花姜酮对急性肝损伤大鼠Nrf2/HO-1/NQO-1氧化应激损伤的影响

目的探讨花姜酮对四氯化碳诱导的急性肝损伤大鼠肝脏氧化应激损伤的影响。方法按随机数字表法将大鼠分为空白组、模型组、联苯双酯组(3.75mg/kg)、花姜酮低剂量组(5mg/kg)、花姜酮高剂量组(10mg/kg),每组10只。腹腔注射给药,每天1次,每次注射0.8mL相对应药物,连续注射5d。空白组、模型组注射等体积生理盐水。末次注射给药2h后,模型组、联苯双酯组及花姜酮低、高剂量组腹腔注射0.2%四氯化碳花生油溶液(0.01mL/g),空白组予等体积花生油腹腔注射。注射四氯化碳花生油溶液后16h,戊巴比妥钠麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠肝功能指标天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;切取部分肝脏组织,ELISA法检测大鼠肝脏中氧化指标锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、羟自由基(·OH)、活性氧(ROS)含量;ELISA法检测肝脏组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ(ComplexⅠ、Ⅲ)活性;蛋白免疫印迹法检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf-2)、醌氧化还原酶-1(NQO-1)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;切除部分肝脏,HE染色观察肝组织病变程度。结果与模型组比较,花姜酮高、低剂量组大鼠血清AST[(15.87±2.27)U/mL、(26.06±3.81)U/mL比(36.72±3.36)U/mL]、ALT[(15.85±1.83)U/mL、(24.52±2.62)U/mL比(31.46±2.87)U/mL]含量降低(P<0.05);肝组织中Mn-SOD[(28.02±2.16)U/μg、(22.26±1.81)U/μg比(18.37±1.19)U/μg]、CAT[(247.63±20.82)U/mg、(203.35±19.43)U/mg比(181.35±18.68)U/mg]、ComplexⅠ[(103.49±8.52)nmol·min/mg、(91.38±7.43)nmol·min/mg比(65.89±5.61)nmol·min/mg]、ComplexⅢ[(56.24±1.65)nmol·min/mg、(44.72±1.71)nmol·min/mg比(17.73±1.52)nmol·min/mg]活性及ATP[(37.67±2.72)nmol/mg、(28.13±2.48)nmol/mg比(22.52±1.78)nmol/mg]含量较高,MDA[(10.18±2.15)μg/mL、(13.26±1.64)μg/mL比(17.92±3.22)μg/mL]、·OH[(4.13±1.52)nmol/mg、(5.39±1.44)nmol/mg比(8.64±1.42)nmol/mg]、ROS[(0.41±0.13)μg/mL、(0.62±0.15)μg/mL比(0.85±0.23)μg/mL]的含量较低(P<0.05);肝组织中HO-1[(0.72±0.13)、(0.56±0.12)比(0.32±0.05)]、NQO-1[(0.29±0.06)、(0.24±0.04)比(0.19±0.04)]、Nrf-2[(0.57±0.07)、(0.31±0.03)比(0.11±0.02)]蛋白表达增加(P<0.05)。结论花姜酮对急性肝损伤大鼠肝脏氧化应激损伤能起到保护作用,其作用机制可能与提高抗氧化因子活性,减少肝脏中ROS、·OH堆积,调节Nrf2/HO-1/NQO-1信号通路,进而改善肝组织氧化应激状态有关。