MicroRNA143调节结肠癌细胞KRAS蛋白的表达

目的:探讨结肠癌细胞中microRNA143(miR-143)对KRAS蛋白表达的影响及其作用机制。方法:从基因组DNA中克隆pri-miR-143基因,构建miR-143的表达载体。miR-143转染结肠癌细胞系SW480,用Northern blotting方法测定miR-143水平的变化,通过RT-PCR和Western blotting方法检测转染细胞中KRAS基因的表达。构建含miR-143结合位点的荧光素酶报告载体,与miR-143表达载体共转染,检测细胞中的荧光素酶活性。结果:基因转染的SW480细胞中miR-143的表达显著升高,KRAS蛋白的表达水平下降约40%,KRAS mRNA则未受影响。miR-143表达载体与含miR-143结合位点的报告载体共转染可以抑制细胞中的荧光素酶活性。结论:结肠癌细胞中microRNA143在转录后水平抑制KRAS蛋白的表达。

microRNA143表达对结肠癌组织中细胞增殖的影响及其作用机制

目的探讨microRNA143（miR-143）表达对结肠肿瘤组织中细胞增殖和K-ra8基因表达的影响。方法采用Northernblot方法检测21例结肠癌组织和癌旁组织中miR-143的表达；构建miR-143的表达载体，将其转入人结肠癌细胞系SW480，用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）方法检测miR-143转染对细胞增殖的影响；通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot方法检测K-ras mRNA和蛋白的表达变化。结果在21例结肠癌组织标本中，有17例（81．0％）癌组织的miR-143表达水平低于癌旁组织。基因转染的SW480细胞中，miR-143表达水平显著升高，细胞增殖被抑制，K-ras蛋白的表达水平下降约40．3％，而K-ra8mRNA水平未受影响。结论miR-143在结肠癌组织中的表达明显低于癌旁组织，转染细胞中高表达的miR-143能够抑制细胞增殖，下调K-ra8蛋白的表达。

中国人家族性结直肠癌错配修复基因大片段变异分析(英文)

目的分析中国人家族性结直肠癌错配修复基因大片段变异的特点。方法采用多重连接探针扩增技术,分析32例具有家族史结直肠癌、20例散发性结直肠癌患者错配修复基因MSH2的16个外显子、MLH1的19个外显子及7个其它基因外显子的拷贝数。研究工作包括(1)双盲法分析阴性和阳性对照样本,完成方法学可靠性检验;(2)分析结直肠癌患者外周血细胞DNA,筛查MSH2和MLH1基因大片段变异。结果多重连接探针扩增技术分析系统稳定检出阳性对照样本的DNA大片段缺失;在3/32(9.4%)具有家族聚集性结直癌患者中检出遗传性MSH2基因DNA大片段缺失。而在20例散发性结直肠癌患者未检出这类突变。结论中国人家族性结直肠癌患者中错配修复基因的大片段变异是频发事件,对此类患者的遗传检测应包含错配修复基因大片段变异的筛查。

左右半大肠癌的差异

结直肠癌的发病率在发达国家呈下降趋势，与结肠镜筛查、人口老龄化、饮食结构调整、癌症和糖尿病发病率升高等有关，性别、种族、教育等因素也起一定作用。右半大肠癌中，低分化和晚期疾病比例高，腺癌中黏液成分多，易出现并发症和肠内第二原发肿瘤；而左半大肠癌多呈高分化，诊断时偏早期。分子机制上，右半大肠癌与错配修复基因密切相关，而左半大肠癌与 p53突变联系紧密。左、右半大肠癌存在众多表观和遗传学差异，可能属于两种不同的疾病，在临床工作和试验中应区别对待。