单抗。以该单抗作Western-blot及免疫组化检测临床标本。结果蛋白表达和纯化以SDS-PAGE证实。融合蛋白表达量占大肠杆菌总蛋白20％，每升培养物回收融合蛋白2．5mg，纯度为91．3％。建立了3个ST13蛋白单抗的杂交瘤细胞株，腹水中单抗的ELISA效价达104～105，并具有对STl3蛋白的高度特异性。Westem-blot证实组织细胞中天然ST13蛋白的SDS-PAGE表观分子量约50KD，比其计算分子量大约10KD，但无糖基化修饰。免疫组化表明该蛋白均匀分布于SW480细胞及大肠上皮细胞浆，计算机分析系亲水性分子。免疫组化还表明该蛋白可表达于大肠、胃及肝等多种组织上皮，但在各种正常组织和肿瘤组织之间，正常组织之间，以及肿瘤组织之间的的着色强度不一。结论原核表达了ST13蛋白，制备了相应的单抗，建立了检测组织标本中ST13蛋白的方法。研究表明人组．织ST13蛋白系表观分?

五味子乙素促进多柔比星诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡的研究

目的验证五味子乙素对多柔比星(阿霉素)诱导肝癌细胞SMM C 7721凋亡的促进作用。方法M TT法测定药物对细胞存活的影响;流式细胞仪P I染色测定药物引起的细胞凋亡率,R-藻红蛋白标记测定P糖蛋白表达,R hodanm in 123(R h123)标记检测线粒体膜电位变化;流式细胞仪测定五味子乙素对阿霉素积聚外排的影响;W estern b lot检测药物作用后相关蛋白(caspase-3和PARP)表达。结果五味子乙素能显著促进阿霉素诱导人肝癌细胞系SMM C 7721凋亡(P<0.01),但不增强阿霉素对正常细胞(大鼠心肌细胞和人纤维原细胞)的毒性作用。这种增敏作用与五味子乙素对P糖蛋白及其它药泵的抑制作用无关,但与caspase的激活相关。结论五味子乙素能促进阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡,但不增加阿霉素对正常细胞的毒性作用。

siRNA干扰大鼠神经元Nogo受体mRNA表达的时程研究

目的:观察大鼠Nogo受体(NgR)特异性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)在原代神经元干扰其mRNA表达的时程效果。方法:体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,应用阳离子脂质体转染试剂转染针对2个基因片段(199和964位点)的大鼠NgR特异性siRNA和对照siRNA,分别于转染后24h、48h、72h和96h,应用实时荧光定量PCR检测NgRmRNA表达情况。结果:2对siRNA(siNgR199和siNgR964)均能够下调靶基因mRNA的表达水平,24h、48h、72h和96h,NgRmRNA表达分别为对照siRNA组的38.12%、12.47%、3.96%、18.4%(siNgR199)和49.54%、24.25%、13.17%、37.93%(siNgR964),与对照siRNA组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:NgR特异性siRNA能够在原代皮层和海马细胞下调靶基因mRNA的表达水平,且基因沉默效果在转染后3d最显著。

卡瑞利珠单抗联合化疗治疗局部晚期食管癌引起心源性休克一例

食管癌在全球癌症发病率中排第7位,在癌症相关死亡原因中排第6位[1]。病理类型上,食管癌主要为食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和食管腺癌。ESCC占>90%,中国约60%~70%的患者确诊时为局部晚期或晚期,治疗手段局限且效果不佳[2]。免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)改变了ESCC的治疗格局,但免疫相关不良反应(immunerelated adverse events,irAEs)也随之出现,其中心脏毒性尤其是免疫性心肌炎罕见但致命。本文报道1例新辅助应用卡瑞利珠单抗联合化疗治疗的局部晚期ESCC病例,治疗效果良好且手术成功,但术后经历4级ICIs相关应激性心肌炎合并心源性休克,为ESCC术前联合治疗模式及免疫性心肌炎的诊治提供经验和参考。

原发性阑尾肿瘤临床误诊原因分析

目的 探讨原发性阑尾肿瘤的误诊原因 ,提高阑尾肿瘤的急诊水平。方法 回顾性分析 2 7例住院手术并经病理确诊为阑尾肿瘤患者的临床资料。结果 2 7例阑尾肿瘤仅 2例术前获确诊。误诊为急性阑尾炎和慢性阑尾炎急性发作 16例 ,误诊为妇科肿瘤 3例 ,肠梗阻 4例 ,消化道出血 2例 ,误诊率 92 .6% ( 2 5 /2 7)。二次手术率为 2 9.6% ( 8/2 7)。病理诊断黏液腺癌 9例 ,类癌 7例 ,腺癌 3例 ,印戒细胞癌 2例 ,腺瘤 6例 (其中 2例发生恶变 )。术中可疑为肿瘤者行快速冷冻切片 ,病理检查确诊为恶性者行右半结肠切除术者 2 2例 ;良性肿瘤和肿瘤直径小于 1cm的类癌行阑尾单纯切除术者 5例。结论 阑尾肿瘤最易误诊为阑尾炎和慢性阑尾炎急性发作 ,对急诊患者应重视阑尾肿块的手术中探查及处理 ;对不能判定性质的肿块 ,术中应常规做冷冻切片行病理检查 。

人参皂苷Rg_3对NK细胞与K562细胞的结合率及毒性作用影响的实验研究

目的:观察人参皂甙Rg3对NK细胞与K562细胞的结合率及毒性作用的影响,并探讨其直接抑制及诱导凋亡、抑制肿瘤新生血管形成等以外的机制。方法:采用流式细胞术检测不同浓度Rg3作用后NK细胞结合K562细胞的百分率以及NK细胞对K562细胞的直接毒性。结果:在Rg3浓度为0～50μg/mL范围内,NK细胞与K562细胞的结合率与浓度呈正相关。结论:Rg3能通过激活NK细胞,提高NK细胞与K562细胞的结合率,增强NK细胞的杀伤活性,从而起到抗肿瘤作用。

小檗胺诱导白血病细胞株NB4细胞凋亡及其机制的研究

目的:探讨小檗胺对白血病细胞系NB4生长的影响及其机制。方法:体外培养人白血病细胞株NB4细胞,经不同浓度小檗胺处理不同时间后,MTT法检测药物对NB4细胞的抑制作用;细胞形态学观察和DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测DNA含量及细胞周期;巢式PCR及RT-PCR检测PM L/RARα融合基因及Surv iv in基因表达及流式细胞仪检测Caspase3阳性表达率。结果:经不同浓度小檗胺处理不同时间后,NB4细胞生长出现明显的抑制,并呈现明显的时间剂量依赖性,48 h IC50为3.860μg/m l;细胞形态学观察可见细胞凋亡现象,DNA琼脂糖电泳显示典型的凋亡梯形图;流式细胞仪检测发现细胞凋亡率明显增加,经48 h作用后,凋亡率从2.83%增至12μg/m l时的58.44%;虽未发现药物作用后PM L/RARα基因表达量的改变,但检测到NB4细胞经药物作用后Surv iv in基因表达量的减少和Caspase3表达的增加,Caspase3阳性率从对照组的2.06%增至12μg/m l时的70.89%。经相关性分析,随着细胞Surv iv in表达水平的下降和Caspase3表达水平的增高,NB4细胞凋亡率相应地增高。结论:小檗胺对NB4细胞有增殖抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用的重要机制之一,但不是通过作用于NB4细胞特异性融合基因PM L/RARα发挥作用的,其抗凋亡的可能分子机制之一是抑制Surv iv in基因的表达和增加Caspase3的表达。