碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵和外膜孔蛋白表达水平的研究

目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株,琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙(CCCP)前后对亚胺培南和美罗培南的MIC;RT-PCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平;十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western-blot)检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52.5%和59.2%,加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化;52.0%(51/98)美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达(P<0.05),43.7%(59/135)亚胺培南耐药株OprD2显著低表达(P<0.05),14.8%(20/135)亚胺培南耐药株OprD2表达缺失;SDS-PAGE和Western-blot显示与标准菌株PAO1相比,OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低,表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。

我国28家医院中铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及同源性分析

目的调查中国16个城市28家医院铜绿假单胞菌碳青霉烯类抗生素耐药情况、产金属酶情况及同源性。方法收集中国16个城市28家医院2006年7月到2007年7月临床分离的我国医院内病原菌耐药监测（NPRS）所保留的铜绿假单胞菌菌株654株。采用琼脂稀释法测定亚胺培南、美罗培南的MIC，脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析碳青霉烯类耐药菌株同源性；Etest法进行金属酶表型筛选；PCR扩增及克隆测序分析金属酶基因型，实时荧光定量逆转录PCR（realtime RT-PCR）检测金属酶的转录水平。结果共筛选出275株碳青霉烯类抗生素不敏感株，其中259株为耐药株，亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为37．5％（245／654）和28．0％（183／654）。275株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中金属酶表型阳性率6．55％（18／275），金属酶基因型阳性率8．73％（24／275）。6株金属酶基因型阳性而表型阴性菌株的金属酶相对表达量显著低于18株金属酶表型阳性菌株（Z=-2．335，P〈0．05）。259株碳青霉烯类抗生素耐药菌株PFGE分属89个型，24株金属酶基因型阳性菌株来自6个城市，分为9个PFGE克隆型。结论我国铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率高；未发现铜绿假单胞菌大范围单克隆株流行。产金属酶不是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制。

医院感染：现状与对策

医院感染（HAI）是现代医疗、保健所面临的重大挑战，不仅导致患者住院时间延长、医疗费用增加，而且还会导致病死率上升、医疗技术进步受阻；有研究表明外科伤口感染者因HAI平均延长住院时间8．2d，美国每年因HAI死亡近10万人，直接经济负担超过150亿美元；英国每年因HAI平均延长住院天数4d，造成经济损失45亿美元。

多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排机制

铜绿假单胞菌（PA）对多种抗菌药物都有不同程度的耐药，其耐药机制包括酶的产生、生物被膜的形成、外排泵的高表达和外膜孔蛋白表达的降低或缺失，其中多药外排泵能排出多种结构和功能不相关的抗菌药物，包括β-内酰胺类、氟喹诺酮类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素、氯霉素等，目前被认为是导致PA固有和获得性多重耐药的重要原因。

南昌市2011年手足口病流行特征及病原检测结果

手足口病是由肠道病毒引起的急性传染病，以手足皮肤和口腔黏膜疱疹为主要临床表现，重症病例可出现心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别病例如果病情发展快，可导致死亡。为了解南昌市手足口病流行病学特征，将2011年发病情况和监测结果分析如下。

肝实质细胞和肝非实质细胞及非肝细胞的共培养

生物人工肝有望成为肝衰竭患者有效的体外肝支持治疗手段，而建立生物人工肝的前提是要获得足够数量高活性和良好功能的肝细胞。大量研究发现，肝细胞共培养能明显增强肝细胞功能，保持肝细胞的表型。此文就近年来肝细胞和非实质细胞、非肝细胞共培养的效果、方法和可能的机制作了综述。

慢性重型乙型肝炎人工肝血浆置换疗法的临床研究

目的观察慢性重型乙型肝炎人工肝支持系统（artificial liver support system，ALSS）-血浆置换（plasma exchange，PE）治疗前后临床症状、肝功能、凝血功能及IL-10的变化。方法将151例慢性重型乙型肝炎患者分成治疗组和对照组，治疗组在综合药物治疗的基础上加用ALSS-PE，而对照组仅采用药物治疗。治疗前后常规观察两组患者临床症状、肝功能、凝血酶原时间（PT）、凝血酶原活动度（PTA）及用ELISA法检测IL-10的变化。结果治疗组在临床症状、肝功能、PT、PTA等指标的改善上明显优于对照组（P〈0．05）；IL-10有上升趋势（P〈0．05）。结论ALSS-PE能明显提高药物治疗慢性重型乙型肝炎的疗效，升高IL-10，减轻肝脏炎症反应。

胚胎干细胞向肝细胞的诱导分化研究

胚胎干细胞在体外一定条件下能够分化为与原代培养肝细胞表型相似，并表达部分成熟肝细胞功能的类肝细胞。尽管目前在诱导条件的优化、分化过程的调控及临床应用的安全性等方面仍面临一系列问题，但研究胚胎干细胞向肝系的诱导分化及纯化，为终末期肝病的细胞移植治疗、生物人工肝及药物代谢和毒理研究提供了丰富的细胞来源。

冻存保护剂在肝细胞冻存中的研究进展

生物人工肝和肝细胞移植技术需要建立肝细胞库以提供大量具有高度活性和良好功能的肝细胞。肝细胞冻存技术的研究成为实现这一目标的关键，而对冻存保护剂的研究则是肝细胞冻存技术取得突破的主要方向，此文就近些年来国内外肝细胞冻存领域中冻存保护剂的研究进展进行了综述。