正常人外周血αβ T细胞TCR β链CDR3多态性和长度分析

采用免疫扫描谱型分析技术,分析正常人外周血T细胞TCRβ链CDR3的多态性和长度分布.提取6例正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell-PBMC)的总RNA,逆转录成cDNA,以24个TCR BV基因家族为上游引物,共同的TCR BC基因为下游引物(荧光标记),6例样品PCR产物的基因扫描分析表明,24个TCRBV家族的CDR3谱型分析在1.5%琼脂糖凝胶电泳图上显示1个模糊条带.序列测定结果显示,各TCR BV家族的CDR3谱型均超过8个条带.GeneScan分析证明,正常人外周血T细胞的24个TCR BV家族的CDR3谱型为标准的高斯分布,各家族的CDR3表达频率相近,呈现不同的CDR3多态性和不同的CDR3长度.多数TCR BV家族产物为框架内重排(相邻2个PCR产物相差3个碱基),少数TCR BV家族表现为两个峰群的重排.该研究对正常人TCRβ链CDR3谱系的详细分析将为T细胞应答、TCR重组等研究提供基础.利用免疫谱型分析技术能监测到TCR CDR3谱型分布特征和表达频率的变化.

慢性丙型肝炎患者干扰素治疗前后血清细胞因子变化的研究

目的:观察慢性丙型肝炎患者干扰素治疗前后白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,探讨它们在慢性丙型肝炎发病中的作用。方法:酶联免疫吸附(ELISA)法检测15例正常人、30例丙型肝炎病毒携带者及30例慢性丙型肝炎患者(包括干扰素治疗前、后)血清中细胞因子水平。结果:慢性丙型肝炎患者血清中上述细胞因子显著高于正常对照组(P<0.05)及丙型肝炎病毒携带者组(P<0.05),其值与谷丙转氨酶(GPT)呈显著正相关;经干扰素治疗后上述细胞因子水平均明显降低(P<0.05),IFN抗病毒治疗前血清中IL-10水平由高到低依次为无应答组>部分应答组>完全应答组。结论:上述细胞因子共同参与慢性丙型肝炎的发病过程,并可用于评价干扰素对于机体免疫状态的影响;其中血清中IL-10水平对预测抗病毒疗效有重要意义。